A cikk orvosi szakértője
Új kiadványok
Antibiotikum-érzékenységi vizsgálat: előkészítés, megfejtés, mennyi mindent végeznek el
Utolsó ellenőrzés: 05.07.2025
Minden iLive-tartalmat orvosi szempontból felülvizsgáltak vagy tényszerűen ellenőriznek, hogy a lehető legtöbb tényszerű pontosságot biztosítsák.
Szigorú beszerzési iránymutatásunk van, és csak a jó hírű média oldalakhoz, az akadémiai kutatóintézetekhez és, ha lehetséges, orvosilag felülvizsgált tanulmányokhoz kapcsolódik. Ne feledje, hogy a zárójelben ([1], [2] stb.) Szereplő számok ezekre a tanulmányokra kattintható linkek.
Ha úgy érzi, hogy a tartalom bármely pontatlan, elavult vagy más módon megkérdőjelezhető, jelölje ki, és nyomja meg a Ctrl + Enter billentyűt.
Napjainkban egyre népszerűbb az antibiotikum-érzékenység vizsgálata. Az emberi mikroflóra meglehetősen változatos, számos mikroorganizmus képviseli különböző biotópokban.
A gyógyszergyárak számos antibakteriális szert, antibiotikumot fejlesztettek ki, amelyek segítenek fenntartani a mikrobiális populációk normális arányát és számát. Az antibiotikum-korszak kezdetével számos, korábban halálosnak tartott betegséget sikerült meggyógyítani. De a mikroorganizmusok is igyekeznek túlélni, fokozatosan alkalmazkodva az antibakteriális gyógyszerek hatásához. Idővel sokan közülük rezisztenciát szereztek számos gyógyszerrel szemben, rögzítették azt a genotípusukban, és elkezdték generációról generációra örökíteni. Így az új mikroorganizmusok kezdetben érzéketlenek bizonyos gyógyszerekre, és használatuk hatástalan lehet. A gyógyszerészek egyre több új terméket fejlesztenek ki, új hatóanyagokat adnak hozzájuk, megváltoztatják az alapformulát. De fokozatosan kialakul velük szembeni rezisztencia is.
A mikroflóra számos gyógyszerrel, sőt analógjaikkal szembeni fokozott rezisztenciájának oka gyakran az antibiotikumok helytelen és ellenőrizetlen használatában rejlik. Az orvosok antibiotikumokat és azok kombinációit írják fel különféle bakteriális betegségek esetén. Ugyanakkor nincs előzetes értékelés arról, hogy mennyire lesznek hatékonyak, nincs kiválasztva az optimális dózis, ami nagyon fontos mind a kezelés, mind a további rezisztencia kialakulásának mechanizmusainak megelőzése szempontjából. Sokan tévesen írnak fel antibakteriális terápiát még vírusos betegségek esetén is, ami hatástalan, mivel az antibiotikum nem hat a vírusok ellen.
A terápiát gyakran előzetes érzékenységi vizsgálat nélkül írják fel, a hatóanyag és a szükséges dózis kiválasztását az egyes betegségekhez és biotópokhoz nem végzik el. Mivel az antibiotikumokat „vakon” írják fel, gyakran előfordul, hogy nem mutatnak semmilyen aktivitást a betegséget okozó mikroorganizmusokkal szemben, amelyek számát csökkenteni kell. Ehelyett a mikroflóra más képviselőire hatnak, ami diszbakteriózist eredményez, ami szintén meglehetősen veszélyes patológia, és súlyos következményekkel járhat. Különösen veszélyesek azok az esetek, amikor egy antibiotikum elpusztítja a normál mikroflórát, amelynek feladata a szervezet védelme és normális működésének fenntartása. Vannak olyan esetek is, amikor túl sokat vagy túl keveset írnak fel a gyógyszerből.
A betegek a kezeléssel kapcsolatban is felelőtlenek. A kezelést gyakran leállítják, miután a betegség tünetei már nem zavarják őket. Ugyanakkor sokan inkább nem fejezik be a teljes kúrát. Ez az egyik tényező, amely hozzájárul a baktériumok rezisztenciájának kialakulásához. A teljes kúra célja a kórokozó mikroflóra teljes elpusztítása. Ha a kúrát nem fejezik be, akkor nem pusztul el teljesen. Azok a mikroorganizmusok, amelyek túlélik, mutációkon mennek keresztül, olyan mechanizmusokat fejlesztenek ki, amelyek védelmet nyújtanak számukra a gyógyszerrel szemben, és átadják azt a következő generációknak. A veszély az, hogy a rezisztencia nemcsak ezzel a konkrét gyógyszerrel, hanem a teljes gyógyszercsoporttal szemben is kialakul.
