Idegi őssejtek

Kísérleti bizonyítékok a lehetőségét regenerálódását CNS sejteket nyertünk sokkal korábban felfedezése embrionális őssejt kutatás, amely azt mutatta, a jelenléte a neokortex, a hippocampusban és a bulbus olfactorius az agysejtek felnőtt patkányok, izgalmas 3H-timidin, azaz, a képesség, hogy szintetizáló fehérje és az osztás. Vissza a 60-as a múlt század azt feltételezték, hogy ezek a sejtek prekurzorok neuronok és közvetlenül részt vesznek a tanulás és a memória. Valamivel később jelenlétét mutatta ki a szinapszisok képződött de novo az idegsejtek és az első munka használatát embrionális őssejtek indukálására neyronogeneza in vitro. Végén a XX század kísérletek az irányított differenciálódását gszt idegi progenitor sejtek, dopaminerg és a szerotonerg neuronok felülvizsgálatához vezetett a klasszikus fogalmak a képességét, az idegsejtek emlősök regenerálódását. Számos tanulmány kimutatta, meggyőzően hogyan valóság rekonstrukciók neuronhálózatok és a rendelkezésre álló neyronogeneza egész időtartama alatt a szülés utáni emlős szervezetben.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Idegi őssejtek forrása

Idegi őssejtek izolált műveletek során a szubventrikuláris régióban az oldalsó agykamrák és a dentate gyrus a hippocampus, ami a kultúra sejtek alkotnak neuorsphere (neurális gömbök), és miután diszpergáló és preformirovaniya a múltban - az összes fő celluláris CNS típusok vagy, egy különleges környezetben, az új mikrogömbök. A szuszpenziós tenyészeteket disszociált szövet izolált magzati agyi metszeteket periventrikuláris is felmerülnek neuorsphere.

Markers éretlen agyi sejtek nestin, béta-tubulin III (neuronális marker vonal), vimentin, GFAP és NCAM, immunciiokémiás azonosítására monoklonális antitesteket használunk. A Nestin (IV típusú neurofilamentek fehérje) multipotens neuroektodermáiis sejteket expresszál. Ezt a fehérjét használtuk az azonosítására és izolálására a multipotens CNS neuroepiteliális progenitor sejtek monoklonális antitestekkel Patkány-401, amely képes érzékelni akár 95% -a a sejtek a velőcső patkány embriókból a tizenegyedik napon a terhesség. Nestin nem expresszálódik a differenciált utódaiban idegrendszeri őssejtek, de jelen van a korai neurális progenitor sejtek, poszt-mitotikus neuronok és a korai neuroblasztokra. Ezzel a marker azonosított neuroepteliális progenitor sejtek és létezését bizonyította őssejtek a központi idegrendszerben. A vimentin (közbenső neurofilament protein típusú III) fejez ki ideg- és glia kletkami- prekurzorok, valamint a neuronok, a fibroblasztok és a sima izom sejteket. Következésképpen mind az immuncitokémiai markereknek nincsen specifikusságuk az idegi szár és a progenitor sejtek különálló azonosításához. A béta-III tubulin létre neuronális lineage őssejtek, míg a I. Típusú asztrocitákat által azonosított expressziója GFAP, és oligodendrociták specifikusan expresszálódnak galaktocerebrozid (Ga! C).

Mitogén a neurális progenitor sejtek FGF-2 és EGF, támogatják a progenitor sejtek szaporodásának a tenyészetben a kialakulását neuorsphere. Osztódó neurális őssejtek aránya növekszik jelentősen befolyásolja FGF2, és kombinációja segítségével FGF2 + EGF. Az FGF2 proliferatív hatásait FGF2-R1 receptorok közvetítik. Heparin növeli a affinitása a receptor kötődését FGF2 és drasztikusan fokozzák a mitogén hatást neuroepiteliális sejtek. A kezdeti szakaszban az embriogenezis FGF2 kifejezett receptorok patkány telencephalonban, későbbi szakaszaiban a lokalizációs korlátozott ventrikuláris zónában. Expressziójának csúcsa FGF2-R1 poszt-mitotikus sejtek végén megfigyelhető az időszak korai neurogenezis. A kezdeti fejlődési időszakban telencephalonra jellemző az alacsony expressziója EGF receptor, főként olyan sejtekben a ventrális régióban. Az embriogenezis későbbi szakaszaiban az EGF-R kifejeződése dorsalis irányba nő. A rágcsáló agyban nagy affinitást mutat az EGF receptor transzformáló növekedési faktor béta (TGF-béta-R), és amelyek előnyösen kötődik. Közvetve, a funkcionális szerepe a EGF-R jelzik adatok kortikális dysgenesis előagy felmerülő késői embriogenezis és posztnatális egyedfejlődés, a funkció csökkenti előagy, agykéregben és ectopia halálát hippokampális sejtek knockout egerek EGF receptor gént. Továbbá, a kialakulását neuorsphere elengedhetetlen jelenléte a tápközegben TGF-a. Eltávolítása után a növekedési faktorok a kondicionált sejtek közegéből nem osztódik, és mennek keresztül spontán differenciálódás alkotnak neuronok, asztrociták és oligodendroblastov.

