Kolera vibrio

A WHO szerint a kolera egy fertőző betegség, amelyet akut, súlyos, dehidratáló hasmenés jellemez, rizsleves állagú széklettel, ami a Vibrio cholerae fertőzés következménye. Mivel a kolerát a járványokban való terjedésre való kifejezett képesség, a súlyos lefolyás és a magas halálozási arány jellemzi, a kolerát különösen veszélyes fertőzésnek tekintik.

A kolera történelmi hazája India, pontosabban a Gangesz és a Brahmaputra folyók deltája (ma Kelet-India és Banglades), ahol ősidők óta létezik (kolerajárványokat ebben a régióban már Kr. e. 500-ban megfigyeltek). A kolera endémiás gócának hosszú távú fennállását itt számos ok magyarázza. A koleravibrio nemcsak hosszú ideig képes túlélni a vízben, hanem kedvező körülmények között - 12 °C feletti hőmérséklet, szerves anyagok jelenléte - szaporodni is tud benne. Mindezek a körülmények Indiában is megfigyelhetők: trópusi éghajlat (átlagos éves hőmérséklet 25-29 °C), bőséges csapadék és mocsaras terület, magas népsűrűség, különösen a Gangesz deltájában, nagy mennyiségű szerves anyag a vízben, folyamatos, egész évben fennálló vízszennyezés szennyvízzel és ürülékkel, alacsony anyagi életszínvonal, valamint a lakosság egyedi vallási és kultusz szertartásai.

A kolerajárványok történetében négy korszakot lehet megkülönböztetni.

I. időszak - 1817-ig, amikor a kolera csak Kelet- és Dél-Ázsiában, főként Indiában koncentrálódott, és nem terjedt el határain túl.

II. időszak - 1817-től 1926-ig. India, valamint az európai és más országok közötti széleskörű gazdasági és egyéb kapcsolatok kialakulásával a kolera túllépett Indián, és a gazdasági és vallási kapcsolatok mentén terjedve 6 világjárványt okozott, amelyek millió emberéletet követeltek. Oroszország volt az első európai ország, ahol a kolera behatolt. 1823 és 1926 között Oroszország 57 koleraévet tapasztalt. Ez idő alatt több mint 5,6 millió ember betegedett meg kolerában, és 2,14 millió ember halt meg benne ("40%).

III. időszak - 1926-tól 1961-ig a kolera visszatért fő endémiás gócpontjába, és megkezdődött a relatív jólét időszaka. Úgy tűnt, hogy a modern ivóvíztisztító, szennyvízelvezető és fertőtlenítő rendszerek fejlesztésével, valamint a kolera elleni speciális intézkedések kidolgozásával, beleértve a karanténszolgálat létrehozását, a világ országai megbízhatóan védve lesznek egy újabb kolerainváziótól.

A negyedik időszak 1961-ben kezdődött, és a mai napig tart. A hetedik világjárvány nem Indiában, hanem Indonéziában kezdődött, gyorsan átterjedt a Fülöp-szigetekre, Kínába, az indokínai országokba, majd Ázsia, Afrika és Európa más országaiba. A világjárvány sajátosságai közé tartozik, hogy egyrészt a kolera vibrio egy speciális változata - a V. cholerae eltor - okozta, amelyet 1961-ig hivatalosan sem ismertek el a kolera kórokozójaként; másrészt időtartamát tekintve felülmúlta az összes korábbi világjárványt; harmadrészt két hullámban történt, amelyek közül az első 1990-ig tartott, a második pedig 1991-ben kezdődött, és Dél- és Észak-Amerika számos országát érintette, köztük az Egyesült Államokat is, ahol 1866 óta nem volt kolerajárvány. 1961 és 1996 között 146 országban 3 943 239 ember betegedett meg kolerában.

A kolera kórokozóját, a Vibrio cholerae-t 1883-ban, az ötödik világjárvány idején fedezte fel R. Koch, de a vibriót először 1854-ben, hasmenéses betegek székletében fedezte fel F. Pacini.

A V. cholerae a Vibrionaceae családba tartozik, amely számos nemzetséget foglal magában (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). A Vibrio nemzetség 1985 óta több mint 25 fajt tartalmaz, amelyek közül az emberre nézve a legfontosabbak a V. cholerae, a V. parahaemolyticus, a V. alginolyticus, a V. vulnificus és a V. fluvialis.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

A Vibrio nemzetség főbb jellemzői

Rövid, spóra- és tokképző, görbe vagy egyenes Gram-negatív pálcák, 0,5 µm átmérőjűek és 1,5-3,0 µm hosszúak, mozgékonyak (a V. cholerae monotrichoid, egyes fajok két vagy több poláris ostorukkal rendelkeznek); jól és gyorsan nőnek normál táptalajon, kemoorganotrófok, és szénhidrátokat erjesztenek gáz nélkül savat termelve (a glükóz az Embden-Meyerhof útvonalon fermentálódik). Oxidáz-pozitívak, indolt képeznek, nitrátokat nitritekké redukálnak (a V. cholerae pozitív nitrozoindol reakciót ad), lebontják a zselatint, gyakran pozitív Voges-Proskauer reakciót adnak (azaz acetilmetilkarbinolt képeznek), nincs ureázuk, nem képeznek H2S-t, lizin- és ornitin-dekarboxilázzal rendelkeznek, de nincs arginin-dihidrolázzuk. A Vibrio nemzetség jellemző vonása, hogy a legtöbb baktériumtörzs érzékenysége a 0/129-es gyógyszerre (2,4-diamino-6,7-diazopropilpteridin) vonatkozik, míg a Pseudomonadaceae és az Enterobacteriaceae családok képviselői rezisztensek erre a gyógyszerre. A Vibrio-k aerobok és fakultatív anaerobok, a növekedésükhöz optimális hőmérséklet 18-37 °C, pH 8,6-9,0 (pH tartományban nőnek 6,0-9,6 között), egyes fajok (halofilek) NaCl hiányában nem szaporodnak. A DNS G+C-tartalma 40-50 mol% (a V. cholerae esetében körülbelül 47 mol%). Biokémiai vizsgálatokat alkalmaznak a Vibrionaceae családon belüli megkülönböztetésre a morfológiailag hasonló Aeromonas és Plesiomonas nemzetségektől, valamint az Enterobacteriaceae családtól való elkülönítésre.