Ezért ma a racionális terápia és a rezisztencia megelőzésének egyik leghatékonyabb eszköze az előírt gyógyszerrel szembeni érzékenység előzetes meghatározása és optimális dózisának kiválasztása.
Az eljárás indikációi antibiotikum-érzékenységi tesztek
Normális esetben ilyen elemzést kell végezni minden olyan esetben, amikor antibakteriális terápiára van szükség. Az antibiotikum-terápia alapvető törvényei alapján bármely antibiotikum csak a mikroflóra érzékenységének előzetes felmérése után írható fel erre a szerre, és laboratóriumi körülmények között meghatározták a hatóanyag optimális koncentrációját. A gyakorlatban különböző okok és körülmények miatt ilyen vizsgálatot nem végeznek a kezelés megkezdése előtt, és az orvos kénytelen "véletlenszerűen" kiválasztani a gyógyszert.
Manapság az érzékenységi vizsgálatot csak olyan esetekben végzik, amikor az orvosnak komoly kétségei vannak a felírt gyógyszer hatékonyságával kapcsolatban, a gyógyszer tartós hatástalansága esetén, valamint ugyanazon gyógyszer ismételt, korlátozott ideig történő alkalmazása esetén. Az érzékenységet gyakran szexuális úton terjedő betegségek kezelésében határozzák meg. Sok szakember mellékhatások, allergiás reakciók esetén, valamint akkor fordul az elemzéshez, ha az egyik gyógyszert egy másikra kell cserélni.
Az elemzést gyakran használják antibakteriális terápiára szánt gyógyszerek kiválasztására a műtétek, laparoszkópos beavatkozások és szerv eltávolítása utáni felépülési időszakban. A sebészeti és gennyes sebészeti osztályokon egy ilyen vizsgálat egyszerűen szükséges, mivel itt a rezisztencia elég gyorsan kialakul. Ezenkívül szuperrezisztens, "kórházban szerzett" rezisztenciák is kialakulnak. Sok magánklinika teljes felelősséggel kezeli a gyógyszerek felírását - csak az érzékenység ellenőrzése után. Sok esetben az állami intézmények költségvetése egyszerűen nem teszi lehetővé az ilyen vizsgálatok elvégzését minden olyan beteg esetében, aki antibakteriális terápiát igényel.
Készítmény
A vizsgálatra való felkészülés nem igényel semmilyen különleges intézkedést. Ugyanaz, mint bármely más vizsgálatnál. A vizsgálat előtt néhány nappal tartózkodni kell az alkoholfogyasztástól. Reggel, az anyaggyűjtés napján, a legtöbb esetben nem szabad enni és inni. De minden az elemzés típusától függ. A vizsgálathoz szükséges anyag a betegségtől függően eltérő lehet.
Torok- és légúti betegségek esetén torok- és orrváladékot vesznek. Nemigyógyászatban, nőgyógyászatban, urológiában nemi szervi váladékot és vért vesznek elemzésre. Vesebetegségek esetén gyakran vizeletmintát is kell venni. Emésztőrendszeri betegségek és egyes fertőző betegségek esetén székletet és hányadékot vizsgálnak. Néha anyatejet, orrváladékot, szemváladékot, nyálat és köpetet is vizsgálhatnak. Súlyos kóros állapotok és fertőző folyamat gyanúja esetén akár agy-gerincvelői folyadékot is vizsgálnak. A spektrum meglehetősen széles.
Az anyaggyűjtés jellemzőit a biológiai hovatartozása határozza meg. Így a vizeletet és a székletet reggel gyűjtik tiszta edénybe vagy biológiai anyagok számára kialakított speciális tartályba. Az anyatejet etetés előtt gyűjtik össze. A középső részt vizsgálatra veszik. A kenetet egy speciális tamponnal gyűjtik, amelyet a nyálkahártyákon vezetnek át, majd egy előkészített táptalajjal ellátott kémcsőbe helyezik. A vért egy kémcsőbe gyűjtik, ujjból vagy vénából. A húgycsőből vagy hüvelyből történő kenetvétel esetén ajánlott több napig tartózkodni a nemi közösüléstől.
Biológiai anyagok kutatás céljából történő gyűjtésekor elsősorban a helyes gyűjtést és a sterilitást kell biztosítani. De a legtöbb esetben ez az egészségügyi személyzet feladata, a betegnek nem kell aggódnia emiatt. Leggyakrabban a nőgyógyászok és urológusok fordulnak ilyen vizsgálatokhoz, másodszor pedig az otolaryngológusok az orrgarat és a garat, valamint a felső légutak betegségeinek kezelésében.
Ki kapcsolódni?