Tekintettel erre, a őssejt újraaggregálódás disszociált neuorsphere és a tenyésztést végezzük tartalmazó tenyésztőközegben EGF és bázikus FGF-et vagy FGF-2, de anélkül, hogy kívül a szérum. Az eredmények azt mutatják, hogy az EGF szaporodását indukálja őssejtek subependimnoy zónát az oldalsó agykamrák, és a bázikus FGF elősegíti proliferációját őssejtek a striatum, hippocampus, neocortex és a látóideg egy érett agyban. A kombináció az EGF és bázikus FGF elengedhetetlen az aktív proliferáció őssejtek izoláljuk a ependimális harmadik és negyedik kamrák a előagy és a gerinccsatorna az ágyéki és mellkasi gerincvelő.

Miután szuszpenziót disszociációja neurális őssejtek tenyésztjük műanyag edények vagy több lyukú lemezekre ragasztó nélkül szubsztrát méretének növelése új neuorsphere képződik, amely általában körülbelül 3 hét. Módszer több diszperziót és reprodukciós neuorsphere lehetővé teszi, hogy megfelelő mértékének eléréséhez így lineáris klónok multipotenciális őssejtek intracerebrális oltása. Ez az elv az emberi embrionális agyból izolált őssejt-bank kialakításán alapul. A hosszú távú (több éves) klónozása lehetővé teszi olyan stabil vonalak idegrendszeri őssejtek, ahonnan katekolaminerg neuronok során képződnek indukált differenciálódása.

Ha neuorsphere nem diszpergált és neveltük ragasztó szubsztrátok a nélküli tápközegben növekedési faktorok, proliferáló őssejtek kezdenek spontán különbséget képez neuronális prekurzor sejtek és gliasejtek a markereinek expresszióját minden típusú idegsejtek: MAP2, Tau-1, NSE, NeuN, béta tubulin III (neuronok), GFAP (asztrociták) és Calc, 04 (oligodendrociták). Ezzel szemben, a tenyészetek a neurális őssejtek aránya a neuronok, hogy több mint 40% a differenciálódott sejtek (rágcsálókban - 1-5%) sejtek egerekben és patkányokban, de sokkal kisebb az oligodendrociták, ami nagyon fontos a sejtek terápiás szempontból demielinizációs betegségek. A feladatot úgy oldjuk meg a tenyésztő tápközeget adtunk, B104, amely serkenti képződését mielinprodutsiruyuschih sejtek.

Amikor tenyésztett neurális progenitor csontvelői sejtek emberi embriók tartalmazó tápközegben EGF, bázikus FGF és a LIF, a sorok száma a neurális progenitor sejtek növekedését 10 millió alkalommal. In vitro szaporított sejtek megtartják azt a képességüket, hogy vándorolnak és differenciálódnak neurális és gliális elemek transzplantációt követően az agyba felnőtt patkányok. Azonban in vivo a multipotens progenitor sejtek osztódási száma korlátozott. Ismételten jegyezni, hogy a Hayflick határ „felnőtt” neurális őssejt (körülbelül 50 mitózis), mégis elérhetetlen még a kísérletben - a sejtek formájában neuorsphere megtartják tulajdonságait csak 7 hónap és csak 8 részeket. Úgy véljük, hogy ennek oka, hogy a funkciók eljárások azok diszperziós során passzálása (tripszinezéssel vagy mechanikus hatás), ami drasztikusan csökkenti a proliferatív aktivitást a sejtek miatt károsodott intercelluláris kapcsolatok. Valójában, ha a neurogömbök 4 részre való elosztására szolgáló módszer diszpergálását alkalmazzuk, akkor a sejtek életképessége jelentősen megnő. Ez a technika 300 napig lehetővé teszi az emberi idegi őssejtek termesztését. Azonban, ezen időszakot követően a sejtek elveszítik a mitotikus aktivitását és mennek keresztül degeneráció vagy lépjen a spontán differenciálódás alkotnak neuronokban és asztrocitákban. Ennek alapján a szerző úgy ítéli meg, hogy a 30 mitózis a tenyésztett idegi őssejtek osztódásának korlátozó száma.

A humán idegi őssejtek in vitro tenyésztése során elsősorban GABA-gerinc-idegsejtek képződnek. Létrehozása nélkül különleges körülmények között, neurális progenitor sejtek ad okot a dopaminerg neuronok (szükséges sejtterápiája Parkinson-kór) csak az első részeket, amely után az összes neuronok tenyészetében állhat kizárólag GABAerg sejtek. Rágcsálók esetében a indukcióját dopaminerg neuronok in vitro indukálják az IL-1 és IL-11, valamint a fragmensek az idegsejt membránok, a LIF és GDNF. Ez a módszer azonban sikertelen volt egy ember számára. Azonban, amikor a intracerebrális transzplantációja GABA-erg neuronok in vivo hatása alatt a mikrokörnyezet tényezők merülnek fel az idegsejteket különböző fenotípusú mediátor.

Keresés neurotróf faktorok kombinációi azt mutatták, hogy FGF-2 és az IL-1 indukálja dopaminerg neuroblasztokra, amely azonban, amelyek nem képesek előállítani a dopaminerg neuronok. Differenciálódása őssejtek hippokampális glutamáterg serkentő és gátló GABAerg neuronok befolyásolja neurotrofinok, egy EGF és IGF1-képződést indukálni glutamáterg és GABAerg neuronok a neurális progenitor sejtek a humán embriók. Szekvenciális retinsav hozzáadása kultúra és neurotrofin 3 (NT-3) jelentősen növeli a differenciálódását őssejtek a hippocampus érett agy neuronok különböző közvetítő jellegű, míg a kombinációja segítségével agyi eredetű neurotrofikus faktor (BNDF), NT-3 és GDNF tenyészeteiben hippokampális és neokortikális hozzáférhető piramissejtekben.

