Polimeráz láncreakció (PCR) a fertőző betegségek diagnózisában
Utolsó ellenőrzés: 23.04.2024
Minden iLive-tartalmat orvosi szempontból felülvizsgáltak vagy tényszerűen ellenőriznek, hogy a lehető legtöbb tényszerű pontosságot biztosítsák.
Szigorú beszerzési iránymutatásunk van, és csak a jó hírű média oldalakhoz, az akadémiai kutatóintézetekhez és, ha lehetséges, orvosilag felülvizsgált tanulmányokhoz kapcsolódik. Ne feledje, hogy a zárójelben ([1], [2] stb.) Szereplő számok ezekre a tanulmányokra kattintható linkek.
Ha úgy érzi, hogy a tartalom bármely pontatlan, elavult vagy más módon megkérdőjelezhető, jelölje ki, és nyomja meg a Ctrl + Enter billentyűt.
PCR - az egyik módszer a DNS diagnosztika, amely lehetővé teszi, hogy növelje a példányszámot egy detektálható része a genom (DNS) a baktériumok vagy vírusok egy millió alkalommal egy DNS polimeráz enzimet. A teszt ezen egyedi genomiális nukleinsav szegmenst ismételten megszorozva (amplifikált), amely lehetővé teszi annak azonosítását. Először is, egy DNS-molekulát a baktériumok vagy vírusok által melegítés osztva két láncot, majd jelenlétében a szintetizált DNS primerek (nukleotidok szekvenciáját specifikus a meghatározott genomi) kötési őket komplementer DNS-szakaszok, szintetizált a második szál a nukleinsav után mindegyik primer jelenlétében egy termostabil DNS polimeráz . Két DNS-molekulát kapunk. A folyamat sokszor megismétlődik. A diagnózis, csak egy DNS-molekula, azaz egy baktérium vagy vírus részecske. Reagálva egy további lépést - a DNS-szintézis az RNS molekula használatával a reverz transzkriptáz enzim - lehetővé tette, hogy teszteljék RNS-vírusok, mint például a HCV vírussal. PCR - három-lépcsős folyamat, ismételt ciklusait denaturálás, primerek, a DNS-szintézis (polimerizációs). Az összeg a szintetizált DNS-t azonosítottuk ELISA vagy elektroforézissel.
PCR használható különböző biológiai anyagok - szérum vagy vérplazma, kaparás a húgycső, biopszia, pleurális folyadék, agy-gerincvelői folyadék, stb Az első PCR-t alkalmaztunk a diagnózis a fertőző betegségek, mint például a vírusos hepatitis B, vírusos hepatitis C, vírusos hepatitis D, CMV fertőzés, fertőzéses szexuális úton terjedő fertőzés (gonorrhoea, szemetet diynaya, mikoplazma, Ureaplasma fertőzés), a tuberkulózis, a HIV fertőzés, stb.
A PCR előnye a fertőző betegségek diagnózisában más kutatási módszerekkel szemben a következő:
- a fertőzés kórokozója megtalálható a szervezet bármilyen biológiai környezetében, beleértve a biopsziával nyert anyagot;
- A betegség legkorábbi szakaszában diagnosztizálhatók a fertőző betegségek;
- A kutatás eredményeinek kvantitatív értékelése lehetséges (hány vírus vagy baktérium található a vizsgált anyagban);
- a módszer nagy érzékenysége; így például, érzékenysége PCR DNS kimutatására a hepatitis B vírus a vérben 0,001 pg / ml (körülbelül 4 × 10 2 kópia / ml), míg az érzékenységet egy DNS hibridizációs módszerrel elágazó szondák - 2,1 pg / ml (körülbelül 7 × 10 5 kópia / ml).
[