Technika antibiotikum-érzékenységi tesztek
A begyűjtött biológiai anyagot steril körülmények között szállítják a laboratóriumba, ahol további kutatásokat végeznek. Először is, univerzális táptalajon oltják. Az anyag egy részét mikroszkópos vizsgálatnak is alávetik. Mikroszkópos kenetet készítenek, vizsgálatot végeznek, amelynek segítségével hozzávetőleges képet kaphatnak, feltételezhetik, hogy mely mikroorganizmusok vannak jelen a mintában. Ez lehetővé teszi a legoptimálisabb környezet kiválasztását a további kutatáshoz és a mikroorganizmusok azonosításához. Mikroszkópián gyulladásra, onkológiai folyamatra utaló jelek is láthatók.
Néhány nap leforgása alatt mikroorganizmus-telepek növekednek egy Petri-csészében. Ezután több telepet vesznek ki, és szelektív táptalajra helyezik át, amely lehetővé teszi a mikroorganizmusok hozzávetőleges csoportjának meghatározását. A telepeket több napig termosztátban inkubálják, majd megkezdődik az azonosítás (a mikroorganizmus típusának meghatározása). Az azonosítást speciális biokémiai és genetikai tesztekkel, azonosítókkal végzik. Ezenkívül immunológiai vizsgálatok is elvégezhetők.
Miután a fő kórokozót izolálták, felmérik az antibiotikumokkal szembeni érzékenységét. Erre számos módszer létezik. A leggyakrabban használt módszer a sorozathígításos vagy a korongdiffúziós módszer. A módszereket részletesen ismertetik a mikrobiológiai kézikönyvek, irányelvek és laboratóriumi szabványok.
A korongdiffúziós módszer lényege, hogy az azonosított mikroorganizmusokat táptalajra vetik, majd antibiotikumba áztatott speciális korongokat helyeznek rá. A vetést termosztátban több napig inkubálják, majd mérik az eredményeket. Felmérik az egyes antibiotikumok baktériumnövekedés-gátlásának mértékét. Ha a baktérium érzékeny az antibiotikumra, a korong körül egy „líziszóna” alakul ki, amelyben a baktériumok nem szaporodnak. Növekedésük lassú vagy egyáltalán nincs jelen. A növekedésgátlási zóna átmérője alapján határozzák meg a mikroorganizmusok antibiotikummal szembeni érzékenységének mértékét, és további ajánlásokat fogalmaznak meg.
A sorozathígításos módszer a legpontosabb. Ehhez a mikroorganizmusokat folyékony táptalajra oltják, majd a decimális hígítási rendszer szerint hígított antibiotikumot adnak hozzá. Ezután a kémcsöveket termosztátba helyezik több napra történő inkubálásra. Az antibiotikumokkal szembeni érzékenységet a táptalajban lévő baktériumok növekedésének mértéke határozza meg antibiotikumok hozzáadásával. Feljegyzik azt a minimális koncentrációt, amelyen a mikroorganizmusok még növekednek. Ez a gyógyszer minimális dózisa (mikrobiológiai egységekből a hatóanyagra való átszámítás szükséges).
Ezek standard mikrobiológiai módszerek, amelyek minden kutatás alapját képezik. Minden manipuláció manuális végrehajtását vonják maguk után. Manapság sok laboratórium fel van szerelve speciális berendezésekkel, amelyek mindezeket az eljárásokat automatikusan elvégzik. Az ilyen berendezésekkel dolgozó szakembernek csak a berendezéssel való munkavégzés képességére, valamint a biztonsági és sterilitási szabályok betartására van szüksége.
Figyelembe kell venni, hogy a laboratóriumi körülmények között és az élő szervezetekben az érzékenységi indexek élesen eltérnek. Ezért a személynek nagyobb adagot írnak fel, mint amennyit a vizsgálat során meghatároztak. Ez annak köszönhető, hogy a szervezetben nincsenek ilyen optimális feltételek a baktériumok szaporodásához. A laboratóriumban "ideális körülmények" jönnek létre. A gyógyszer egy részét a nyál, a gyomornedv semlegesítheti. Egy részét a vérben az immunrendszer által termelt antitestek és antitoxinok semlegesítik.
Vizelet antibiotikum-érzékenységi teszt
Először biológiai anyagot gyűjtenek. Ehhez össze kell gyűjteni a reggeli vizelet középső részét, és laboratóriumba kell vinni. Fontos a sterilitás fenntartása és az antibiotikumok szedésének elkerülése az elemzés előtti napokban, különben álnegatív eredményt kaphatunk. Ezt követően standard vetést végeznek, amelynek lényege, hogy a kórokozó tiszta kultúráját izolálják, és olyan antibiotikumot választanak ki, amely optimális baktericid hatással lesz rá. Meghatározzák az antibiotikum szükséges koncentrációját.