Így a Számos tanulmány eredményei azt mutatják, hogy, először is, az őssejtek a különböző agyi struktúrák hatása alatt a különleges helyi szöveti faktorok képesek differenciálódni in vivo a neuronális fenotípusok kötnie az ilyen struktúrákat. Második célja indukált differenciálódása neurális őssejtek in vitro klónozási progenitor sejtek lehetőséget ad a megszerzése neuronális és glia sejtek kívánt fenotípusos jellemzőket intracerebrális transzplantáció különböző formái agyi patológiát.

Nem kétséges, hogy a pluripotens őssejtek származó embriók vagy kifejlett központi idegrendszerben, lehet tekinteni, mint a forrás az új neuronok és használt a klinikán a neurológiai rendellenességek kezelésére. Azonban a fő akadálya, hogy a fejlesztés gyakorlati sejt Neurotransplantation az a tény, hogy a többség a neurális őssejtek nem tesznek különbséget a neuronok a beültetés után a nonneural érett CNS területen. A megkerülve ezt az akadályt, akkor javasolt egy nagyon eredeti, innovatív technika, amely lehetővé teszi, hogy az in vitro, így tiszta lakossága neuronokat a magzati idegrendszeri őssejtek transzplantáció után a CNS felnőtt patkányok. A szerzők azt állítják, hogy a differenciálódás a beültetett sejtek ezzel az eljárással képződését eredményezi a kolinerg neuronális fenotípus, hatása miatt a körülvevő mikrokörnyezet tényezők. A javasolt technológia érdeklődés szempontjából az új terápiák kifejlesztésére alapuló őssejtek és cserélje ki a sérült miatt trauma vagy neurodegeneratív betegségek neuronok kolinerg neuronok vezető szerepet játszanak a fejlesztés a motoros funkciók, a memória funkció és a tanulás. Különösen, kolinerg neuronok származó emberi embrionális őssejtek lehet használni a csere a motoros neuronok elveszett amiotrófiás laterális szklerózis vagy a gerincvelő sérülés. Jelenleg nincs információ arról, hogy miként fejlesztések jelentős mennyiségű kolinerg neuronok a lakosság előre őssejt mitogén. A szerzők egy meglehetősen egyszerű, de hatékony módja a serkentő mitogén előformázott, primer embrionális neurális őssejtek a fejlődési irány, gyakorlatilag tiszta neuronok a beültetés után a nonneural és neurogén CNS felnőtt patkányokban zónában. A legfontosabb eredménye, hogy a munka az átalakítás egy kellően nagy számú átültetett sejtek kolinerg neuronok beültetve átlagos membrán és a gerincvelő.

Továbbá, a kialakíthatjuk neurális őssejt agy 8-hetes humán embrió holiyergicheskie neuronok in vitro agykérgi azt javasolta, hogy használják különböző kombinációi a következő trofikus faktorok és vegyszerek: rekombináns bázisos FGF, EGF, LIF, amino-terminális hang peptid egér (Shh-N ), transz-retinsav, NGF, BDNF, NT-3, NT-4, a természetes egér laminin és a heparin. A kezdeti vonal humán neurális őssejtek (K048) tartottuk fenn in vitro két évig, és ellenállt a 85 részeket változatlan proliferatív és differenciálódási tulajdonságokat megőrző normál diploid kariotípus. Diszpergálatlan neuorsphere 19-55 második járatok (38-52 hetes-e) ültetett poli-D-lizin és a laminin, majd beadagoljuk a fenti tényezők különböző koncentrációkban, kombinációk és szekvenciák. Egy kombináció, amely egy bázikus FGF, a heparin és a laminin (rövidítése FHL), adott egyedi hatást. Egy nap elteltével az embrió tenyésztését neurális őssejtek közegben vagy anélkül FHL Shh-N (kombinációs Shh-N + FHL in rövidítése SFHL) megfigyelt gyors reprodukciós fő sík sejtek. Minden más idő protokoll (pl, mint például bázikus FGF + laminin), fordítva, vezettek, meghatározott sugárirányú terjedésének orsó alakú sejtek, és ezek a sejtek nem hagyott a mag neuorsphere. 6 nap múlva az aktiválás és az azt követő tíz-differenciálódás tartalmazó tápközegben B27, szélén FHL-aktivált gömbök polipolyarnye nagy neuron-szerű sejtet találtunk. A másik protokoll, a legtöbb csoport neuron sejtek kicsik voltak és bipoláris vagy unipoláris. Immuncitokémiai elemzése azt mutatta, hogy a kis (<20 mikron) bipoláris vagy Monopolar sejteket vagy GABA-erg, vagy glutamáterg mivel a legtöbb nagy polipolyarnyh sejtek szélén található FHL-aktivált neuorsphere bizonyult kolinerg kifejezett markerek jellemző a kolinerg neuronok (Islet-1 és a ChAT). Néhány ilyen neuronok ugyanakkor kifejezett szinapszin 1. Ennek eredményeként öt egymástól független kísérletek, a szerzők azt találták, hogy a teljes lakosság a sejtek egyes területek 45,5% differenciálódott neuronok TuJl +, míg a kolinerg (ChAT ^) neuronok csak 27,8 % a sejtek ugyanazon népesség. Ezután további 10 napos differenciálódás in vitro, továbbá a kolinerg neuronok a FHL-aktivált neuorsphere voltak jelentős mennyiségű kis neuronok - glutamáterg (6,3%), a GABA-erg (11,3%), és az asztrocita (35,2% ) és nestinpozitivnyh sejteket (18,9%). Ha más növekedési faktorok kombinációira kolinerg neuronok hiányoznak, és a határ kialakult sejtek neuorsphere vagy asztrociták, vagy kisebb glutamáterg és a GABA-erg neuronok. Monitoring mentés és aktív potenciál whole-cell patch clamp technika kimutatta, hogy hét nap múlva FHL-aktiváló polipolyarnyh nagy sejtek túlnyomó többsége nyugalmi potenciál alkotó -29,0 ± 2,0 mV, ennek hiányában az akciós potenciál. 2 hét múlva a maradék potenciál emelkedik -63,6 ± 3,0 mV, amely akciós potenciálok figyelhetők idején indukciós depolarizáló áramok és 1 M tetrodotoxin blokkolt, jelezve, hogy a funkcionális aktivitását éretlen kolinerg neuronok.

