A cikk orvosi szakértője
Új kiadványok
Southern blotting
Utolsó ellenőrzés: 05.07.2025
Minden iLive-tartalmat orvosi szempontból felülvizsgáltak vagy tényszerűen ellenőriznek, hogy a lehető legtöbb tényszerű pontosságot biztosítsák.
Szigorú beszerzési iránymutatásunk van, és csak a jó hírű média oldalakhoz, az akadémiai kutatóintézetekhez és, ha lehetséges, orvosilag felülvizsgált tanulmányokhoz kapcsolódik. Ne feledje, hogy a zárójelben ([1], [2] stb.) Szereplő számok ezekre a tanulmányokra kattintható linkek.
Ha úgy érzi, hogy a tartalom bármely pontatlan, elavult vagy más módon megkérdőjelezhető, jelölje ki, és nyomja meg a Ctrl + Enter billentyűt.
A Southern blot (E. Southern és R. Davis fejlesztette ki 1975-ben) a jelenleg használt fő módszer egy adott betegség génjeinek azonosítására. Ehhez a beteg sejtjeiből DNS-t vonnak ki, és egy vagy több restrikciós endonukleázzal kezelik. A kapott fragmenseket elektroforézisnek vetik alá, amely lehetővé teszi méret szerinti elválasztást (a kisebb fragmensek gyorsabban haladnak át a gél pórusain). A fragmenseket ezután nitrocellulóz szűrőre viszik át (újranyomtatják), amelyre egy radioaktívan jelölt próbát rétegeznek. A próba csak a komplementer szekvenciához kötődik. Ezután autoradiográfia segítségével meghatározzák a kívánt genomiális DNS-fragmens pozícióját az elektroferogramon.
A DNS- vagy RNS-készítmények előzetes korlátozás és elektroforézis nélküli, szilárd mátrixra cseppenként felvitt, jelölt DNS-próbával történő hibridizációját pont- vagy réses hibridizációnak nevezzük, a szűrőn lévő DNS-folt konfigurációjától függően (kerek vagy hosszúkás).
[