A vizeletvizsgálatot leggyakrabban akkor írják fel, ha gyanú merül fel a urogenitális rendszer fertőző és gyulladásos folyamatára, immunhiányos állapotokra és anyagcserezavarokra. Normális esetben a vizelet steril folyadék. Az ilyen vizsgálat időtartama 1-10 nap, és a mikroorganizmus növekedési üteme határozza meg.
Tenyésztés és antibiotikum-érzékenységi vizsgálat
A vizsgálat során a kórokozó mikroorganizmust tiszta kultúrába izolálják. Előfordulhat, hogy több ilyen mikroorganizmus is létezik (vegyes fertőzés). Egyes mikroorganizmusok képesek biofilmeket képezni, amelyek egyfajta „mikrobiális közösségek”. A biofilmek túlélési aránya sokkal magasabb, mint az egyes mikroorganizmusoké vagy társulásaié. Ezenkívül nem minden antibiotikum képes befolyásolni a biofilmet és behatolni rajta.
A kórokozó meghatározásához, tiszta tenyészetbe történő izolálásához vetést végeznek. A vizsgálat során több vetést végeznek különböző táptalajokban. Ezután izolálják a tiszta tenyészetet, meghatározzák biológiai hovatartozását, és meghatározzák az antibakteriális gyógyszerekkel szembeni érzékenységét. Kiválasztják az optimális koncentrációt.
A vizsgálathoz bármilyen biológiai anyag felhasználható, a betegségtől és a fertőző folyamat lokalizációjától függően. Az időtartamot a mikroorganizmusok növekedési üteme határozza meg.
[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]
Székletérzékenységi teszt
A székletet különböző gyomor- és bélbetegségek, fertőző folyamat gyanúja, bakteriális mérgezés, ételmérgezés esetén vizsgálják. A vizsgálat célja a kórokozó izolálása és az optimális antibakteriális gyógyszerek kiválasztása, amelyek nagy aktivitással rendelkeznek. Az ilyen típusú vizsgálat jelentősége, hogy olyan gyógyszert lehet kiválasztani, amely csak a kórokozóra hat, és nem befolyásolja a normál mikroflóra képviselőit.
Az első és nagyon fontos szakasz a székletgyűjtés. A székletet reggel, egy speciális steril tartályba kell gyűjteni. Legfeljebb 1-2 órán át szabad tárolni. A menstruációs vérzéssel küzdő nőknek a vizsgálat végére kell halasztaniuk az elemzést, mivel az eredmények pontossága megváltozik. Az anyagot vizsgálatra szállítják a laboratóriumba. Az elemzést standard mikrobiológiai technikákkal végzik, tiszta kultúra oltásával és izolálásával. Antibiogramot is készítenek. A következtetés alapján ajánlásokat dolgoznak ki, és további vizsgálati tervet határoznak meg.
[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]
Érzékeny diszbakteriózis-analízis
A vizsgálat anyaga a székelés után azonnal vett széklet. A gyomor-bél traktus normál mikroflórája a normál flóra képviselőiből és számos patogén flóra képviselőiből áll. Fajösszetételük, mennyiségük és arányuk szigorúan meghatározott, és a megengedett normán belül marad. Ha ez az arány felborul, diszbakteriózis alakul ki. Ez különböző módon jelentkezhet. Fertőző betegségek alakulhatnak ki, ha a patogén mikroflóra mennyisége hirtelen megnő. Ha bármely mikroorganizmus mennyisége hirtelen csökken, a szabad helyet más, a gyomor-bél traktusra nem jellemző, vagy patogén képviselők foglalják el. Gyakran a szabad helyet egy gomba foglalja el, majd különféle gombás fertőzések és candidiasis alakul ki.
A bélflóra mennyiségi és minőségi összetételének meghatározása érdekében székletvizsgálatot végzünk diszbakteriózis kimutatására. Hagyományosan a bélben élő összes képviselőt három csoportra osztják: patogén, opportunista és nem patogén. Ennek megfelelően az elemzés három részből áll. Minden mikroorganizmus-csoportnak megvan a saját igénye a táplálékforrásra, az energiára. Minden csoportnak külön táptalajra és szelektív adalékanyagokra van szüksége.
Először mikroszkópos vizsgálatot és elsődleges oltást végzünk. Majd az oltás után kiválasztjuk a legnagyobb telepeket, amelyek morfológiai jellemzőikben hasonlóak az egyes csoportok képviselőihez. Ezeket szelektív táptalajra helyezzük át. Miután a mikroorganizmusok elszaporodtak, azonosítjuk és azonnal teszteljük az antibiotikumokkal szembeni érzékenységüket. Standard mikrobiológiai módszereket alkalmazunk.