A koleravibrio abban különbözik a Pseudomonadaceae családtól, hogy csak az Embden-Meyerhof útvonalon keresztül fermentál glükózt (O2 részvétele nélkül), míg az előbbiek csak O2 jelenlétében fogyasztanak glükózt. Ez a különbség könnyen kimutatható a Hugh-Leifson táptalajon. A táptalaj táptalajt, glükózt és indikátort tartalmaz. A vetést két oszlopban végzik a Hugh-Leifson táptalajon, amelyek közül az egyiket vazelinnel töltik meg (anaerob körülmények létrehozása érdekében). A koleravibrio növekedése esetén a táptalaj színe mindkét kémcsőben megváltozik, a pszeudomonadok növekedése esetén - csak a vazelin nélküli kémcsőben (aerob növekedési körülmények).

A koleravibrio nagyon igénytelen a táptalajokkal szemben. Jól és gyorsan szaporodik 1%-os lúgos (pH 8,6-9,0), 0,5-1,0% NaCl-t tartalmazó peptonvízben (PV), meghaladva más baktériumok növekedését. A Proteus növekedésének elnyomása érdekében kálium-tellurit hozzáadása ajánlott (1:100 000 végső hígításban) 1% PV-hez. Az 1%-os PV a legjobb dúsítóközeg a koleravibrio számára. Növekedés közben 6-8 óra elteltével egy finom, laza, szürkés filmet képez a PV felületén, amely rázásra könnyen elbomlik, és pelyhek formájában az aljára hullik, a PV mérsékelten zavarossá válik. A koleravibrio izolálására különféle szelektív táptalajokat javasoltak: lúgos agar, epe-só agar, lúgos albuminát, véres lúgos agar, laktóz-szacharóz és egyéb táptalajok. A legjobb a TCBS (tioszulfát-citrát-brómtimol-szacharóz agar) táptalaj és annak módosításai. Azonban leggyakrabban lúgos MPA-t használnak, amelyen a kolera vibrio sima, üvegszerűen átlátszó, kékes árnyalatú, korong alakú, viszkózus állagú telepeket képez.

Zselatin oszlopba injektálva a vibrio 2 nap után 22-23 C hőmérsékleten buborék formájában, majd tölcsérszerűen, végül rétegenként folyékony halmazállapotúvá válik a felületről.

A tejben a vibrio gyorsan szaporodik, 24-48 óra elteltével koagulációt okoz, majd a tej peptonizálódik, és 3-4 nap múlva a vibrio elpusztul a tej pH-értékének savas oldalra való eltolódása miatt.

B. Heiberg a mannóz, szacharóz és arabinóz erjesztésére való képességük alapján az összes vibriót (kolerát és koleraszerűeket) több csoportra osztotta, amelyek száma ma már 8.

A Vibrio cholerae a Heiberg-kór első csoportjába tartozik.

A kolera vibrióhoz morfológiai, kulturális és biokémiai jellemzőikben hasonló vibriókat másképp nevezték és nevezik: paracholera, koleraszerű, NAG-vibriók (nem agglutináló vibriók); az O1 csoportba nem tartozó vibriók. Az utolsó név hangsúlyozza a legpontosabban a kolera vibrióval való rokonságukat. Ahogy A. Gardner és K. Venkat-Raman megállapította, a kolera és a koleraszerű vibrióknak közös H-antigénjük van, de O-antigénjükben különböznek. Az O-antigén szerint a kolera és a koleraszerű vibriók jelenleg 139 O-szerocsoportra oszlanak, de számuk folyamatosan bővül. A kolera vibrió az O1 csoportba tartozik. Van egy közös A-antigénje és két típusspecifikus antigénje - B és C -, amelyek alapján a V. cholerae három szerotípusát különböztetik meg: az Ogawa szerotípust (AB), az Inaba szerotípust (AC) és a Hikoshima szerotípust (ABC). A disszociációs stádiumban lévő kolera vibrio OR-antigénnel rendelkezik. E tekintetben az O-szérumot, az OR-szérumot, valamint az Inaba és Ogawa típusspecifikus szérumokat használják a V. cholerae azonosítására.

