Immunhisztokémiai markerek a szájnyálkahártya és az ajkak vörös határának rákmegelőző elváltozásainak diagnosztizálásában

A szájnyálkahártya (CRS) és a vörös ajakréteg (CCG) neoplasztikus elváltozásainak időben történő és hatékony diagnosztizálása továbbra is komoly problémát jelent az onkostomatológiában. A szájüreg squamous cell carcinoma a világon a hatodik helyet foglalja el az összes lokáció rosszindulatú daganata között. Az Orosz Föderációban a szájüreg rosszindulatú daganatos megbetegedése az összes malignus daganatok 2-4% -a.

Az elmúlt években a szájnyálkahártya betegségeinek szerkezete jelentős változásokon ment keresztül, különösen a prekancerózisos betegségek arányának növekedésében. E tekintetben a rosszindulatú daganatok tüneteinek hatékony, nem invazív felderítése továbbra is sürgős feladat a fogászat.

Annak ellenére, hogy a látszólagos egyszerűsége klinikai képalkotó előrejelzője változások a szájnyálkahártya és CGC kapcsolat külső lokalizációs, meghatározása nosological megelőző állapottal, amely csak a benyomást szemrevételezéssel és tapintással, gyakran vezet a diagnosztikai hibák már különböző fokú keratinizációs vagy fekély akár markornyh elemek a vereség megnehezíti a megkülönböztetést. Különösen nehéz a korai diagnózis rosszindulatú, hiszen a klinikai tünetek megjelenése egy kicsit később történt valójában rosszindulatú átalakulás.

Így a V.P. Kharchenko et al. Kimutatták, hogy a betegek több mint 2/3-a a gyógykezelés idején az orvosi intézményben és a diagnózis felállításában a betegség III-IV. Stádiumai vannak. A késői kezelés egyik oka a klinikai kép "elmosódása" a betegség kezdeti szakaszában. Ezenkívül bebizonyosodott, hogy szervezeti és módszertani munkát kell végezni, és növelni kell a fogorvosok tudásszintjét a szájnyálkahártya prekancerus betegségeinek korai klinikai megnyilvánulásairól. Az elvégzett vizsgálatok azt mutatták, hogy a fogorvosok mindössze 42,8% -a különbözteti meg a szájüregi rák korai megnyilvánulásait, a válaszadók 4,2% -a megfelelően elvégezheti az elsődleges diagnosztikai intézkedéseket a lokalizáció rák kimutatására.

Az orális nyálkahártya daganatos megbetegedéseinek nemkívánatos formáinak aránya, a különböző szerzők szerint, 58,4-70% -ot ér el. A helyzetet bonyolítja a megelőző klinikai diagnózis megoldatlan kérdése, különösen a malignitás kialakulásának megkülönböztetésének nehézsége, valamint a pre-tumoros betegség kezelésére szolgáló módszer kiválasztásának problémája. A biopsziára nincs abszolút és relatív indikáció, különösen a konzervatív kezelés szakaszában. A mai napig nincs egyetlen olyan példa a szakirodalomban, amely egy olyan klinikai szintű diagnosztikai kritérium, amelyet a fogorvos utalhat egy adott pre-tumoros betegség kezelésére alkalmas módszer kiválasztásakor.

A diagnosztikai nehézségek feloldása, melyet a legtöbb szerző segéd diagnosztikai módszerrel (citológia, kémia-izomtoma, biomikroszkópia, optikai koherencia tomográfia) mutat. Azonban ezek a módszerek meglehetősen szubjektívek, mivel csak az érintett szövetek minőségi változásainak leíró jellegét hordozzák. A morfológiai változások számszerűsítésének egyik módja az immunhisztokémiai markerek meghatározása.

A modern tumorvizsgálat morfológiai módszereinek modern gyakorlatba történő bevezetése jelentősen javította a rosszindulatú daganatok diagnózisának és kezelésének minőségét. Módszertani lehetőségeit a modern molekuláris onkológia kiszélesedő jelenleg immunhisztokémiai vizsgálatok meg nem csak a szövettani diagnózis a daganat, hanem, hogy ez morphofunctional jellemzőit, agresszivitás és a prognózis kapcsolatban rákmegelőző elváltozások és a rák már kialakult.

A modern ötletek szerint a sejtek malignus transzformációjának alapja egy vagy több sejtes onkogének vagy szupresszor gének aktiválása. A humán rákos megbetegedések 30% -ánál megfigyelhető, és sok esetben kimutatható immunhisztokémiai úton. Az oncogéneket ras p21, HER2 / neu, bcl-2 és a p53 és Rb szuppresszor gének különböző daganatokban vizsgálták. A felsorolt onkogének (és a szuppresszor gének) egy része önálló prognosztikai és prediktív jelek.

