Hepatitis A vírus

A vírusos hepatitisz A egy olyan humán fertőző betegség, amelyet a túlsúlyos májkárosodás jellemez és klinikailag mérgezést és sárgaságot mutat. A hepatitis A vírust 1973-ban S. Feinstone (és mások) detektálta az immun-elektronmikroszkópos módszerrel és a majmok - csimpánzok és marmózerek fertőzésével. Az immun-elektronmikroszkópos módszer lényege, hogy specifikus antitesteket (szivárványos szérumot) adnak a hepatitis A beteg páciensének szűréséhez, és a csapadékot elektronmikroszkópos vizsgálatnak vetik alá. A vírusok specifikus antitestekkel való kölcsönhatása miatt specifikus aggregációt végeznek. Ebben az esetben könnyebben észlelhetők, és az antitestek hatására történő aggregáció megerősíti a kórokozó specifitását. Az S. Feinstone felfedezését az önkéntesek kísérletei igazolták.

A Hepatitis A vírus gömb alakú, a virion átmérője 27 nm. A genomot egyszálú pozitív RNS képviseli, amelynek tömege 2,6 MD. A Supercapsid nincs jelen. A szimmetria típusa a köbös icosahedron. A kapszid 32 kapszomerrel rendelkezik, négy polipeptidből (VP1-VP4). Tulajdonságai alapján a hepatitisz A vírus a Heparnovirus nemzetséghez, a Picornavirida családhoz tartozik. Antigén módon a hepatitis A vírus (HAV - hepatitis A vírus) homogén. A HAV szorzóvá válik a csimpánzok, a páviánok, a hamadriók és a szerencsejáték majmok (marmosets) testében. Hosszú ideig a vírus nem tudott művelni. Csak az 1980-as években. Lehetséges olyan sejtkultúrák előállítása, amelyekben a HAV propagál. Kezdetben erre a célra használják, immortalizált embrionális vese sejtvonal rhesus makákó (kultúra FRhK-4), és most - átültetett vese sejtvonal zöld majom (Kultúra 4647).

Az ajánlások szerint a WHO szakértők, elfogadta az alábbi nómenklatúra a hepatitis A vírus markerek: hepatitis A vírus - a Nau antitestek a hepatitis A vírus: anti-HAV IgM és az anti-HAV-IgG.

A HAV kisméretű részecskék, amelyek átmérője 27-30 nm, ikozaéder szimmetriával és homogenitással bírnak. Az immun aggregáció módszerével kapott elektrondiffrakciós mintázattal elektródsűrű részecskéket találunk felületesen elhelyezkedő, szimmetrikusan elrendezett kapszomerekkel. Negatív kontraszt esetén mind a teljes, mind az üres részecskéket észlelik a készítményekben. A nukleokapszid NAV, ellentétben az influenzavírussal, nem rendelkezik felületi kiemelkedésekkel és membránokkal. Az is fontos, hogy a virion HAV-nak nincs szív alakú szerkezete.

Szerint a fizikai-kémiai tulajdonságai hepatitis A vírus rokonságban áll a család Picomaviridae, nemzetség enterovírus atomi száma 72. Ez azonban taxonómia túl szokatlan, és aki megtalálta lehet hagyni a terminológia „a hepatitis A vírus”.

Mint a Picornaviridae család összes vírusa, a hepatitisz A vírus ribonukleinsavat tartalmaz. Egyes laboratóriumok kimutatták a hepatitis A vírus genomjának klónozásának lehetőségét, ami megnyitja az oltóanyag-készítmények megszerzésének lehetőségét.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],

A hepatitis A vírus rezisztenciája

A vírus viszonylag ellenáll a magas hőmérsékletnek, savaknak, zsíroldószereknek (nincsenek lipidek), fertőtlenítőszerek, alacsony hőmérsékleti hőmérsékletet is képes tolerálni. Mindez hozzájárul a hosszú távú megőrzéshez a külső környezetben. Szobahőmérsékleten több héten át fennmarad, 60 ° C-on részlegesen elveszíti a fertőzőképességet 4-12 óra elteltével, teljesen - néhány perc múlva 85 ° C-on. Nagyon ellenáll a klórnak, aminek köszönhetően behatol a csapvízbe a víztisztító berendezések korlátain keresztül.

Összegezve az összes adatot, a következőképpen jellemezhetjük a hepatitis A vírust:

• a természetes mester ember;
• kísérleti állatok - marmozet, csimpánz;
• fertőzés forrása - széklet;
• járvány - járvány és endémiás;
• az átviteli út fekvő-orális;
• inkubációs időtartam - 14-40 nap;
• átmenet a krónikus hepatitiszre - nem vették észre.

A NAV immunológiai tulajdonságai a következők:

• Prototípus törzsek - Ms-1, CR-326, GVG. Mindegyik immunológiailag hasonló vagy azonos;
• Az antitestek - IgM és IgG, a vírus szerkezeti fehérjéinek bevezetésével reagálva keletkeznek és védelmet nyújtanak;
• I A humán szérum y-globulin trofikus hatása - a fertőzést megelőzően vagy az inkubációs időszak alatt védett vagy enyhíti a betegséget.