Továbbá, a szerzők azt találták, hogy a FHL- önmagában vagy SFHL- aktivációs in vitro nem eredményez az érett neuronok, és megpróbálta megállapítani, hogy képes előformázott keresztül FHL SFHL vagy őssejtek differenciálódnak kolinerg neuronok, amikor átültetett érett patkány központi idegrendszerben. Ehhez injektálása aktivált sejtek neurogén régióban végeztünk (hippocampus) és nonneural néhány területen, például a rész prefrontális kéregben átlagos membrán és gerincvelő felnőtt patkányok. A beültetett sejtek követését a CAO - ^ p vektor segítségével végeztük. Ismeretes, hogy az OCD-címkék egyidejűleg mind ultrastruktúrája sejtek és celluláris folyamatok (molekuláris szinten), szivárgás nélkül, és alkalmasak a közvetlen megjelenítés. Továbbá, OPP-jelzett neurális őssejtek támogatják neuronális profil és glia differenciálódás azonos profil nem transzformált embrionális őssejtek az agy.

Egy vagy két héttel a beültetés után 5 x 10 ⁴ aktivált és címkézett neurális őssejtek találtak a gerincvelőben és az agyban a patkányok, a ROC + sejtek főleg közelében a beadás helyén. A migráció és az integráció folyamatait már egy hónappal a transzplantáció után figyelték meg. Migrációs tartomány változhat attól függően, hogy az injekció helyén: a bevezető szakasz a prefrontális kéregben OCD + sejteket található a 0,4-2 mm-re az injekció beadásának helyén, esetén az implantáció középre membrán, hippocampus, vagy a gerincvelő vándorolt sejtek sokkal nagyobb távolság -. 1-2 cm-es graftolt sejteket lokalizálódik a központi idegrendszerben igen szerkezetek, beleértve a frontális kéregben, az átlagos membránon, a hippocampusban és a gerincvelő. OCD-vel jelzett neuronális elemek már látható az 1. Héten a transzplantáció után, míg számuk jelentősen nőtt 1 hónap után a műtét után. Sztereológiai elemzés azt mutatta, egy magasabb túlélési arány a beültetett sejtek a különböző agyi struktúrák, míg háti.

Ismeretes, hogy a tárolt regionális lakosságnak a őssejtek, az átalakulás érett sejtek szabályozzák specifikus szöveti tényezők a legtöbb felnőtt emlős szövetekben. Proliferációja őssejtek, differenciálódását progenitor sejtek és a kialakulása jellemző a szerkezet az agy neuronális fenotípus in vivo sokkal nagyobb mértékben expresszálódik a magzati agyban, ahogy azt a nagy koncentrációinak jelenlétében morfogén faktorok helyi mikrokörnyezetében - neurotrofinok BDNF, NGF, NT-3, NT-4/5, és a növekedés FGF-2 tényezők, TGF-a, IGF1, GNDF, PDGF.

Hol vannak a neurális őssejtek?

Azt találtuk, hogy a neurális őssejtek expresszálják gliális fibrilláris savas fehérje, amely tartalmazza az érett sejtek a neurális vonal van tárolva csak asztrociták. Ezért az érett központi idegrendszerben lévő szár tartalék lehet asztrocitasejtek. Valóban, a szaglógumó és a gyrus dentatus neuronok azonosítottunk, származó GFAP-pozitív prekurzor, ami ellentétes a hagyományos nézetek a szerepe progenitor radiális glia, GFAP nem expresszálódik a gyrus dentatus felnőttkorban. Lehetséges, hogy a központi idegrendszerben két őssejt-populáció található.

Az őssejtek lokalizációjának kérdése a subventricularis zónában még mindig tisztázatlan. Egyes szerzők szerint, ependymasejteket képeznek gömbök tenyészetben klónok, amelyek nem igazak neuorsphere (subependimy sejt-klónok), mivel csak a tudjanak differenciálódni astrocytákban. Másrészt, miután a fluoreszcens vagy virális markert címkézési ependymasejtek sejtekben volt detektálható subependimnogo réteg és szaglógumók. Az ilyen jelzett sejtek in vitro neurogömböket képeznek és differenciálnak idegsejtekbe, asztrocitákba és oligodendrocitákba. Továbbá, látható, hogy körülbelül 5% ependyma sejtek expresszálták markereket a szár - nestin, Notch-1 és Mussashi-1. Feltételezzük, hogy a mechanizmus az aszimmetrikus mitózis kapcsolatos egyenetlen eloszlása Notch-1 membrán receptor, ahol az utóbbi a membránon marad leányvállalata sejtek lokalizált a ependimális zónában, míg a szülő-sejt migráló subependimny rétegben elveszti ezt a receptort. Ebből a szempontból, subependimnuyu zóna lehet tekinteni, mint a kollektor ős neuronális prekurzorok és gliasejtek generált szár ependimális réteget. Szerint más szerzők, a kaudális szubventrikuláris zóna alakult csak gliasejtek, és a sejteket a forrása neyronogeneza rostralis-laterális Department. A harmadik változatban a laterális kamrák szubventricularis zónájának elülső és hátsó részei ekvivalens neurogén hatékonysággal rendelkeznek.