1992-1993-ban nagy kolerajárvány tört ki Bangladesben, Indiában, Kínában, Malajziában és más országokban, melynek kórokozója a Vibrio cholerae faj egy új, korábban ismeretlen szerovarja volt. Antigén tulajdonságaiban különbözik a V. cholerae O1-től: rendelkezik a 0139 antigénnel és egy poliszacharid kapszulával, és semmilyen más O-szérum nem agglutinálja. Minden egyéb morfológiai és biológiai tulajdonsága, beleértve a kolera kiváltására való képességét, azaz az exotoxin-kolerogén szintézisét, hasonlónak bizonyult a V. cholerae O1 tulajdonságaihoz. Következésképpen a kolera új kórokozója, a V. cholerae 0139, látszólag egy olyan mutáció eredményeként jött létre, amely megváltoztatta az O-antigént. V. cholerae 0139 bengálinak nevezték el.

Az úgynevezett koleraszerű vibriók V. cholerae-hoz való viszonyának kérdése régóta tisztázatlan. Azonban a V. cholerae és a koleraszerű (NAG-vibriók) több mint 70 jellemző szerinti összehasonlítása 90%-os hasonlóságot mutatott, a V. cholerae és a vizsgált NAG-vibriók DNS-homológiájának mértéke pedig 70-100%. Ezért a koleraszerű vibriókat egy fajba egyesítik a kolera vibrióval, amelytől főként O-antigénjeikben különböznek, amivel összefüggésben nem-01-csoportú vibrióknak - V. cholerae non-01 - nevezik őket.

A V. cholerae faj 4 biotípusra oszlik: V. cholerae, V. eltor, V. proteus és V. albensis. Az El Tor vibrio természetéről évek óta viták folynak. Ezt a vibriót 1906-ban izolálta F. Gottschlich az El Tor karanténállomáson egy vérhasban elhunyt zarándok testéből. F. Gottschlich több ilyen törzset is izolált. Ezek minden tulajdonságukban nem különböztek a kolera vibriotól, és a kolera O-szérum agglutinálta őket. Mivel azonban abban az időben a zarándokok között nem volt kolera, és a kolera vibrio hosszú távú hordozását valószínűtlennek tartották, a V. eltor kolerában betöltött lehetséges etiológiai szerepének kérdése sokáig vitatott maradt. Ezenkívül az El Tor vibrio, ellentétben a V. cholerae-val, hemolitikus hatással rendelkezett. 1937-ben azonban ez a vibrio nagyszabású és súlyos kolerajárványt okozott Sulawesi szigetén (Indonézia), több mint 60%-os halálozási aránnyal. Végül 1961-ben a 7. világjárvány okozójává vált, és 1962-ben végleg megoldódott a kolera jellegének kérdése. A V. cholerae és a V. eltor közötti különbségek csak néhány jellemzőt érintenek. Minden más tulajdonságban a V. eltor nem különbözik alapvetően a V. cholerae-tól. Ezenkívül ma már megállapították, hogy a V. proteus biotípus (V.finklerpriori) a vibriók teljes csoportját magában foglalja, kivéve a 01-es csoportot (és most 0139-et), amelyet korábban NAG vibrióknak neveztek. A V. albensis biotípust az Elba folyóból izolálták, és képes foszforeszkálni, de miután elvesztette ezt a képességét, nem különbözik a V. proteustól. Ezen adatok alapján a Vibrio cholerae faj jelenleg 4 biotípusra oszlik: V. cholerae 01 cholerae, V. cholerae eltor, V. cholerae 0139 bengal és V. cholerae non 01. Az első három a 01 és 0139 szerotípushoz tartozik. Az utolsó biotípus magában foglalja a korábbi V. proteus és V. albensis biotípusokat, és számos más vibrió szerotípus képviseli, amelyeket nem agglutinálnak a 01 és 0139 szérumokkal, azaz NAG vibriók.

A kolera vibrio patogenitási tényezői

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

A Vibrio cholerae kemotaxisa

Ezen tulajdonságok segítségével a vibrio kölcsönhatásba lép a hámsejtekkel. A kolera vibrio mutánsokban (amelyek elvesztették a kemotaxis képességét) a virulencia jelentősen csökken, a Mob mutánsokban (amelyek elvesztették a mobilitást) pedig teljesen eltűnik, vagy hirtelen csökken.

Adhéziós és kolonizációs faktorok, amelyek révén a vibrio a mikrobolyhokhoz tapad és kolonizálja a vékonybél nyálkahártyáját. Az adhéziós faktorok közé tartozik a mucináz, az oldható hemagglutinin/proteáz, a neuraminidáz stb. Ezek elősegítik a tapadást és a kolonizációt azáltal, hogy lebontják a nyálka részét képező anyagokat. Az oldható hemagglutinin/proteáz elősegíti a vibriók leválását a hámsejtek receptorairól és a bélből a külső környezetbe való kijutását, biztosítva járványszerű terjedésüket. A neuraminidáz erősíti a kolerázó és a hámsejtek közötti kötődést, és elősegíti a toxin behatolását a sejtekbe, ami fokozza a hasmenés súlyosságát.

A koleratoxin egy koleragén.

Az úgynevezett új toxinok képesek hasmenést okozni, de nincs genetikai vagy immunológiai kapcsolatuk a koleragénnel.

Dermoneurotikus és vérzéses faktorok. Ezen toxikus faktorok természetét és szerepüket a kolera patogenezisében még nem vizsgálták kellőképpen.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ]

A Vibrio cholerae endotoxinjai

A V. cholerae lipopoliszacharidjai erős endotoxikus tulajdonsággal rendelkeznek, és a szervezet általános mérgezését okozzák.

