A cikk orvosi szakértője
Új kiadványok
Restrikciós töredékhosszúságú polimorfizmus-elemzés
Utolsó ellenőrzés: 05.07.2025
Minden iLive-tartalmat orvosi szempontból felülvizsgáltak vagy tényszerűen ellenőriznek, hogy a lehető legtöbb tényszerű pontosságot biztosítsák.
Szigorú beszerzési iránymutatásunk van, és csak a jó hírű média oldalakhoz, az akadémiai kutatóintézetekhez és, ha lehetséges, orvosilag felülvizsgált tanulmányokhoz kapcsolódik. Ne feledje, hogy a zárójelben ([1], [2] stb.) Szereplő számok ezekre a tanulmányokra kattintható linkek.
Ha úgy érzi, hogy a tartalom bármely pontatlan, elavult vagy más módon megkérdőjelezhető, jelölje ki, és nyomja meg a Ctrl + Enter billentyűt.
A különféle restrikciós endonukleázok széles körű alkalmazása a kromoszómális DNS elemzésében feltárta az emberi genom hatalmas variabilitását. A strukturális gének kódoló és szabályozó régióiban bekövetkező apró változások is egy adott fehérje szintézisének leállásához vagy funkciójának elvesztéséhez vezethetnek az emberi szervezetben, ami általában befolyásolja a beteg fenotípusát. Az emberi genom azonban körülbelül 90%-át nem kódoló szekvenciák teszik ki, amelyek variabilitása nagyobb, számos úgynevezett semleges mutációt, vagy polimorfizmust tartalmaznak, és nem mutatnak fenotípusos expressziót. Az ilyen polimorf régiókat (lókuszokat) az örökletes betegségek diagnosztizálásában genetikai markerekként használják. A polimorf lókuszok minden kromoszómában jelen vannak, és a gén egy specifikus régiójához kapcsolódnak. Egy polimorf lókusz lokalizációjának meghatározásával megállapítható, hogy melyik gén kapcsolódik a betegben a betegséget okozó mutációhoz.
A polimorf DNS-régiók izolálásához bakteriális enzimeket használnak - restrikciós helyeket, amelyek termékei restrikciós helyek. A polimorf helyeken előforduló spontán mutációk rezisztenssé vagy éppen ellenkezőleg, érzékennyé teszik őket egy specifikus restrikciós hatásra.
A restrikciós helyek mutációs variabilitása kimutatható a DNS restrikciós fragmenseinek hosszának megváltoztatásával, elektroforézissel történő elválasztással és specifikus DNS-próbákkal történő hibridizációval. Polimorf hely hiányában egy nagy fragmens detektálható az elektroforegramokon, jelenlétében pedig egy kisebb fragmens. A restrikciós hely jelenléte vagy hiánya homológ kromoszómák azonos lokuszaiban lehetővé teszi a mutáns és a normál gén meglehetősen megbízható jelölését és az utódokra való átvitelének nyomon követését. Így, amikor olyan betegek DNS-ét vizsgáljuk, akiknek mindkét kromoszómájában egy restrikciós hely van egy polimorf régióban, rövid DNS-fragmenseket detektálhatunk az elektroforegramon. A polimorf restrikciós helyet megváltoztató mutációra homozigóta betegeknél hosszabb fragmenseket, heterozigóta betegeknél pedig rövid és hosszú fragmenseket detektálhatunk.
[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]