Dermális egyenértékűség. A klinikai vizsgálatok eredettörténete és eredményei

Az 1980-as évek végén a Stanford Egyetemen kifejlesztették a marhakollagén folyékony formáját, amely testhőmérsékleten puha, rugalmas szubsztráttá alakult. A gyógyszert számos európai országban regisztrálták és engedélyezték beültethető szerként, Zyderm Collagen Implantant néven. Ez a gyógyszer lett az első implantátum. Később más kontúrplasztikai eszközök is megjelentek, mint például a Restylane, Perlane, Pharmacrylic gél, Artecol, Biopolymer gél és mások. Ezeket a gyógyszereket nemcsak a kontúrmodellezésre és az életkorral összefüggő bőrelváltozások korrekciójára kezdték használni, hanem a hegek kezelésére, pontosabban a simítására is. Mindegyiket a heg alja alá injektálták.

A hipotrófiás hegek kezelésének fejlettebb módszerei utáni kutatás vezetett el minket ahhoz az ötlethez, hogy mesterségesen létrehozott bőranalógot használjunk erre a célra - a "dermális ekvivalenst" (DE), amely szintén folyékony kollagént használ. Számos lehetőség kínálkozott a mesterséges bőrpótlókra, de az általános elképzelés az volt, hogy a dermis szerkezeti komponenseiből bőrszerű szövetet hozzanak létre, amely transzplantáció esetén nem lökődik ki, és jó szubsztrátként szolgál a dermis és az epidermisz saját komponenseinek benövéséhez. Ismert, hogy a dermis fő szerkezeti komponensei a sejtes, rostos elemek és az intersticiális anyag. A rostos elemeket főként a kollagén- és elasztinrostok képviselik, az intersticiális anyagot pedig a glikoproteinek, proteoglikánok és glikozaminoglikánok. A dermis fő funkcionális sejtes eleme a fibroblaszt, a fibroblasztok sejtpopulációja a dermis szinte összes szerkezeti komponensének képződésének forrása. Ezért a "bőrpótló" létrehozásakor a legtöbb tudós fibroblasztokkal és glikozaminoglikánokkal kevert kollagénszubsztrátot használ. Egy réteg keratinocitát visznek fel valamilyen formában a tetejére, hogy teljes bőrréteget hozzanak létre, és gyorsabban helyreállítsák az átültetett bőregyenérték életképességét, amit a keratinociták által kiválasztott számos növekedési faktor segít elő. Az „élő bőregyenérték” egyik első változatát E. Bell és munkatársai javasolták 1983-ban. A bőrfibroblasztokat kollagénnel, plazmával és növekedési táptalajjal keverték össze, ami egy gél kialakulásához vezetett, amelynek felületén keratinocitákat tenyésztettek. Mindezt 1-2 hétig in vilro tenyésztették, majd a bőregyenértéket érettnek tekintették, és életképes szövetet képviselt áttetsző, rugalmas tömeg formájában. A szerzők azt javasolták, hogy égési sérült betegek sebfelületére vigyék át, hogy újra létrehozzák a teljes rétegű bőrszerkezetet. Egyes szerzők proteoglikánokkal borított és fibroblasztokkal benépesített kollagénszivacsot vagy kollagénmátrixot használtak a bőregyenérték alapjául, amelyre autológ keratinocitákat növesztettek. Ennek eredményeként létrejött a bőr úgynevezett háromdimenziós modellje. A keratinociták sebfelszínre történő átviteléhez egyes szerzők kollagénből, glükózaminoglikánokból és kitinból álló mesterséges mátrixot, holttestek bőrét és sertésbőrt is használtak szubsztrátként. A tenyésztés kezdetétől számított 7-14 nap elteltével a dermist és az epidermiszt tartalmazó teljes rétegű transzplantátumot átültették a betegek vagy állatok sebeire.

A mesterséges bőrpótlót nemcsak égési sérültek bőrének helyreállítására használták, hanem gyógyszerek citotoxicitásának tesztelésére és növekedési faktorok in vitro tanulmányozására is.

A mély hipotrófiás hegek sebészeti dermabráziójának és az MPC transzplantációjának kombinációja véleményünk szerint nem volt elég hatékony, ezért megpróbáltuk kiegyenlíteni a bőrfelületet a hipotrófiás heg mélyedésébe juttatott dermális ekvivalens analógjának beültetésével. A laboratóriumban előállított folyékony kollagén, amelybe fibroblaszt szuszpenziót juttattunk, szolgált a dermális ekvivalens előállításának szubsztrátjává. A dermális ekvivalenst, akárcsak az MPC-t, egy erre a tevékenységre hitelesített speciális laboratóriumban állították elő, és a műtét napján és órájában jéggel ellátott üvegpalackban szállították a klinikára.

A műtéti hegpolírozást standard technikával végeztük a bőr antiszeptikus kezelése és 2%-os lidokainnal, novokainnal vagy ultrakainnal történő helyi érzéstelenítés után. A polírozás simította a hegfelszínt, és egyúttal megteremtette a feltételeket a tenyésztett sejtek vagy sejtösszetételek beágyazódásához. Ezt követően a fibroblasztokkal beoltott, lehűtött folyékony kollagén gélt steril spatulával felvittük a hipotróf hegek polírozott felületére (a heg mélyedésében), ahol a testhőmérséklet hatására polimerizálódott.

Ennek eredményeként 5-10 perc elteltével a fibroblasztokkal rendelkező kollagén folyékony állapotból sűrű gélállapotba polimerizálódott. Miután a DE besűrűsödött, egy szuszpenzióval vagy MPC-vel ellátott kötést helyeztünk rá egy hordozón.