A kolera vibrio felsorolt patogenitási faktorai közül a fő az exotoxin koleragén (CTX AB), amely meghatározza a betegség patogenezisét. A kolera molekula két fragmensből áll - A és B. Az A fragmens két peptidből - A1 és A2 - áll, a koleratoxin specifikus tulajdonságával rendelkezik, és szuperantigén tulajdonságokat kölcsönöz neki. A B fragmens 5 azonos alegységből áll. Két funkciót lát el: 1) felismeri az enterocita receptorát (monosialogangliozidot) és kötődik hozzá; 2) intramembrán hidrofób csatornát képez az A alegység áthaladásához. Az A2 peptid az A és B fragmensek megkötésére szolgál. A tényleges toxikus funkciót az Aj peptid (ADP-riboziltranszferáz) látja el. Kölcsönhatásba lép a NAD-dal, hidrolízisét okozva; A keletkező ADP-ribóz az adenilát-cikláz szabályozó alegységéhez kötődik. Ez a GTP hidrolízisének gátlásához vezet. A keletkező GTP + adenilát-cikláz komplex ATP hidrolízist okoz cAMP képződésével. (A cAMP felhalmozódásának egy másik útja a cAMP-t 5-AMP-vé hidrolizáló enzim koleragén általi elnyomása.) Az exotoxin szintézisét kódoló ctxAB gén funkciójának megnyilvánulása számos más patogenitási gén működésétől függ, különösen a tcp génektől (a toxin által szabályozott adhéziós pillusok - TCAP - szintézisét kódolják), a toxR, toxS és toxT szabályozó génektől, a hap (oldható hemagglutinin/proteáz) és a neuraminidáz (neuraminidáz) génektől. Ezért a V. cholerae patogenitásának genetikai szabályozása összetett.

Kiderült, hogy a V. cholerae kromoszómájában két patogenitási sziget található. Az egyik a fonalas, mérsékelten konvertáló CTXφ fág genomja, a másik pedig a szintén fonalas, mérsékelten konvertáló VPIcp fág genomja. Ezen patogenitási szigetek mindegyike a profázisban meghatározott géneket tartalmazó kazettákat tartalmazza, amelyek meghatározzák a kolera kórokozó patogenitását. A CTXφ profág hordozza a CTX géneket, az új toxinok, a zot és az ace génjeit, a ser gént (adhezin szintézis) és az ortU gént (ismeretlen funkciójú termék szintézise). Ez a kazetta tartalmazza a nei gént és az RS2 fág régiót is, amely a profág replikációját és kromoszómákba való integrációját kódolja. A zot, ace és ortU gének szükségesek a fágvirionok kialakulásához, amikor a profág kizáródik a kórokozó kromoszómájából.

A VPIcp profág hordozza a tcp géneket (amelyek a piliusok (TCPA fehérje) termelését kódolják), a toxT, toxR, act géneket (további kolonizációs faktor, mobilitási gének (integrázok és transzpozázok)). A virulencia gének transzkripcióját három szabályozó gén szabályozza: a toxR, toxS és toxT. Ezek a gének koordináltan, transzkripciós szinten megváltoztatják több mint 20 virulencia gén aktivitását, beleértve a ctxAB, tcp és más géneket. A fő szabályozó gén a toxR gén. Sérülése vagy hiánya avirulenciához, vagy a koleratoxin CTX és TCPA termelésének több mint 100-szoros csökkenéséhez vezet. Valószínűleg így szabályozódik a virulencia gének koordinált expressziója a mérsékelt konvertáló fágok által alkotott patogenitási szigeteken és más baktériumfajokban. Megállapították, hogy egy másik K139 profág is jelen van a V. cholerae eltor kromoszómájában, de genomját kevéssé tanulmányozták.

A hap gén a kromoszómán lokalizálódik. Így a V. cholerae virulenciáját (patogenitását) és járványképző képességét 4 gén határozza meg: a ctxAB, a tcp, a toxR és a hap.

Különböző módszerek alkalmazhatók a V. cholerae koleragén termelésére való képességének kimutatására.

Biológiai teszt nyulakon. Amikor kolera vibriókat intramuszkulárisan injektálnak szopós nyulaknak (legfeljebb 2 hetes korban), tipikus kolera szindróma alakul ki: hasmenés, kiszáradás és a nyúl pusztulása.

A koleragén közvetlen kimutatása PCR-rel, IFM-mel vagy passzív immun hemolízis reakcióval (a kolerogén az eritrociták Gmj-jéhez kötődik, és antitoxikus antitestek és komplement hozzáadására lizálnak). Azonban a toxintermelő képesség önmagában történő kimutatása nem elegendő az ilyen törzsek járványveszélyének meghatározásához. Ehhez a hap gén jelenlétének kimutatása szükséges, ezért a 01 és 0139 szerocsoportú kolera vibriók toxigén és járványos törzseinek megkülönböztetésének legjobb és legmegbízhatóbb módja a PCR, specifikus primereket használva mind a 4 patogenitási gén kimutatására: ctxAB, tcp, toxR és hap.

A 01-es vagy 0139-es szerocsoportoktól eltérő V. cholerae sporadikus vagy clusteres hasmenéses betegségek kiváltására való képessége emberekben vagy az LT vagy ST típusú enterotoxinok jelenlétének tudható be, amelyek stimulálják az adenilát-, illetve guanilát-cikláz rendszert, vagy annak, hogy csak a ctxAB gének vannak jelen, de a hap gén nem.

