Hepatitis C PCR

A HCV általában nincs jelen az anyagban.

A vírusos hepatitis C diagnosztizálásának szerológiai módszereivel ellentétben, amelyek a HCV elleni antitesteket mutatják ki, a PCR lehetővé teszi a HCV RNS jelenlétének közvetlen kimutatását és koncentrációjának számszerűsítését a vizsgált anyagban. A teszt fajspecificitással és magas érzékenységgel rendelkezik: tíz HCV RNS molekula a vizsgált anyagban elegendő a kimutatásához. A HCV elleni antitestek kimutatása csak a beteg fertőzésének tényét erősíti meg, de nem teszi lehetővé a fertőző folyamat aktivitásának (a vírus replikációjának) megítélését és a betegség prognózisát. Ezenkívül a HCV elleni antitesteket mind az akut, mind a krónikus hepatitiszben szenvedő betegek vérében, mind a betegeknél, akik betegek voltak és felépültek, és gyakran az antitestek a vérben csak néhány hónappal a betegség klinikai képének megjelenése után jelennek meg, ami nehezíti a diagnózist. A HCV kimutatása a vérben PCR-rel informatívabb diagnosztikai módszer. A HCV RNS kimutatása PCR-rel virémiát jelez, lehetővé teszi a vírus replikációjának megítélését a szervezetben, és az antivirális terápia hatékonyságának egyik kritériumaként szolgál. A HCV RNS kimutatása PCR-rel a vírusfertőzés korai szakaszában, szerológiai markerek teljes hiányában, a fertőzés legkorábbi bizonyítékaként szolgálhat. Azonban a HCV RNS izolált kimutatása más szerológiai markerek teljes hiányában nem zárhatja ki teljesen a téves pozitív PCR-eredményt. Ilyen esetekben átfogó klinikai, biokémiai és morfológiai vizsgálatok értékelése szükséges, a fertőzés jelenlétének ismételt PCR-rel történő megerősítésével.

A PCR-módszer alkalmazása krónikus vírusos hepatitis C-ben szenvedő betegeknél nagy jelentőséggel bír, mivel legtöbbjüknél hiányzik az összefüggés a vírusreplikáció jelenléte és a májenzimek aktivitása között. Ilyen esetekben csak a PCR teszi lehetővé a vírusreplikáció jelenlétének megítélését, különösen, ha a végeredmény kvantitatívan fejeződik ki. A betegség legtöbb esetben a HCV RNS eltűnése a vérszérumból később következik be, mint a májenzimek normalizálódása, így normalizálódásuk nem szolgálhat alapul a vírusellenes kezelés leállításához.

Gyakorlatilag fontos, hogy ne csak a vérszérumot, hanem a limfocitákat és a hepatobiopsziás mintákat is PCR módszerrel vizsgáljuk a HCV RNS kimutatása érdekében. A vírusok 2-3-szor gyakrabban mutathatók ki a májszövetben, mint a vérszérumban. A HCV RNS vérszérum-tesztjének eredményeinek értékelésekor nem szabad elfelejteni, hogy a virémia (valamint az enzimaktivitás változásai) ingadozó lehet. Ezért pozitív PCR-teszteredmény után negatív eredményt kaphatunk, és fordítva. Ilyen esetekben jobb a hepatobiopsziás mintákat megvizsgálni a felmerülő kétségek eloszlatása érdekében.

A HCV RNS PCR-rel történő kimutatását az anyagban a következő célokra használják:

• a kétes szerológiai teszteredmények megoldása;
• a vírusos hepatitis C megkülönböztetése más hepatitisz formáktól;
• a betegség akut stádiumának azonosítása a korábbi fertőzéshez vagy érintkezéshez képest; a HCV-szeropzitív anyák újszülöttjeinek fertőzési stádiumának meghatározása;
• az antivirális kezelés hatékonyságának monitorozása.

Vírusos hepatitis C gyanúja esetén:

• adományozók;
• kockázati tényezőkkel rendelkező személyek;
• emelkedett ALT-aktivitású egyének;
• akut hepatitiszben szenvedő betegek

A HCV PCR-rel történő diagnosztizálásának eredményeinek és megközelítéseinek fent említett jellemzői más fertőzésekre is vonatkoznak.

A PCR módszer nemcsak a HCV RNS kimutatását teszi lehetővé a vizsgált anyagban, hanem a genotípusának meghatározását is. A vírus genotípusának meghatározása nagy jelentőséggel bír a krónikus vírusos hepatitis C-ben szenvedő betegek kiválasztásában az interferon-alfával és ribavirinnel történő kezeléshez. A krónikus vírusos hepatitis C interferon-alfával történő kezelésének laboratóriumi indikációi a következők:

• fokozott transzamináz aktivitás;
• a HCV RNS jelenléte a vérben;
• HCV 1-es genotípus;
• magas virémia a vérben (több mint 8×105 ^kópia /ml).

Jelenleg PCR módszerrel kvantitatívan meghatározható a HCV RNS-tartalma a vérszérumban, ami nagy jelentőséggel bír az interferon alfa-kezelés monitorozása szempontjából. A virémia szintjét a következőképpen értékelik: 102 ^és 104 ^kópia /ml közötti HCV RNS-tartalom esetén - gyenge; ¹⁰⁵ és 107 ^kópia /ml között - átlagos, 108 ^kópia /ml felett - magas. Hatékony kezeléssel a virémia szintje csökken.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]