Előnyösen úgy néz ki, a negyedik kiviteli alak szervezet agytörzsi tartalékot a központi idegrendszerben, ahol a szubventrikuláris zónában három fő típusa a neurális progenitor - A, B és C. A legkorábbi sejtek neuronális markerek (PSA-NCAM, TuJl) veszi körül, és a B-sejtek, amelyeket az antigének asztrocitákként való expressziójával azonosítanak. A C-sejtek, amelyek nem rendelkeznek az idegsejtek vagy glia antigén tulajdonságaival, magas proliferatív aktivitással rendelkeznek. A szerző meggyőzően mutatja, hogy a B-sejtek a prekurzorok az A-sejtek és képződött de novo neuronok a szaglógumó. A migráció során, az A-sejteket körülvett szálak neurális progenitor sejtek, amely lényegesen különbözik a a mechanizmus a poszt-mitotikus neuroblasztokra migráció mentén radiális gliasejtek embrionális agyban. Migrációs megszűnik a szaglógumó mitotikus osztódása mind A- és B-sejtek, származékok, amelyek be vannak építve rétegek granulosa sejtek a glomeruláris rétegében a szagló területek az agyban.

A fejlődő agyban az embriók nem differenciált ependymasejtek, és a kamrák közé megszorozzuk őssejtek kamrai germenativnoy th szubventrikuláris zóna, amely vándorolnak elsődleges neuro- és glioblasztómák. Ennek alapján egyes szerzők úgy vélik, hogy a régió subependimnaya érett agyban csökken germenativnuyu embrionális idegszövet tagjai asztrociták neuroblasztokra azonosítatlan sejtek. Az igazi neurális őssejtek a sejtek kevesebb mint 1% -át teszik ki az oldalsó kamrai fal hermetikus zónájában. Részben emiatt, és azt is adatokkal összefüggésben, hogy subependimnoy zóna asztrociták neurális őssejt prekurzorok nem zárja ki annak lehetőségét, hogy asztrocitikus gliasejtek transzdifferenciálódását sejtek megszerzése neuronális fenotípusos jellemzők.

Az idegi őssejtek in vivo lokalizációjának problémájának végső megoldására vonatkozó fő akadály az ilyen sejtek specifikus markerek hiánya. Ugyanakkor nagyon érdekes, egy gyakorlati szempontból, bemutatva a jelentések, hogy a neurális őssejtek izoláltunk a központi idegrendszer osztályok, amelyek nem tartalmaznak subependimnyh zónák - a harmadik és negyedik kamrák az előagy, a gerinccsatorna háti és ágyéki gerincvelő. Különösen fontos az a tény, hogy a gerincvelő sérülés fokozott proliferációját ependimális őssejtek a központi csatorna kialakulását progenitor sejtek vándorlását, és differenciálódni asztrociták gliomezodermalnogo bendőben. Sőt, progenitor sejtek és az oligodendrociták asztrofizika talált ép gerincvelő felnőtt patkányok.

Így, irodalmi adatok erősen arra utalnak, a jelenléte a központi idegrendszer felnőtt emlősök, beleértve az embert is, a regionális szár tartalék, regeneratív és műanyag kapacitású, sajnos, képes biztosítani csak a fiziológiás regenerációs folyamatok alkotnak új neurális hálózatok, de nem felel meg az igényeinek reparatív regenerálódását. Ez felveti azt a problémát megtalálni annak a módját, hogy növeli a forrásokat a központi idegrendszer szár exogén módon, hogy nem lehet megoldani anélkül, hogy egy világos megértése mechanizmusok kialakulása a központi idegrendszer az embrionális periódus során.

Ma már tudjuk, hogy a folyamat az embrionális fejlődés, az őssejtek a velőcső sejtek forrása háromféle - neuronok, asztrociták és oligodendrociták, azaz a neuronok és neuroglia származó sejteket közös prekurzor. A differenciálódását ektoderma klaszterekbe neurális progenitor sejtek kezdődik hatása alatt proneural gének bHLH család termékek és blokkolja expressziója transzmembrán receptor fehérje származékai Notch géncsalád, hogy határérték meghatározása és a korai differenciálódását neurális progenitor sejtek. Másfelől, a Notch-receptor-ligandumok transzmembrán fehérjék Delta szomszédos cellák miatt az extracelluláris domént, amely a közvetlen sejt-sejt kapcsolatok induktív közötti kölcsönhatás őssejtek.

Az embrionális neurogenezis program további végrehajtása nem kevésbé összetett, és úgy tűnik, fajspecifikusnak kell lennie. Az eredmények azonban neyroksenotransplantatsionnyh vizsgálatok arra utalnak, hogy az őssejtek elkülöníthető evolúciós konzervativizmus, így a neurális őssejtek képesek migrálni és fejlődni, amikor átültetett a patkányagyban.