A kórokozó mikroorganizmusok csoportjának vizsgálata a standard vizsgálatokon túl magában foglalja a tífusz, paratífusz és dizentéria baktériumok meghatározását is. Azt is megállapítják, hogy a személy hordozza-e ezeket a mikroorganizmusokat. A diszbakteriózis átfogó vizsgálata magában foglalja a bifidobaktériumok és a laktobacillusok csoportjának képviselőinek vizsgálatát is. A vizsgálat körülbelül egy hétig tart, és a mikroorganizmusok növekedési ütemétől függ.
[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]
Bakteriofág érzékenységi vizsgálat
Bélfertőzés esetén gyakran bakteriofágokat alkalmaznak antibiotikumok helyett. A bakteriofágok olyan bakteriális vírusok, amelyek csak azokra érzékenyek. Találnak egy baktériumot, amellyel kiegészítik egymást, behatolnak abba, és fokozatosan elpusztítják a baktériumsejtet. Ennek eredményeként a fertőző folyamat leáll. De nem minden baktérium érzékeny a bakteriofágokra. Annak ellenőrzésére, hogy egy adott bakteriofág mutat-e aktivitást a mikroflóra képviselőivel szemben, elemzést kell végezni.
A vizsgálat anyaga a széklet. Az elemzést egy órán belül be kell juttatni a laboratóriumba, különben lehetetlen elvégezni. Az elemzést több ismétlésben kell elvégezni. A kezdeti módszer hasonló az antibiotikumokkal szembeni érzékenység meghatározásához. Először a minta előzetes mikroszkópos vizsgálatát végzik el, majd univerzális táptalajra oltják. Ezután tiszta tenyészetet izolálnak szelektív táptalajra.
A munka fő része tiszta tenyészet, melyet különböző típusú bakteriofágokkal kezelnek. Ha a telep feloldódik (lizál), az a bakteriofág magas aktivitását jelzi. Ha a lízis részleges, a bakteriofág mérsékelten működik. Lízis hiányában a bakteriofággal szembeni rezisztenciáról beszélhetünk.
A fágterápia előnye, hogy a bakteriofágok nem befolyásolják az emberi szervezetet, és nem okoznak mellékhatásokat. Bizonyos típusú baktériumokhoz kötődnek és lizálják azokat. Hátránya, hogy nagyon specifikusak és szelektív hatásúak, és nem mindig tudnak kötődni a baktériumokhoz.
[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]
Köpetvizsgálat antibiotikum-érzékenység kimutatására
Az alsó légúti váladékok vizsgálata. A cél a betegség kórokozójaként működő mikroorganizmusok típusának meghatározása. Antibiogramot is végeznek. Ebben az esetben meghatározzák a kórokozó antibiotikumokkal szembeni érzékenységét, és kiválasztják az optimális koncentrációt. Légúti betegségek esetén alkalmazzák.
A köpet, valamint a tüdő és a hörgők egyéb tartalmának vizsgálata szükséges a kezelési rend kiválasztásához és a különböző diagnózisok elkülönítéséhez. A tuberkulózis jelenlétének megerősítésére vagy cáfolatára szolgál.
Először is biológiai anyagot kell nyerni. Ez köhögéssel, köptetéssel, vagy a légcsőből történő mintavétellel nyerhető bronchoszkópia során. Léteznek speciális aeroszolok, amelyek elősegítik a köptetést. A köpetvétel előtt ki kell öblíteni a szájat vízzel, ami csökkenti a szájüreg bakteriális szennyezettségének mértékét. Először is ajánlott 3 mély lélegzetet venni és produktív köhögést produkálni. A köpet a légcsőből történő aspirációval is levehető. Ebben az esetben egy speciális katétert helyeznek a légcsőbe. A bronchoszkópia során egy bronchoszkópot helyeznek a hörgőüregbe. Ebben az esetben a nyálkahártyát érzéstelenítővel bekenik.
Az anyagot ezután laboratóriumba küldik vizsgálatra. Standard vetést és mikroszkópos vizsgálatot végeznek. Ezután tiszta tenyészetet izolálnak, és további manipulációkat végeznek vele. Antibiogramot végeznek, amely lehetővé teszi a bakteriális érzékenység spektrumának azonosítását és az optimális dózis kiválasztását.
Tuberkulózis gyanúja esetén a reggeli köpetet három napig vizsgálják. A tuberkulózis vizsgálatakor az eredmény 3-4 hét alatt elkészül. Mivel a betegség kórokozója, a mycobacterium tuberculosis nagyon lassan növekszik.
Normális esetben a légutak normál mikroflórájának képviselőit kell kimutatni. Azt is figyelembe kell venni, hogy csökkent immunitás esetén a normál mikroflóra mutatói eltérhetnek.