A NAU fizikai-kémiai jellemzői a következők:

• A morfológia nem héjú, gömbszimmetriájú gömb alakú részecske, a kapszid 32 kapszomerből áll;
• Az átmérő 27-30 nm;
• A CsCl sűrűsége (g / cm3) 1,38-1,46 (nyitott részecskék), 1,33-1,34 (érett virion), 1,29-1,31 (éretlen virionok, üres részecskék);
• A szedimentációs együttható 156-160 érett virion;
• Nukleinsav - egyszálú, lineáris RNS;
• Relatív molekulatömeg - 2,25 106-2,8 106KD;
• A nukleotidok száma 6,500-8,100.

A fizikai-kémiai hatások NAV stabilitása a következő:

• Kloroform, éter - stabil;
• Klór, 0,5-1,5 mg / l, 5 ° C, 15 perc - részleges inaktiválás;
• Kloramin, 1 g / l, 20 ° C, 15 perc - teljes inaktiválás;
• Formalin, 1: 4000, 35-37 ° C, 72 óra - teljes inaktiválás, 1: 350, 20 ° C, 60 perc - részleges inaktiválás.

Hőmérséklet:

• 20-70 ° C - stabil;
• 56 ° C, 30 perc - stabil;
• 60 ° C, 12 óra - részleges inaktiválás;
• 85 ° C, 1 perc - teljes inaktiválás;
• Autoclaving, 120 ° C 20 perc - teljes inaktiválás;
• Száraz hő, 180 ° C, 1 óra - teljes inaktiválás;
• UV, 1,1 W, 1 perc - teljes inaktiválás.

A bemutatott adatok azt mutatják, hogy a hepatitis A vírus fizikai-kémiai tulajdonságai az enterovírusokhoz legközelebb esnek. Az egyéb enterovírusokhoz hasonlóan a HAV számos fertőtlenítő oldattal szemben ellenálló, teljesen percig 85 ° C-on inaktiválva és autoklávban.

Bebizonyosodott, hogy a hepatitisz A vírus reprodukálható az emberi és majom sejtek primer és transzplantált egyrétegű tenyésztési vonalain. A hepatitis A vírus in vitro tenyészetekben különösen aktív reprodukcióját figyelték meg, amikor kiindulási anyagként alkalmazták a majombetegek májkivonatait. Azonban, meg kell jegyezni, hogy az összes kísérletben szerinti reprodukciója a hepatitis A vírus in vitro tenyészetekben megjegyezni hosszú inkubációs időszak elsődleges átjárók (-10 4 hét), ezt követően felhalmozódása virális genetikai anyag növekszik, de az abszolút értékek nagyon ami számos kutató számára indokolja, hogy beszéljen a hepatitis A vírus nem szövődményes replikációjáról szövettenyészetekben.

Összefoglalva a hepatitisz A vírus reprodukciójával foglalkozó szakirodalmi adatokat nem cuneiform tenyészetekben, elmondható, hogy az in vitro HAV hosszú távú tapasztalata kétségtelen. A stabil magas szintű vírusreplikáció optimális feltételeit végül nem azonosították, ami korlátozza a biológiai tulajdonságainak tanulmányozását, a reagensek forrását a diagnosztika előállításához és az oltóanyagok tervezéséhez.

Ugyanakkor a szakirodalomban optimistább megítélések merülnek fel e problémával kapcsolatban. A hepatitisz A vírus termesztésével kapcsolatos valamennyi kérdés megoldása a közeljövőben van. Amikor tanulmányozása az optimális körülmények HAV szaporítása sejttenyészetben embrionális vese rhesus majmokon végzett két fázis: a fázis a fertőző vírus termelés (maximum 6-8 napon át az 5. átjáró) és a fázis intenzív felhalmozódása a vírus antigén. Azt is kimutatták, hogy a vírusantigén legjelentősebb felhalmozódása az úgynevezett hengeres tenyésztés (forgó palackok) körülményei között történik. Így széleskörű lehetőségeket nyit meg kulturális antigén nagy mennyiségben történő előállítására, következésképp megjelenik egy kiindulási anyag a diagnosztikai rendszerek előállításához és vakcinakészítmények előállításához.