Köztudott, hogy az emlősök központi idegrendszerében nagyon alacsony kapacitás reparatív regeneráció, amelyet az jellemez, hiánya érett agyban tünetét új sejtek helyett a halott sejt eredményeként a károsodásra. Azonban a neuroblast transzplantáció esetében az utóbbi nemcsak túlél, szaporodnak és differenciálódnak, hanem képesek az agystruktúrákba integrálódni és az elveszett idegsejtek funkcionális helyettesítésére. Amikor az elkövetett neuronális progenitor sejteket transzplantálták, a terápiás hatás szignifikánsan gyengébb volt. Az ilyen sejtek alacsony migrációs kapacitást mutattak. Ezenkívül a neurális progenitor sejtek nem reprodukálják a neurális hálózatok szerkezetét, és funkcionálisan nem integrálódnak a recipiens agyába. Ennek kapcsán aktívan tanulmányozzák a reparatív-műanyag regeneráció kérdéseit a formázatlan, többszörös idegi őssejtek transzplantációjában.

A tanulmány M. Alexandrova és munkatársai (2001) az első kiviteli alakban, kísérletek voltak címzettek érett nőstény patkányok és donor 15-napos embrió fejlődését. A recipienseket eltávolított részét a nyakszirti kéreg és az üreg átültetett mechanikusan felfüggesztett valószínűsített embrionális kortikális szövetet tartalmazó multipotens őssejtek kamrai és subventricularis régió. A második kiviteli alakban, kísérleteket végeztünk a transzplantáció a neurális őssejtek 9 hetes humán magzati agy polovozrelh patkányok. A periventrikuláris területen embriók szerzők izolált agyszövet metszeteket elhelyezni a tenyésztési tápközegben, és az F-12-t kapunk ismételt pipettázással a sejtszuszpenziót, majd tenyésztjük egy speciális közegben NPBM kiegészített növekedési faktorok - FGF, EGF és az NGF. A sejteket szuszpenziós tenyészetben a kialakítása előtt a neuorsphere, amelyek diszpergált, és ismét kicsapjuk a tenyésztő. Miután 4 részeket az általános tenyésztési idő 12-16 nap, a sejteket használunk átültetésre. Recipienseket desyatisutochkye érett patkányok és két hónapos Wistar-patkányok, amelyek a régióban az oldalsó agykamra injektáltuk, 4 ul szuszpenziót humán neurális őssejtek immunszupresszió nélkül. Az eredmények azt mutatják, hogy a sejtek disszociálnak kamrai és szubventrikuláris zónájában embrionális agykéreg könyvjelző patkány allograft felnőtt agyban folyamatosan fejlődik, hogy van, tényezők differenciált recipiens mikrokörnyezetében az agy nem blokkolja a növekedését és differenciálódását neurális őssejtek az embrió. A korai időszakban a transzplantáció után multipotens sejtek továbbra osztódását és aktívan vándoroltak a terület szövet transzplantáció a recipiens agyban. Átültetett embrionális őssejtek, amelyek igen nagy jelentőségűek a migráció, már megtalálható szinte minden rétegében a kéreg a címzett csontvelő-transzplantáció végig a pályán és a fehérállomány. A hossza a migrációs útvonalat az idegsejtek mindig jelentősen kisebb (akár 680 mikron), mint a gliasejtek (3 mm-ig). Strukturális vektorok átállításának asztrocitákat erek és rostos szerkezeteket, hogy az agy is megfigyelhető volt más vizsgálatokban.

Korábban azt hitték, hogy a címkézett asztrociták felhalmozódása a recipiens agyi kéregének károsodása területén okozhatja a gliáiis gát kialakulását az oltó szövet és a recipiens között. A kompaktan elhelyezkedő sejtes graftok szerkezetének tanulmányozása azonban azt mutatta, hogy a cito-arhitektonikát véletlenszerűség jellemzi, az átültetett sejtek réteges eloszlása nélkül. Az átültetett neuronok rendelési foka megközelítette a normál agykéreg sejtjeit, ha nincs giliális gát a donor és a recipiens szövetek között. Ellenkező esetben a transzplantátum sejtjeinek szerkezete atípusos volt, és maguk a neuronok is hipertrófiát szenvedtek. Az átültetett sejtek neuronimuno-kémiai tipizálása gátló GABA-neuronokat mutatott a PARV, CALB és NPY fehérjék expressziójának kimutatására. Következésképpen az érett agyban továbbra is fennállnak a mikrokörnyezeti tényezők, amelyek támogatják a proliferációt, migrációt és az idegi multipotens sejtek specifikus differenciálódását.

A kultúra humán őssejtek izolált agy periventrikuláris 9-hetes embriók, M. Alexandrova és munkatársai (2001) a negyedik folyosón nestinpozitivnyh talált nagyszámú multipotens sejtek, amelyek közül néhány mentek differenciálódását in vitro és által kifejlesztett neuronális típusú, amely megfelelt más szerzők kutatási eredményei. A transzplantáció után az agyba felnőtt patkányok tenyésztett humán őssejtek mitotikusan osztva, és vándoroltak a szövet egy heterológ recipiens agyban. A sejt-transzplantációkban a szerzők két sejtpopulációt figyeltek meg - kicsi és nagyobb. Legutóbbi vándoroltak a parenchyma és a szálas szerkezetek az agyban a címzett kis távolság - akár 300 mikron. A leghosszabb út a migráció (3 mm-ig) volt jellemző kis sejtek, amelyek közül néhány differenciálódnak asztrociták, hogy jöttek létre monoklonális antitestek alkalmazásával GFAP. Mindkét típusú sejteket találtunk a fal az oldalsó agykamra, jelezve, hogy a kimenet a transzplantált sejtek a rostralis migrációs adatfolyam. Asztrocita eredetű neurális őssejtek mind az emberi és patkány vándorolt túlnyomórészt a vér kapillárisokban és szálas szerkezetek recipiens agy egybeesik az adatokat más szerzők.