Spermaelemzés antibiotikum-érzékenység kimutatására
Ez a spermium ejakulátumának bakteriológiai vizsgálata, majd érzékeny antibiotikumok és azok koncentrációinak kiválasztása. Leggyakrabban meddőség és a férfi reproduktív rendszer egyéb betegségeinek kezelésében végzik. Abban az esetben, ha a betegséget fertőző folyamat kíséri. A férfi meddőség fő oka a legtöbb esetben fertőzés. Általában először spermogramot készítenek. Az eredmények alapján megállapítják a spermiumok megtermékenyítő képességét. Ha ebben az elemzésben nagyszámú leukocitát találnak, gyulladásos folyamatról beszélhetünk. Ebben az esetben általában azonnal mikrobiológiai vizsgálatot írnak elő, mivel a gyulladást szinte mindig fertőzés kíséri. A kapott eredmények alapján választják ki a megfelelő terápiát. A vizsgálatot általában andrológus írja fel.
A prosztatagyulladás és a nemi betegségek szintén indokolják a vizsgálat elvégzését. Akkor is felírják, ha a partnernél nemi úton terjedő betegséget észlelnek.
A helyes elemzés alapja elsősorban a biológiai anyag megfelelő gyűjtése. Az anyagot széles nyakú speciális edényekbe gyűjtik. A tárolási hőmérsékletnek meg kell felelnie az emberi test hőmérsékletének. Ebben az esetben az anyag legfeljebb egy órán át tárolható. Fagyasztott formában legfeljebb egy napig tárolható. Nem helyénvaló tenyészetet venni antibiotikum-kúra alatt, ez megváltoztatja a klinikai képet. A tenyészetet általában az antibiotikum-terápia megkezdése előtt végzik. Vagy hagyja abba a gyógyszerek szedését 2-3 nappal az elemzés előtt.
Ezután táptalajra vetik. Termosztátban inkubálják 1-2 napig. Ezután tiszta tenyészetet izolálnak, majd azonosítják, meghatározzák az érzékenységet, valamint az egyes telepek típusát és növekedési sebességét. Az antibiotikumokkal szembeni érzékenységet akkor határozzák meg, ha kórokozó mikroorganizmusokat észlelnek. Az elemzés átlagosan 5-7 napot vesz igénybe.
[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]
Gluténérzékenységi teszt
Számos teszt létezik, amelyekkel meghatározható az immunológiai érzékenység különböző anyagokkal vagy kórokozókkal szemben. Korábban a fő módszer az antitestek és antigének agglutinációs reakcióján alapuló vizsgálatok voltak. Manapság ezeket a teszteket egyre ritkábban alkalmazzák, mivel érzékenységük sokkal alacsonyabb, mint sok modern módszeré, például a gluténteszteké. A gyakorlatban leggyakrabban nyáltesztet alkalmaznak a glutén és a széklet elemzéséhez.
A gluténérzékenységi tesztet különféle bélrendszeri rendellenességek diagnosztizálására használják. Az immunrendszer reakcióján alapul. Ha glutént adnak a széklethez, a reakció vagy bekövetkezik, vagy hiányzik. Ezt álpozitív vagy álnegatív eredménynek tekintik. A pozitív eredmény vastagbélgyulladásra való hajlamot, annak kialakulásának nagy valószínűségét jelzi. Megerősíti a lisztérzékenységet is.
Gluténtesztet is lehet végezni nyál felhasználásával biológiai anyagként. Lehetőség van a gliadin elleni antitestek mennyiségének mérésére. A pozitív eredmény gluténérzékenységet jelez. Ez a cukorbetegség nagy valószínűségére utalhat. Ha mindkét teszt pozitív, akkor a cukorbetegség vagy a lisztérzékenység igazolható.
Chlamydia antibiotikum-érzékenységi teszt
Az elemzést az urogenitális traktus fertőző és gyulladásos betegségeinek kezelésében végzik, ha klamidia gyanúja merül fel. A vizsgálathoz szükséges anyag nőknél a hüvelyi nyálkahártya kaparása, férfiaknál a húgycsőből vett kenet. A gyűjtést az eljárás helyiségében, eldobható eszközökkel végzik. Fontos a sterilitás fenntartása. Az anyaggyűjtés előtt 1-2 napig tartózkodni kell az intim együttléttől a vizsgálat megkezdése előtt. Ha egy nő menstruál, az anyagot a teljes befejezése után 3 nappal gyűjtik.