A hetedik világjárvány során különböző virulenciafokú V. cholerae törzseket izoláltak: kolerogén (virulens), gyengén kolerogén (alacsony virulenciájú) és nem kolerogén (nem virulens). A nem kolerogén V. cholerae általában hemolitikus aktivitást mutat, nem lizálják őket a kolera diagnosztikai HDF(5) fág, és nem okoznak emberi megbetegedést.

A V. cholerae 01 (beleértve az El Tort is) fágtipizálásához S. Mukherjee fágkészleteket javasolt, amelyeket később Oroszországban más fágokkal egészítettek ki. Az ilyen fágok (1-7) készlete lehetővé teszi a fágtípusok megkülönböztetését a V. cholerae 0116 között. A toxingén és nem toxingén V. cholerae El Tor azonosítására a HDF-3, HDF-4 és HDF-5 fágok helyett a CTX* (toxingén El Tor vibriók lizálása) és a CTX" (nem toxingén El Tor vibriók lizálása) fágokat javasolják Oroszországban.

[ 19 ], [ 20 ], [ 21 ]

Kolera kórokozók rezisztenciája

A koleravibriók alacsony hőmérsékleten is jól életben maradnak; jégben akár 1 hónapig is életképesek maradnak; tengervízben - akár 47 napig, folyóvízben - 3-5 naptól több hétig, forralt ásványvízben több mint 1 évig, talajban - 8 naptól 3 hónapig, friss ürülékben - akár 3 napig, főtt termékeken (rizs, tészta, hús, zabkása stb.) 2-5 napig, nyers zöldségeken - 2-4 napig, gyümölcsökön - 1-2 napig, tejben és tejtermékekben - 5 napig élnek túl; hidegen tárolva a túlélési idő 1-3 nappal nő; ürülékkel szennyezett lenvászonon akár 2 napig, nedves anyagon pedig egy hétig élnek túl. A koleravibriók 80 °C hőmérsékleten 5 percen belül, 100 °C-on pedig azonnal elpusztulnak; nagyon érzékenyek a savakra; klóramin és más fertőtlenítőszerek hatására 5-15 percen belül elpusztulnak. Érzékenyek a szárításra és a közvetlen napfényre, de jól és sokáig életben maradnak, sőt szaporodnak nyílt víztestekben és szerves anyagokban gazdag szennyvízben, lúgos pH-érték mellett, 10-12 °C feletti hőmérsékleten. Nagyon érzékenyek a klórra: 0,3-0,4 mg/l vízben 30 perc alatt bevitt aktív klór megbízható fertőtlenítést biztosít a kolera vibriók ellen.

Emberre patogén vibriók, amelyek nem tartoznak a Vibrio Cholerae fajhoz

A Vibrio nemzetség több mint 25 fajt foglal magában, amelyek közül a V. cholerae mellett legalább nyolc képes megbetegedést okozni emberben: V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus, V. fluvialis, V. fumissii, V. mimicus, V. damsela és V. hollisae. Mindezek a vibriók tengerekben és öblökben élnek. A fertőzés úszás vagy tenger gyümölcseinek fogyasztása útján történik. Megállapították, hogy a kolera és a nem kolera vibriók nemcsak gyomor-bélhurutot, hanem sebfertőzéseket is okozhatnak. Ezt a képességet a V. cholerae 01 és nem 01 csoportokban, a V. parahaemolyticusban, V. alginolyticusban, V. mimicusban, V. damselaban és V. vulnificusban találták meg. Gyulladásos folyamatokat okoznak a lágy szövetekben, ha azokat tengeri állatok páncélja károsítja, vagy ha közvetlenül érintkeznek fertőzött tengervízzel.

A felsorolt patogén, nem kolerás vibriók közül a gyakorlatban legérdekesebbek a V. parahaemolyticus, a V. alginolyticus, a V. vulnificus és a V. fluvialis.

A V. parahaemolyticust - egy parahaemolitikus vibriót - először 1950-ben izolálták Japánban egy nagyszabású ételmérgezés-járvány során, amelyet félszárított szardínia fogyasztása okozott (a halálozási arány 7,5%). A kórokozót R. Sakazaki a Vibrio nemzetségbe tartozta 1963-ban. A vizsgált törzseket két fajra osztotta: V. parahaemolyticus és V. alginolyticus. Mindkét faj a part menti tengervízben található, és lakóiban halofilek (görögül halsz - só); a közönséges vibriókkal ellentétben a halofilek nem szaporodnak NaCl nélküli táptalajon, és jól szaporodnak magas NaCl-koncentrációban. A halofil vibriók faji hovatartozását a szacharóz fermentálására, acetilmetilkarbinol képzésére és 10% NaCl-t tartalmazó PV-ben való szaporodásukra való képességük határozza meg. Mindezek a tulajdonságok a V. alginolyticus fajra jellemzőek, de a V. parahaemolyticusban hiányoznak.