Egy többrétegű steril kötést rögzítettek, akárcsak az MPC transzplantáció esetében. A heg felszínétől, a keratinociták elhelyezkedését tartalmazó sebfedőtől és az őrlés típusától függően a kötés 7-12 napon belül kilökődött.

A hipotrófiás hegek kombinált kezelésének módszere sebészeti dermabrázióval, majd a "bőregyenérték" és a keratinociták későbbi átültetésével, speciális sebkötözőkre növesztett többrétegű réteg formájában vagy szuszpenzió formájában a hegmélyedésbe, jelentősen jobb, kozmetikailag elfogadható eredményeket ér el a (-) szövet csökkenésével vagy teljes eltűnésével. A bőregyenérték a beteg saját szövetét (dermiszt) alkotja, a hegszövet az újonnan képződött szövet alatt marad. Az MPC normál vastagságú és funkcionális aktivitású epidermiszt hoz létre, aminek köszönhetően a heg általános megjelenése néhány hónap alatt jelentősen javul.

A hipotrófiás hegek kezelésének ez a taktikája ma optimálisnak nevezhető a probléma megoldásában. Azonban az általunk használt DE-variáns, amely fibroblasztokkal beoltott kollagéngél formájában készült, nem túl kényelmesen kezelhető. A hipotrófiás hegek kezelésére szolgáló DE-nek kezdetben vastagabbnak kell lennie, hogy a hegüregbe helyezhető, abban eloszlatható, majd a tetejére keratinocitákkal teli sebfedőt lehessen felvinni. Így elmondhatjuk, hogy a hipotrófiás hegek kezelésének ez az iránya csak körvonalazódott, de a további fejlesztésére és tanulmányozására vonatkozó előrejelzések nagyon optimisták.

A többrétegű keratinocita rétegek terápiás anyagként való előállításának összetettsége és magas költsége ösztönözte a sejtösszetételek más lehetőségeinek keresését. A kutatók számára nagy érdeklődésre tart számot a fibroblasztok tenyésztése, amelyek sebfelületekre átültetve sok tekintetben hasonló hatást fejtenek ki a keratinocita-transzplantáció eredményeihez, de sokkal egyszerűbb és olcsóbb sejtes anyag. Tanulmányainkban több hipotrófiás hegekkel rendelkező beteget kezeltünk fibroblaszt szuszpenzió mezoterápiás injekciójával a hegek alá.

Mezoterápiás technikákkal (mikropapuláris, infiltratív) 1,5-2 millió sejt/ml koncentrációjú növekedési táptalajban lévő fibroblaszt szuszpenziót juttattak a hegek alá. A kezelések száma 4-10 volt, a heg korától, a beteg életkorától és a defektus mélységétől függően. Az ülések közötti időköz 7-10 nap volt. Az autológ és allogén fibroblaszt szuszpenzió beadását általában enyhe, átmeneti érrendszeri reakció kísérte.

Klinikai vizsgálatok eredményeként kiderült, hogy az átültetett MPC-k hatására a sebészeti dermabrázió utáni bőr- és heggyulladásos reakció időtartama csökken, és a sebfelszínek hámlása átlagosan 3-4 nappal felgyorsul.

Normotróf és hipertrófiás hegek kezelésekor a posztoperatív eróziók gyógyulásának felgyorsítása a legfontosabb, mivel itt rejlik az optimális terápiás hatás elérésének lehetősége.

A dermális ekvivalens átültetése a hipotróf hegek (-) szövetének feltöltéséhez vezetett, kiegyenlítette azok domborzatát, simította a környező bőrrel, aminek következtében a hegek területe jelentősen kisebb lett.

A fibroblaszt szuszpenzió hipotróf hegekbe történő bevezetése a bőrfelület simításához és a hegek területének csökkenéséhez is vezetett.

A sejtátültetés minden esetében utóhatást figyeltek meg, amikor néhány hónap alatt javult a hegek esztétikai megjelenése, amelyek hajlamosak voltak bőrszerű struktúrává alakulni.

Minden megfigyelt hatásunk a transzplantált sejtek biostimulációs potenciáljának érvényesülésével függ össze. Úgy tűnik számunkra, hogy a transzplantátumokban a sejtrétegek száma általában 10-30%-kal magasabb. Következésképpen a teljes sejtpotenciál területegységre vetítve már 10-30%-kal magasabb a normálisnál. Ezenkívül a keratinociták és fibroblasztok átültetésekor a legjobb eredményeket fiatal, egészséges emberektől származó sejtanyag átültetésével érték el. Ez a tény egyébként a fiatal és egészséges donoroktól származó allogén kultúra alkalmazása mellett szól. Az ilyen kultúra bioenergetikai és információs potenciálja átkerül a recipiensek saját, néha nem túl fiatal sejtjeibe, aminek köszönhetően javul a recipiensek saját szöveteinek és sejtjeinek "minősége".

Így a keratinocita és fibroblaszt kultúra használata lehetővé teszi:

• Gyorsítsa fel a hegek hámképződését dermabrázió után.
• Csökkentse a hegek láthatóságát nemcsak azáltal, hogy a felületüket a környező bőr felszínével egyenlíti ki, hanem egy teljes értékű hámréteget is képezve felettük.
• Javítja a sebészeti dermabrázió eredményeit a transzplantált sejtek citokinjeinek a hegre gyakorolt hatása miatt, amely végül bőrszerű struktúrává alakul.
• Esztétikailag lényegesen elfogadhatóbb eredmények elérése normotróf, hipotróf, hipertrófiás, atrófiás hegek és striák esetén.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]