Az anyagot laboratóriumba szállítják. A teljes körű elemzés magában foglalja a kenet előzetes mikroszkópos vizsgálatát. Ez lehetővé teszi a mikroflóra vizuális meghatározását morfológiai jellemzők alapján, és a táptalajok helyes kiválasztását. A nyálka, a genny és a hámrészecskék tartalma közvetlenül vagy közvetve utalhat gyulladásos folyamat vagy rosszindulatú sejtdegeneráció kialakulására.
Ezután elvégezzük az elsődleges oltást. A tenyészetet több napig termosztátban inkubáljuk, és az azonosítást a tenyésztési jellemzők alapján végezzük. Ezután a tenyészetet a klamidia tenyésztésére szolgáló szelektív táptalajra helyezzük át. A kapott telepeket biokémiai vizsgálatokkal azonosítjuk. Ezután standard módszerekkel meghatározzuk az antibiotikumokkal szembeni érzékenységet. Kiválasztjuk a legérzékenyebb antibiotikumot és annak koncentrációját. A klamidia tenyésztéséhez speciális, kifejezetten erre a mikroorganizmustípusra kifejlesztett táptalajokra van szükség, amelyek tartalmazzák az összes szükséges anyagot és növekedési faktort.
Biológiai módszerrel is lehet vizsgálatot végezni. Ehhez patkányokat fertőznek meg a kórokozóval. Egyes laboratóriumokban patkányok helyett speciálisan tenyésztett szövettenyészetet használnak. Ez annak köszönhető, hogy a klamidia intracelluláris parazita, és tenyésztésükhöz speciális körülmények szükségesek. Ezután a mikroorganizmusokat PCR módszerrel határozzák meg. Az érzékenység meghatározásához a klamidia szelektív táptalajára ültetik át őket, és néhány nap múlva feljegyzik az eredményeket. A rezisztenciát vagy érzékenységet a sejtekben a fertőző folyamat elnyomása alapján ítélik meg.
[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]
Mennyi ideig tart egy antibiotikum-érzékenységi teszt elvégzése?
Az elemzés átlagosan 5-7 napon belül elkészül. Egyes elemzések tovább tartanak. Például a tuberkulózis diagnosztizálásakor 3 héttől egy hónapig is várni kell az eredményekre. Minden a mikroorganizmusok növekedési ütemétől függ. A laboratóriumi személyzetnek gyakran olyan esetekkel kell foglalkoznia, amikor a betegek gyorsabb elemzést kérnek. Sőt, sürgősség esetén még "pótdíjat" is felajánlanak. Itt azonban meg kell érteni, hogy ebben az esetben semmi sem függ a laboratóriumi asszisztens intézkedéseitől. Csak attól függ, hogy milyen gyorsan növekszik a mikroorganizmus. Minden típusnak megvan a saját, szigorúan meghatározott növekedési üteme.
Normál teljesítmény
Nincsenek abszolút univerzális normaértékek minden elemzéshez. Először is, ezek az értékek biotóponként eltérőek lehetnek. Másodszor, mikroorganizmusonként egyediek. Vagyis ugyanazon mikroorganizmus normaértékei, mondjuk, a torokban és a belek esetében, eltérőek. Tehát, ha a torokban a staphylococcus dominál a normál mikroflóra képviselőjeként, akkor a belekben az E. coli, a bifido- és a laktobaktériumok vannak túlsúlyban. Ugyanazon mikroorganizmus értékei a különböző biotópokban szintén jelentősen eltérhetnek. Például a Candida bizonyos mennyiségben normális esetben jelen lehet az urogenitális mikroflórában. A szájüregben normális esetben nincsenek jelen. A Candida jelenléte a szájüregben a természetes élőhelyükről történő mesterséges behurcolására utalhat.
A vizelet, a vér, az agy-gerincvelői folyadék olyan biológiai környezet, amelynek normális esetben sterilnek kell lennie, azaz nem tartalmazhat semmilyen mikroflórát. A mikroflóra jelenléte ezekben a folyadékokban erős gyulladásos, fertőző folyamatra utal, és a bakterémia és a szepszis kialakulásának kockázatára is utal.
Általánosságban elmondható, hogy van egy hozzávetőleges osztályozás. A mikrobiológiában a mértékegység a CFU/ml, azaz a telepképző egységek száma 1 milliliter biológiai folyadékban. A szennyezettség mértékét a CFU száma határozza meg, és széles tartományban, 101 és 109 között változik. Ennek megfelelően a 101 a mikroorganizmusok minimális száma, a 109 a súlyos fertőzési fokot jelenti. Ugyanakkor a 103 - ig terjedő tartomány normálisnak tekinthető, az e szám feletti összes mutató a baktériumok kóros szaporodását jelzi.