A parahaemolitikus vibrio háromféle antigénnel rendelkezik: hőérzékeny ostor H-antigének, hőstabil O-antigének, amelyeket 120 °C-on 2 órán át történő melegítés nem bomlik el, és felszíni K-antigének, amelyeket melegítéssel elbomlanak. A frissen izolált V. parahaemolyticus tenyészetek jól definiált K-antigénekkel rendelkeznek, amelyek megvédik az élő vibriókat a homológ O-szérumokkal való agglutinációtól. A H-antigének minden törzs esetében azonosak, de a monotrichus H-antigénjei különböznek a peritrichusok H-antigénjeitől. Az O-antigén alapján a V. parahaemolyticus 14 szerocsoportra oszlik. A szerocsoportokon belül a vibriók a K-antigének szerint szerotípusokra oszlanak, amelyek száma összesen 61. A V. parahaemolyticus antigén sémáját kizárólag emberből izolált törzsekre fejlesztették ki.

A V. parahaemolyticus patogenitása a hemolizin szintézisének képességével függ össze, amely enterotoxikus tulajdonságokkal rendelkezik. Ez utóbbit a Kanagawa-módszerrel mutatják ki. Lényege abban rejlik, hogy az emberre patogén V. parahaemolyticus 7% NaCl-t tartalmazó véres agaron tiszta hemolízist okoz. 5% NaCl-nál kevesebbet tartalmazó véres agaron a V. parahaemolyticus számos törzse okoz hemolízist, 7% NaCl-t tartalmazó véres agaron pedig csak az enteropatogén tulajdonságokkal rendelkező törzsek. A parahaemolitikus vibrio a Japán, a Kaszpi-tenger, a Fekete és más tengerek partjain található. Élelmiszer eredetű mérgező fertőzéseket és vérhas-szerű betegségeket okoz. A fertőzés nyers vagy félig nyers, V-parahaemolyticus-szal fertőzött tengeri ételek (tengeri halak, osztrigák, rákfélék stb.) fogyasztásakor következik be.

A fent említett nyolc nem kolerás vibrió közül az emberre nézve a legkórokozóbb a V. vulnificus, amelyet először 1976-ban írtak le Beneckea vulnificus néven, majd 1980-ban Vibrio vulnificusként osztályoztak át. Gyakran megtalálható a tengervízben és annak lakóiban, és különféle emberi betegségeket okoz. A tengeri és klinikai eredetű V. vulnificus törzsek sem fenotípusosan, sem genetikailag nem különböznek egymástól.

A V. vulnificus okozta sebfertőzések gyorsan progrediálnak, és daganatok kialakulásához vezetnek, majd szöveti nekrózishoz, amit láz, hidegrázás, néha súlyos fájdalom kísér, és egyes esetekben amputációt igényel.

A V. vulnificusról kimutatták, hogy exotoxint termel. Állatkísérletek kimutatták, hogy a kórokozó súlyos helyi károsodást okoz, ödéma és szövetelhalás kialakulásával, majd halállal. Az exotoxin szerepét a betegség patogenezisében vizsgálják.

A sebfertőzések mellett a V. vulnificus tüdőgyulladást okozhat fulladásos áldozatoknál, valamint endometritist nőknél tengervízzel való érintkezés után. A V. vulnificus által okozott fertőzés legsúlyosabb formája a nyers osztriga (és esetleg más tengeri állatok) fogyasztásával összefüggő primer vérmérgezés. Ez a betegség nagyon gyorsan fejlődik: a betegnél rossz közérzet, láz, hidegrázás és kimerültség, majd súlyos hipotenzió alakul ki, ami a halál fő oka (a halálozási arány körülbelül 50%).

A V. fluvialist először 1981-ben írták le gasztroenteritisz kórokozóként. A nem kolerát okozó vibriók alcsoportjába tartozik, amelyek arginin-dihidrolázzal rendelkeznek, de netornitin- és lizin-dekarboxilázzal nem rendelkeznek (V. fluvialis, V. furnissii, V. damsela, azaz fenotípusosan hasonlóak az Aeromonashoz). A V. fluvialis a gasztroenteritisz gyakori kórokozója, amelyet súlyos hányás, hasmenés, hasi fájdalom, láz és súlyos vagy közepes kiszáradás kísér. A fő kórokozó az enterotoxin.

A kolera epidemiológiája

A fertőzés fő forrása kizárólag egy személy - kolerás beteg vagy vibrio-hordozó, valamint az ezekkel szennyezett víz. A természetben egyetlen állat sem kapja el a kolerát. A fertőzés útja fecaorális. A fertőzés útjai: a) fő - ivóvíz, fürdés és háztartási szükségletek kielégítésére használt víz; b) kontakt-háztartási és c) élelmiszer útján. A kolera összes nagyobb járványa és világjárványa a vízzel volt összefüggésben. A kolera vibrioi olyan adaptív mechanizmusokkal rendelkeznek, amelyek biztosítják populációik fennmaradását mind az emberi szervezetben, mind a nyílt víztestek bizonyos ökoszisztémáiban. A kolera vibrioi által okozott súlyos hasmenés a belek megtisztulásához vezet a versengő baktériumoktól, és hozzájárul a kórokozó széles körű elterjedéséhez a környezetben, elsősorban a szennyvízben és a nyílt víztestekben, ahová lerakják őket. Egy kolerás személy hatalmas mennyiségben választja ki a kórokozót - 100 milliótól 1 milliárdig terjedő mennyiséget 1 ml székletben, egy vibriohordozó 100-100 000 vibrio-t választ ki 1 ml-enként, a fertőző dózis körülbelül 1 millió vibrio. A kolera vibrio kiválasztásának időtartama egészséges hordozóknál 7-42 nap, a gyógyultaknál pedig 7-10 nap. A hosszabb kiválasztás rendkívül ritka.