Az emberi őssejtek in vivo differenciálódásának elemzése a GFAP, a CALB és a VIM monoklonális antitestek alkalmazásával feltárta az asztrociták és az idegsejtek képződését. A patkány graftok sejtjeivel ellentétben sok humán őssejt vimentin-pozitív volt. Következésképpen az emberi multipotens sejtek egy részét nem különböztették meg. Később ugyanezek a szerzők kimutatták, hogy az emberi idegi őssejteket ültettek alkalmazása nélkül immunszuppresszió elvégzése után a transzplantáció a patkány agy 20 napig nem észlelték a védekező agresszió a gliasejtek az érett agyban.

Azt találtuk, hogy még a neurális őssejtek Drosophila prizhivlyayutsya és mennek keresztül differenciálódását az agyban olyan távol a rovar taxon, mint egy patkány. A helyességét a szerzők a kísérlet nem kétséges: a transzgenikus Drosophila vonalak génjeit tartalmazó humán neurotróf faktorok NGF, a GDNF, BDNF, beiktatjuk a vektorba alatt Casper Drosophila: Te-sokk promoter, úgy, hogy az emlős testhőmérséklet automatikusan hívja az expressziójukat. A szerzők azonosították a Drosophila sejtek termék bakteriális galaktozidáz gént hisztokémiai X-Gal-festéssel. Sőt, kiderült, hogy a neurális őssejtek Drosophila specifikusan reagálnak a neurotrofikus faktorok, által kódolt humán gének: xenotranszplantáció sejtek a transzgénikus vonalak Drosophila tartalmazó GDNF-gént annak differenciálódó neurális őssejtek drámaian megnövekedett szintézise tirozin-hidroxiláz, valamint egy gént NGF sejtek aktívan előállított acetilkolinészteráz . Hasonló genzavisimye reakciót indukált xenograft átültetett allograft vele embrionális idegszövet.

Ez azt jelenti, hogy az idegi őssejtek specifikus differenciálódását vidon-specifikus neurotróf tényezők indukálják? Az eredmények szerint a szerzők átültetést termelő neurotróf faktorok specifikus hatást a sorsa allograftok, ami aztán kifejlesztett intenzívebben és 2-3-szor nagyobb, mint a méret allograftok lépett az agy hozzáadása nélkül vizsgálatára. Következésképpen, xenograft tartalmazó sejtek neurotrofin gének, különösen a gén kódoló glia-eredetű neurotróf faktor (GDNF) humán fejtenek ki a fejlesztési allograft vidonespetsifichesky hatás hasonló a hatása a megfelelő neurotrofin. Ismeretes, hogy a GDNF növelte a dopaminerg neuronok túlélését az embrionális patkány középagy és növeli a dopamin metabolizmusát ezen sejtek által, és differenciálódását indukálja tirozin-hidroxiláz-pozitív sejtek, fokozza a növekedés a axonok és a neuronok növekvő testméret. Hasonló hatások figyelhetők meg a dopaminerg neuronok tenyészetében a patkány középső agyában.

A humán neurális őssejtek az érett patkányok agyába történő xenotranszplantációját követően megjegyzik aktív migrációjukat. Ismeretes, hogy az idegi őssejtek migrációjának és differenciálódásának folyamatát speciális gének szabályozzák. A kezdeményező jelet migrációs progenitor sejtek a felső differenciálás olyan fehérjét ad terméket a proto-onkogén c-ret együtt GDNF. A következő jel a gén mash-1-ből származik, amely szabályozza a sejtfejlődés útjának megválasztását. Ezenkívül a differenciáló sejtek specifikus reakciója a ciliáris neurotróf faktor a-receptorától is függ. Így, mivel egy teljesen más genetikai alkotmány xenogénikus humán neurális őssejtek és a recipiens patkány agysejtek, el kell ismerni, nem csak vidonespetsifichnost neurotrófiás faktorok, hanem a legnagyobb evolúciós megőrzése felelős gének specifikus differenciálódását idegi őssejteket.

Will lehetséges xenotranszplantáció embrionális neyromateriala idegsebészeti gyakorlatban a neurodegeneratív kóros folyamatok miatt károsodott szintézisét mielin oligodendrocita látható. Közben, a legintenzívebben Neurotransplantation címet kapcsolatos kérdések megszerzése embrionális vagy érett allogén kábelt neurális őssejtek tenyészetben majd azok irányított differenciálódását neuroblasztokra vagy specializált neuronok.