A szájnyálkahártya epitheliuma a rákos daganatok kialakulásának helye. A külső tényezők (traumás okklúzió oldalak, éles szélei pótlások fizetésképtelen ortopédiai kialakítás, irracionális egyéni szájhigiéne, gyulladásos és destruktív periodontális sérülés) együtt a genetikai (örökletes) tényezők is szerepet játszanak a rákot okoz ennek lokalizáció. A fejlesztés a pikkelysejtes karcinóma, az orális nyálkahártya sérülések is be lehet vonni a mechanizmusok a kontroll folyamatok epiteliális hiperplázia és pikkelysejtes metaplázia.

Morfológiai jellemzők szájnyálkahártya epitélium során rosszindulatú daganat kapcsolatos változást egy sor differenciálódás (fenotípus citokeratin elsősorban epiteliális réteg) markerek CEA expressziós, valamint proliferációs marker Ki - 67.

P53 - tumor-gén - szuppresszor protein termék, amely egy nukleáris transzkripciós faktor számos funkciót, beleértve a blokkoló áthaladását sejtek sejtciklus és apoptózis. A p53 fehérje a test összes sejtében expresszálódik. A genetikai készülék károsodásának hiányában a p53-protein inaktív állapotban van, és amikor DNS-károsodás következik be, a DNS aktiválódik. Aktiválás áll megszerzése a képességét, hogy kötődnek a DNS-hez, és aktiválja a gének transzkripcióját, amelyek tartalmaznak egy szabályozó régió nukleotid-szekvencia, amely a kijelölt p53-válasz elemet. Mutációja p53 sejtekben előforduló mintegy 50% a rákok, vezet a fehérjeszintézist a veszteség a funkcióit, de mivel egy nagy stabilitást és felhalmozódó a sejtmagban, hogy immunhisztokémiai módszerekkel expresszált egy elkülönült a sejtmag megfestésére.

A wt-53 onkosuppresszor gén "vad" típusa és az általa kódolt p53 fehérje központi szerepet játszik az apoptózis kialakulásában. Amikor a DNS sérül, a wt53-gén és a megfelelő fehérje expressziója megtörténik. Utolsó blokkolja a sejtciklus G1-S fázis, és ezáltal gátolják a további replikációját sérült DNS szintetizálódik az S fázisban, és megteremti a lehetőséget az eltávolítása a sérült terület és a javítás a módosított rész. Ha javítás történik, a sejt továbbra is megosztja és átadja az egészséges sejteket. Ha azonban nem történik javítás, akkor más mechanizmusok is szerepelnek, amelyek biztosítják az ilyen sejt megsemmisítését sérült (mutagén) DNS-sel, azaz E. A sejtes halál genetikai programja fejlődik - apoptózis.
Az utóbbi években azt sugallták, hogy a p53-státusz döntő tényező lehet a daganat kemoterápiás és radioterápiás érzékenységének meghatározására. E feltevés megerősítése számos olyan tanulmány, amely igazolja, hogy a mutált p53 rossz prognózis és az adjuváns terápia nem hatékony hatása a szájnyálkahártya különböző daganataitól.

A proliferáció markerei szintén igen informatív diagnosztikai értékek a rosszindulatú daganatok előrehaladásában. A proliferatív aktivitás a sejtek malignus transzformációjának mechanizmusában és a már kialakuló tumorok biológiai viselkedésében is vezető tényező. A proliferatív aktivitás ígéretes markere a Ki-67 antigén, amelyet gyakorlatilag a sejtciklus minden fázisában fejeznek ki, és ennek megfelelően tükrözi a proliferatív pool nagyságát. A Ki-67-et kódoló gén a 10 kromoszóma hosszú karján helyezkedik el. A Ki-67 szabályozó fehérjékre utal. Megjelenése egybeesik a sejt mitózisba való belépésével, ami lehetővé teszi a proliferáció univerzális markerként történő felhasználását a malignus tumorok növekedésének értékelésében.