A kolera sajátossága, hogy utána általában nincs hosszú távú hordozás, és nem alakulnak ki stabil endémiás gócok. Azonban, amint azt fentebb már említettük, a nyílt víztestek nagy mennyiségű szerves anyagot, mosószert és étkezési sót tartalmazó szennyvízzel történő szennyezése miatt nyáron a kolera vibrio nemcsak hosszú ideig fennmarad bennük, hanem szaporodik is.

Nagy epidemiológiai jelentőséggel bír, hogy a 01-es csoportba tartozó kolera vibriók, mind a nem toxinok, mind a toxinok, hosszú ideig fennmaradhatnak különböző vízi ökoszisztémákban termesztetlen formákként. A polimeráz láncreakció segítségével a V. chokrae termesztetlen formáinak vct génjeit negatív bakteriológiai vizsgálatok során kimutatták a FÁK számos endemikus területének különböző víztesteiben.

Az El Tor kolera vibrio endemikus gócpontja Indonézia, a hetedik világjárvány eme bűnösének onnan való megjelenése feltehetően összefügg Indonézia gazdasági kapcsolatainak bővülésével a külvilággal a függetlenség elnyerése után, a világjárvány, különösen a második hullámának időtartamát és villámgyors fejlődését pedig döntően befolyásolta a kolerával szembeni immunitás hiánya, valamint az ázsiai, afrikai és amerikai országokban zajló különféle társadalmi felfordulások.

Kolera esetén számos járványellenes intézkedést tesznek, amelyek közül a vezető és döntő az akut és atipikus formájú betegek, valamint az egészséges vibrio-hordozók aktív, időben történő felismerése és elkülönítése (kórházi kezelés, kezelés); intézkedéseket tesznek a fertőzés lehetséges útjainak megelőzésére; különös figyelmet fordítanak a vízellátásra (ivóvíz klórozása), az egészségügyi és higiéniai feltételek betartására az élelmiszeripari vállalkozásokban, a gyermekintézményekben, a nyilvános helyeken; szigorú ellenőrzést végeznek, beleértve a bakteriológiai ellenőrzést is, a nyílt víztestek felett, a lakosság immunizálását stb. végzik.

[ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ]

A kolera tünetei

A kolera lappangási ideje több órától 6 napig változik, leggyakrabban 2-3 nap. A vékonybél lumenébe jutva a kolera vibriók a mozgékonyságuk és a nyálkahártyához való kemotaxisuk miatt a nyálkához jutnak. Ahhoz, hogy átjuthassanak rajta, a vibriók számos enzimet termelnek: neuraminidázt, mucinázt, proteázokat, lecitinázt, amelyek lebontják a nyálkában található anyagokat, és elősegítik a vibriók mozgását a hámsejtekbe. A vibriók adhézió útján a hám glikokalixához tapadnak, és elveszítve mozgékonyságukat, intenzíven szaporodni kezdenek, kolonizálva a vékonybél mikrobolyhait (lásd a színes betétet, 101.2. ábra), és egyidejűleg nagy mennyiségű exotoxin-kolerogént termelnek. A koleragén molekulák a monoszialogangliozid Gni-hez kötődnek! És behatolnak a sejtmembránba, ahol aktiválják az adenilát-cikláz rendszert, és a felhalmozódó cAMP folyadék, kationok és anionok (Na, HCO3, Kl, Cl2) hiperszekrécióját okozza az enterocitákból, ami kolerás hasmenéshez, kiszáradáshoz és a szervezet sótalanításához vezet. A betegségnek három típusa van:

• heves, súlyos, kiszáradással járó hasmenéses betegség, amely néhány órán belül a beteg halálát okozza;
• enyhébb lefolyás, vagy hasmenés kiszáradás nélkül;
• a betegség tünetmentes lefolyása (vibriók hordozása).

Súlyos koleraesetekben a betegek hasmenést tapasztalnak, a székletürítés gyakorisága megnő, a széklet bőségesebbé válik, hígabbá válik, elveszíti székletszagát, és rizslevesre hasonlít (zavaros folyadék, amelyben nyálkamaradványok és hámsejtek úsznak). Ezután legyengítő hányás következik be, először a béltartalomból, majd a hányás rizsleves megjelenését ölti. A beteg hőmérséklete a normális alá esik, a bőr kékessé, ráncossá és hideggé válik - kolera algid. A kiszáradás következtében a vér besűrűsödik, cianózis alakul ki, oxigénhiány alakul ki, a veseműködés jelentősen romlik, görcsök jelentkeznek, a beteg elveszíti az eszméletét, és halál következik be. A kolera okozta halálozási arány a hetedik világjárvány idején a fejlett országokban 1,5%-tól a fejlődő országokban 50%-ig terjedt.

A fertőzés utáni immunitás erős, tartós, és a visszatérő betegségek ritkák. Az immunitás antitoxikus és antimikrobiális, antitestek (az antitoxinok tovább perzisztálnak, mint az antimikrobiális antitestek), immunmemória sejtek és fagociták okozzák.

A kolera laboratóriumi diagnosztikája

A kolera diagnosztizálásának fő és döntő módszere bakteriológiai. A betegtől vizsgálandó anyag a széklet és a hányás; a székletet vibriók hordozására vizsgálják; a kolerában elhunyt személyektől a vékonybél és az epehólyag lekötött szakaszát veszik vizsgálatra; a külső környezet tárgyai közül leggyakrabban nyílt víztározókból származó vizet és szennyvizet vizsgálnak.