Ami az antibiotikumokkal szembeni érzékenységet illeti, minden mikroorganizmust rezisztensre, mérsékelten érzékenyre és érzékenyre osztanak. Ezt az eredményt gyakran minőségi jellemzőként fejezik ki, amely a MID-et jelzi - az antibiotikum minimális gátló dózisát, amely még gátolja a mikroorganizmus növekedését. Minden személy, valamint minden mikroorganizmus esetében ezek a mutatók szigorúan egyediek.
Az elemzésre szolgáló eszköz
Bakteriológiai vizsgálatok, különösen az antibiotikumokkal szembeni érzékenység meghatározása során egyetlen eszköz nem elegendő. Szükség van a bakteriológiai laboratórium teljes, átfogó felszerelésére. Gondosan kell megtervezni és kiválasztani a felszerelést, amely megfelel a kutatás minden szakaszának. A biológiai anyag gyűjtésének szakaszában steril eszközök, dobozok, ládák, tartályok, tárolókamrák és szállítóeszközök szükségesek az anyag laboratóriumba szállításához.
A laboratóriumban elsősorban egy kiváló minőségű mikroszkópra lesz szükség a kenetmikroszkópiához. Manapság számos mikroszkóp létezik, amelyek változatos tulajdonságokkal rendelkeznek – a hagyományos fénymikroszkópoktól a fáziskontraszt- és atomerő-mikroszkópokig. A modern berendezések lehetővé teszik a kép háromdimenziós térben történő szkennelését és nagy nagyításban, nagy pontossággal történő vizsgálatát.
A mikroorganizmusok beoltásának és inkubálásának szakaszában autoklávokra, száraz hőszekrényekre, exszikkátorokra, gőzfürdőkre és centrifugára lehet szükség. Szükség van egy termosztátra, amelyben a biológiai anyag fő inkubálása történik.
A mikroorganizmusok azonosításának és az antibiotikum-vizsgálat elvégzésének szakaszában mikromanipulátorokra, tömegspektrométerekre, spektrofotométerekre, koloriméterekre lehet szükség a tenyészetek biokémiai tulajdonságainak különféle számításaihoz és értékeléséhez.
Ezenkívül a modern laboratóriumok felszerelhetők olyan csúcstechnológiás berendezésekkel, amelyek a fent említett kutatási főbb szakaszokat elvégzik, egészen az eredmények automatikus kiszámításáig. Ilyen eszközök például a bakteriológiai laboratórium komplex eszköze, amely egy repülési idő tömegspektrométeren alapul. Ez az eszközcsalád lehetővé teszi a laboratórium teljes területének három zónára osztását. Az első zóna a szennyezett, ahol a teszteket fogadják és regisztrálják. A második zóna a munkazóna, ahol a fő mikrobiológiai kutatásokat végzik. A harmadik zóna pedig a sterilizálás és autokláv, ahol a munkaanyagok előkészítését és ártalmatlanítását végzik.
A modellek széles hőmérsékleti és körülménytartományban történő inkubálást tesznek lehetővé. Beépített vér- és egyéb biológiai minták analizátort tartalmaznak, amely nagy pontosságú és megbízható eredményeket biztosít. A készlet tartalmaz elektronikus mérlegeket, bidesztillátorokat, centrifugákat, autoklávokat és sterilizáló szekrényeket, automata közegfőzőt, beépített keverővel ellátott vízfürdőt, pH-mérőket, hőmérőket és mikroszkópokat.
Mikrobiológiai analizátort is használnak, amelybe a vizsgálandó mintákat, a táptalajt és az érzékenység meghatározására szolgáló tesztkészleteket helyezik. A készülék elvégzi a szükséges vizsgálatokat, és kész következtetést ad ki.
Az értékek emelése és csökkentése
Csak egy orvos tudja megfejteni az elemzést. De gyakran a betegek, miután megkapták az eredményeket, pánikba esnek, és nagyszámú érthetetlen szimbólumot és számot vesznek észre. Annak érdekében, hogy ne tévedjenek el, tanácsos legalább egy általános elképzeléssel rendelkezni arról, hogyan kell megfejteni az antibiotikum-érzékenység elemzését. Az eredmények első tétele általában a betegség kórokozójaként szolgáló mikroorganizmus nevét jelzi. A név latinul van megadva. Jelölheti a szervezetben uralkodó normál mikroflóra képviselőjét is, így nincs ok a pánikra. A második tétel a vetés mértékét, azaz a mikroorganizmusok számát jelzi. Ez a szám általában 101 és 109 között mozog. A harmadik tétel a patogenitás formáját, a negyedik pedig az antibakteriális gyógyszerek nevét jelzi, amelyekre ez a mikroorganizmus érzékeny. A mellette feltüntetik a minimális gátló koncentrációt, amelynél a mikroorganizmus növekedése gátolt.