A hepatitis A epidemiológiája

A hepatitis A vírus magas patogenitást mutat az embernél. A WHO (1987) következtetése szerint a betegség kialakulásához elegendő egyetlen virion fertőzés. A gyakorlati fertőző dózis azonban valószínűleg sokkal magasabb. A fertőzés forrása csak fertőzött személy. A vírus nagy mennyiségben szabadul fel a székletben 12-14 nappal a sárgaság megjelenése előtt és 3 héten belül. Icteric period. A kórokozó izolálásában szignifikáns különbségeket nem észleltek icterus, sárgaság és tünetmentes hepatitisz-betegek esetében. A fertőzés módszere széklet-orális, elsősorban vizes, valamint háztartási és étkezési útvonalak. A fertőzés módszere széklet-orális, elsősorban vizes, valamint háztartási és étkezési útvonalak. A vírus átvitelének fő (primer) útja a víz. Lehetőség van a fertőzésre is. A lakosság érzékenysége univerzális. Leginkább a 14 év alatti gyermekek vannak betegek. A betegség súlyos őszi-téli szezonalitást mutat.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

A hepatitis A tünetei

A lappangási idő ideje 15 50 napig, attól függően, hogy a méret a dózis fertőző vírus, de átlagosan 28-30 napig. Miután a szervezetben, a hepatitis A vírus replikálódik a regionális nyirokcsomók, a vérbe, majd a májsejtekben, és okoz diffúz akut hepatitisz, hogy kíséri elváltozások a máj hepatociták és retikuloendoteliális sejtek és csökkentik a méregtelenítő és a barrier funkciókat. A hepatocyták károsodása nem a vírus közvetlen hatása miatt következik be, hanem immunopatológiai mechanizmusok következtében. A legjellemzőbb képet a hepatitis A jelentése akut ikterikus ciklikus forma: Az inkubációs periódus prodromalis (preicteric), sárgaság és a lábadozás időszakban. Azonban a fertőzési gócok feltárja nagy számú beteg tünetmentes és anicteric formái fertőzés, amelyek száma nagyobb jelentőséggel bír ikterikus ( „jéghegy jelenség”).

A fertőzés utáni immunitás erős és tartós, amit vírusos semlegesítő antitestek és immun memória sejtek okoznak.

A hepatitis A mikrobiológiai diagnózisa

Diagnózis a hepatitis A (kivéve fertőzés állatok - csimpánzok marmozet, babuinok, amit mi) alapján különböző immunológiai módszerekkel: DGC immunfluoreszcens módszerrel, hemagglutinációs immun adhéziós (komplex a virális antigén + antitest a komplement jelenlétében adszorbeált eritrocitákat és okoz azok adhézió) . Azonban, a alkalmazhatóságát e módszerek korlátozott hiánya miatt a specifikus virális antigének és immunfluoreszcens reakciót igényel a máj biopszia, ami nem kívánatos. Megbízható és specifikus az immunmikroszkópos módszer, de nagyon nehézkes. Ezért, amíg az egyetlen elfogadható módszer a immunológiai reakció immunosorbent assay szilárd fázis formájában IPM, vagy a RIM, különösen a módosítás a „capture” immunglobulin M. Hazánkban erre a célra javasolt vizsgálati rendszer - „DIAG-A-GEO”. A tesztrendszer működési elve a következő. A falakon polisztirol lunochek szorbeálódik első antitestek immunglobulinok M osztályú (antiimmunoglobuliny M) adunk hozzá, hogy a vizsgált beteg szérumában. Ha van ellenanyag-osztályba IgM, akkor kötődését ellenanyag-Ti-M, majd hozzáadjuk egy adott virális antigén (hepatitis A vírus), amelyet úgy kapunk, növekszik sejttenyészetben. A rendszert mossák, és hozzáadásra kerülnek a tormaperoxidázzal jelzett vírusellenes antitestek. Ha a rendszer mind a négy komponense kölcsönhatásba lép, egy négyrétegű "szendvics" keletkezik:

• antiimmunoglobulinok M,
• immunglobulinok M (hepatitis A vírus ellen - a beteg tesztszérumában),
• vírus antigén,
• antivirális antitestek enzimmel jelöltek.

Ennek a komplexnek a detektálására az enzim szubsztrátját adjuk a lunettesekhez. Az enzim hatására megsemmisül, és színes termék képződik. A szín intenzitása spektrofotométer vagy fotokoloriméter segítségével kvantitatív módon mérhető.

Az IgM "capture" eljárásának előnye, hogy az immunglobulinok ebbe az osztályába tartozó antitestek az elsődleges immunválaszon jelennek meg, és jelzik a fertőzés aktív szakaszát, és eltűnnek az átvitt betegség után . Az IgG osztályba tartozó vírusellenes antitestek azonban a betegség után hosszú ideig fennmaradnak, és a megszerzett immunitást biztosítják. A hepatitisz A vírus kimutatására DNS-próbát javasolnak: szondánként komplementer vRNS-próbát alkalmazunk.

A hepatitis A kezelése

Mivel a vírusos hepatitisben az interferon termelés megzavarodik, a hepatitis A kezelése az interferon és az endogén szintézis-amoxin induktorán alapul.

A hepatitis A specifikus megelőzése

Korábban széles körben alkalmazzák seroprevention hepatitis A használó gamma-globulin nem volt indokolt, azonban a hangsúlyt kapott a gazdaságban immunizálás végzett vakcinálás hepatitis A ellen. E célból az oltóanyagok különböző változatait fejlesztik és már használják. Oroszországban a hepatitis A ellen hathatós vakcinát kaptak 1995-ben, és mostantól sikeresen alkalmazták.