Bakteriológiai vizsgálat elvégzése során a következő három feltételnek kell teljesülnie:

• a lehető leggyorsabban vegye ki a betegtől az anyagot (a kolera vibrio rövid ideig életben marad a székletben);
• a tartályt, amelyben az anyagot bevitték, nem szabad vegyszerekkel fertőtleníteni, és nem tartalmazhat nyomokat, mivel a kolera vibrio nagyon érzékeny rájuk;
• kizárja mások szennyeződésének és megfertőződésének lehetőségét.

A tenyészetet a következő séma szerint izoláljuk: PV-re vetés, egyidejűleg lúgos MPA-ra vagy bármilyen szelektív táptalajon (a TCBS a legjobb). 6 óra elteltével megvizsgáljuk a PV-n képződött filmet, és szükség esetén átvisszük egy második PV-re (a kolera vibrio vetési sebessége ebben az esetben 10%-kal nő). A PV-ről lúgos MPA-ra visszük át. A gyanús telepeket (üvegszerű-átlátszó) átvisszük a tiszta tenyészet előállításához, amelyet morfológiai, tenyésztési, biokémiai tulajdonságok, motilitás alapján azonosítunk, és végül diagnosztikai agglutináló szérumokkal (O-, OR-, Inaba és Ogawa) és fágokkal (HDF) tipizálunk. A gyorsított diagnosztikára különféle lehetőségeket javasoltak, amelyek közül a legjobb a lumineszcens-szerológiai módszer. Lehetővé teszi a kolera vibrio közvetlen kimutatását a vizsgálati anyagban (vagy két kémcsőben 1% PV-vel végzett előzetes tenyésztés után, amelyek közül az egyikhez kolera fágot adunk) 1,5-2 órán belül. A kolera vibrio gyorsított kimutatására a Nyizsnyij Novgorodi IEM 13 biokémiai tesztből (oxidáz, indol, ureáz, laktóz, glükóz, szacharóz, mannóz, arabinóz, mannit, inozitol, arginin, ornitin, lizin) álló papír indikátorkorong-készletet javasolt, amelyek lehetővé teszik a Vibrio nemzetség képviselőinek megkülönböztetését az Aeromonas, Plesiomonas, Pseudomonas, Comamonas nemzetségektől és az Enterobacteriaceae családtól. A kolera vibrio gyors kimutatására székletben és környezeti tárgyakban antitest diagnosztikummal RPGA alkalmazható. A kolera vibrio nem tenyésztett formáinak környezeti tárgyakban történő kimutatására csak a polimeráz láncreakciós módszert alkalmazzák.

Azokban az esetekben, amikor nem Ol-csoportú V. cholerae-t izolálnak, azokat a többi szerocsoport megfelelő agglutináló szérumával kell tipizálni. A nem Ol-csoportú V. cholerae izolálása hasmenéses (beleértve a koleraszerű hasmenést is) betegből ugyanazon járványellenes intézkedések megtételét igényli, mint az Ol-csoportú V. cholerae izolálása esetén. Szükség esetén PCR segítségével meghatározzák a ctxAB, tcp, toxR és hap patogenitási gének jelenlétét az ilyen vibriókban.

A kolera szerológiai diagnosztikája kiegészítő jellegű. Erre a célra agglutinációs reakció alkalmazható, de jobb a vibriocid antitestek vagy antitoxinok titerének meghatározása (a kolera elleni antitesteket enzim immunvizsgálattal vagy immunfluoreszcens módszerekkel határozzák meg).

Nem kolerakórokozó vibriók laboratóriumi diagnosztikája

A nem kolerát kórokozó vibriók okozta betegségek diagnosztizálásának fő módszere a bakteriológiai, szelektív táptalajok, például TCBS, MacConkey stb. alkalmazásával. Az izolált tenyészet Vibrio nemzetségbe tartozását az e nemzetségbe tartozó baktériumok főbb jellemzői alapján határozzák meg.

A kolera kezelése

A kolerás betegek kezelésének elsősorban a rehidratációból és a normális víz-só anyagcsere helyreállításából kell állnia. Erre a célra sóoldatok használata ajánlott, például a következő összetételűek: NaCl - 3,5; NaHC03 - 2,5; KCl - 1,5 és glükóz - 20,0 g literenként. Az ilyen, patogenetikailag megalapozott kezelés racionális antibiotikum-terápiával kombinálva lehetővé teszi a kolera halálozási arányának 1%-ra vagy az alá csökkentését.

A kolera specifikus megelőzése

A mesterséges immunitás kialakításához koleravakcinát javasoltak, beleértve az elölt Inaba és Ogawa törzsekből készültet; egy szubkután alkalmazásra szánt koleratoxoidot és egy enterális kémiai bivalens vakcinát, amely az Inaba és Ogawa szerotípusok anatoxinjából és szomatikus antigénjeiből áll, mivel keresztimmunitás nem alakul ki. Az oltás utáni immunitás időtartama azonban nem haladja meg a 6-8 hónapot, ezért az oltásokat csak epidemiológiai indikációk szerint végzik. Az antibiotikum-profilaxis jól bizonyított a koleragócokban, különösen a tetraciklin, amelyre a kolera vibrio nagyon érzékeny. Ugyanerre a célra más, a V. cholerae ellen hatékony antibiotikumok is alkalmazhatók.