Számos olyan vizsgálatot végeztek, amely az immunhisztokémiai markerek diagnosztikai értékét tanulmányozza a szájnyálkahártya prekancerózus elváltozásainak és az ajkak vörös határának előrejelzésével. Murti PR et al. Tanulmányozta a p53 expresszióját piros, átalány SSRI-vel. Amikor meghatároztam az immunhisztokémiai módszert, a p53 expressziója nem mutatta ki a szájnyálkahártya precancerének rosszindulatú státuszát. A szerzők azt javasolta, hogy túlzott mértékű expressziója a p53 csúcs idő közel az idő átalakulás rákmegelőző rák, és nem lehet használni, mint egy korai markere malignitás predikciós megelőző állapottal szájnyálkahártyán. Más kutatók azt találták, hogy a TP53 humán gén legalább 9 különböző izoformát kódol. A p63-as p53 család másik tagja 6 különböző izoformát tartalmaz, és kulcsszerepet játszik a szájüreg nyálkahártya, nyálmirigyek, fogak és bőr kialakulásában. Azt javasolták, hogy a p63 kapcsolódik a fej és nyak squamous cell carcinoma kialakulásához. Azonban a p53 és p63 új izoformáinak kifejeződésében az SSRI precancerében nem mutatkoztak statisztikailag szignifikáns változások a nem módosított szövethez képest. A De Sousa FA által végzett vizsgálatok megerősítették a p53 marker prognosztikai jelentőségét a szájnyálkahártya precancerének rosszindulatú transzformációjának potenciáljának meghatározásában. Ugyanakkor egyes szerzők úgy vélik, hogy a p53 nem használható egyetlen markerként a rák kialakulásának előrejelzésére.

Ugyanilyen ígéretes prognosztikai immunhisztokémiai érzékelési síkban van ábrázolva a vizsgált szövetminták podoplanina - integrális membrán muko kifejezve a változatlan és a megváltozott gyulladásos és daganatos endoteliumán nyirokkapillárisok. A kutatók már talált statisztikailag szignifikáns kapcsolatot expressziós podoplanina iABCG2 (ATP-kötő fehérje alcsoport G2) a veszélye a rosszindulatú transzformáció lichen planus (a kockázat jelentősen magasabb volt a koexpressziója podoplanina és ABCG2, mint anélkül koexpressziója podoplanina és ABCG2), és arra a következtetésre jutott, hogy a podoplanin és ABCG2 lehet használni biomarkerek értékelésére a veszélye a rosszindulatú transzformáció prekancerózus RBCU

Külföldi tudósok kutatása megerősítette a Fas / FasL kifejeződés diagnosztikus jelentőségét a rák kialakulásának biomarkerként. Fas egy I. Típusú transzmembrán glikoprotein, (szinonimák APO-I, CD95), és apoptózist indukál a sejtekben való kölcsönhatás után Fas-ligandum (FasL) vagy agonista monoklonális ellenanyag Fas-antigén elleni.

Ugyanakkor ismert, hogy a Fas gyakorlatilag mindenféle szövetben expresszálódik. A fokozott Fas expresszió a vesékben, a májban, a szívben és a thymusban megfigyelhető. Ezen túlmenően, ez a receptor számos tumorban, valamint vírusfertőzött sejtekben expresszálódik. A különböző sejttípusok Fas-függő apoptózisra való rezisztenciájának oka lehet az oldható Fas termelésének növekedése ezeken a sejteken keresztül. Az oldható Fas az alternatív összekapcsolódás terméke, és képes gátolni a Fas vagy FasL elleni agonista monoklonális antitestek által indukált apoptózist.

Így, egyértelmű értelmezése a kutatási eredmények által végzett különböző szerzők arra a következtetésre vezet, hogy a jelen szakaszban a molekuláris onkológiai használni immunhisztokémiai marker prospektív kombinálva más diagnosztikai módszerek és prognózisa premalignus elváltozások a szájnyálkahártyán.

Különös jelentőséggel bír a diagnosztikus jelentőségű immunhisztokémiai markerek rangsorolása. Hisszük, hogy a csökkenő fontosság érdekében a következő sorrendbe rendezhetők:

1. Nagy diagnosztikai jelentőségű immunhisztokémiai markerek: szubplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Immunhisztokémiai markerek átlagos diagnosztikai jelentősége: Bax, MMP-9;
3. Ígéretes immunhisztokémiai markerek, amelyek diagnosztikai jelentősége további vizsgálatot igényel: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Immunhisztokémiai markerek, amelyek diagnosztikai jelentőségét nem precanceros betegségek előrejelzésére igazolják: p53, p63.

Ezen analízis alapján az irodalmi adatok arra lehet következtetni, hogy a meghatározás a immunhisztokémiai markerek nem úgy kell tekinteni, mint az egyetlen módszer a előrejelzésére során rákmegelőző elváltozások a szájnyálkahártyán és azonosítja a veszélye a rosszindulatú transzformáció, de mégis, a módszer magas diagnosztikus értékű kombinációban más a precancerus betegségek megelőzésének módszerei.

Kutatómunkatárs Kuznetsova Roza Gilevna. Immunhisztokémiai markerek a szájnyálkahártya prekancerózus elváltozásainak diagnózisában és az ajkak piros határában // Gyakorlati orvoslás. 8 (64) 2012. December / 1. Kötet

[1], [2], [3], [4], [5]