Idegi őssejtek átültetése

Ahhoz, hogy serkentik a proliferációját és differenciálódását, neurális őssejtek a felnőtt szervezet lehet átültetett embrionális neurális szövet. Nem kizárt, hogy a bevezetett allograft az őssejteket az idegszövet az embrió maga mehet keresztül proliferációját és differenciálódását. Köztudott, hogy a gerincvelői sérülés regenerálódását idegi vezetékek elvégezzük nyúlása sérült axonok és axonsarjadzás biztosíték csírázása motoros neuronok ép. A fő akadálya a gerincvelő regenerálása, a kötőszövet képződését kárt a hegek területének, disztrófiás és degeneratív változások a központi neuronok, NGF hiány, és a jelenléte az érintett területen mielin bomlástermékek. Az eredmények azt mutatják, hogy a transzplantáció után a sérült gerincagyban a különböző sejttípusok - a fragmentumok az ülőideg felnőtt állatok, embrionális occipitalis kéreg, a hippocampus, a gerincvelő, a Schwann-sejtek, asztrociták, mikroglia, makrofágok, fibroblasztok - hozzájárul a sérült axonok regenerációját által csírázás, és lehetővé teszi az újonnan alakult axonok segítségével növekedjenek területe a gerincvelő sérülés. Kísérletileg bizonyított, hogy az átültetésre magzati idegszövet a gerincvelő sérülés hatására neurotróf faktorok gyorsítja a növekedést az érintett axonok, meggátolja a glia heg és Fejlesztési disztrófiás és degeneratív folyamatok centrális neuronok, míg azok a sejtek transzplantált embrionális idegszövet áteső gerincvelő, integrálja a szomszédos szövetek és elősegíteni axonális csírázó keresztül az érintett területen a kialakulását szinapszisok den driticheskogo típusú gerincvelői neuronok.

Ez a terület a regeneratív orvoslás és műanyag kapta a legnagyobb fejlődést Ukrajnában miatt a munka a tudományos csapat élén VI Tsymbalyuk. Először is, a kísérleti tanulmány hatékonyságát transzplantáció embrionális idegszövet a gerincvelő sérülés. A autológ, perifériás ideg legkifejezettebb változások romboló szerzők megfigyelték, távoli tömítést terület, ahol a 30. Napon a műtét után egyesítjük az jellegét reparatív folyamatok. Ha az allograft morphofunctional állapotát a beültetett idegi 30. Napon volt jellemző súlyos leromlását jelenségeinek zsíros elfajulás és az amyloidosis a háttérben fokális gyulladásos beszűrődés limfoidnokletochnoy predominánsan atrófia a Schwann-sejtek. Transzplantációs embrionális idegszövet nagyban hozzájárult a helyreállítása gerincvelő vezetési, különösen állatok, amely művelet végeztek az első 24 órával az agysérülés után: ellen enyhítésére gyulladásos-destruktív folyamatokat jelölt hipertrófia és hiperplázia a proteinszintézist és a energoprodutsiruyuschih ultrastrukturális elemek gerincvelői neuronok hypertrophia és oligodendrociták hiperplázia, 50% -os redukáló amplitúdójának az izom akciós potenciál és 90% - fordulatszám gazdaság lendületet. Hatékonyságának értékelésében a transzplantáció magzati idegszövet-átültetés függően a zóna azt találtuk, hogy a legjobb eredményeket figyeltek beadva közvetlenül a transzplantáció területén gerincvelő sérülés. Teljes átkelés a gerincvelő magzati idegszövet-átültetés nem bizonyult hatékonynak. Dinamikus vizsgálatok kimutatták, hogy az optimális idő transzplantáció embrionális idegszövet az első 24 óra után egy gerincvelő-sérülés, miközben egy művelet időtartama alatt kifejezett másodlagos ischaemiás és gyulladásos változások előforduló 2-9 napon a sérülés után, fel kell ismerni, nem praktikus.

Ismeretes, hogy a súlyos koponya-agyi sérülés vált ki erős és tartós aktiválása lipidperoxidáció a kezdeti és a közbenső szakaszaiban poszttraumás időszakban a károsodott agyszövet és az egész szervezetben, és azt is a energia metabolizmus a sérült agyban. Ilyen körülmények között a oltása magzati idegszövet, hogy traumás sérülés hozzájárul a stabilizációs a lipid peroxidációs folyamatok és növeli a kapacitást az antioxidáns rendszer az agy és az egész szervezetre, növeli annak gyökellenes védelmet 35-60 napon a trauma utáni időszakban. Ugyanakkor az embrionális idegszövet transzplantációja után az agyban az energiaterminizmus és az oxidatív foszforiláció normalizálódik. Továbbá, látható, hogy az első napon a kísérleti traumatikus agysérülés sérült féltekén szöveti impedancia csökken 30-37% az ellenoldali - 20%, jelezve, a fejlesztés a generalizált agyi ödéma. Az állatok átesett transzplantáció a magzati idegrendszer szöveti ödéma involúció sokkal gyorsabban megy végbe - már a hetedik napon az átlagos érték az impedancia szövetek traumatizált félteke elérte a 97,8% a kontroll szint. És a teljes helyreállítása az értékek az impedancia a 30. Napon volt megfigyelhető csak azokban az állatokban transzplantált embrionális idegszövet.

A halál az idegsejtek az agyban súlyos traumás agysérülést, ami nagymértékben hozzájárul a fejlődéséhez poszttraumás szövődmények. Különösen fogékonyak kár idegsejtek integrálják a dopaminerg és noradrenerg rendszerek, a középagy és a medulla. Csökkentése a dopamin szintjét striopallidarnoy komplex és az agykéregben jelentősen növeli a mozgási rendellenességek és pszichiátriai rendellenességek, epileptiform állapotok, és csökken a dopamin termelését a hipotalamuszban lehet az oka számos vegetatív és szomatikus rendellenességek megfigyelt távoli poszttraumás időszakban. A vizsgálatok eredményeit a kísérleti traumatikus agysérülés arra utalnak, hogy a transzplantáció a magzati idegszövet hozzájárul a helyreállítása a dopamin a sérült agyfélteke, a dopamin és a noradrenalin - a hipotalamusz, valamint növekvő szintű noradrenalin és a dopamin, a középagy és a medulla. Továbbá, mint a transzplantáció eredményeként embrionális idegszövet állatmodelljeiben az agysérülést szenvedett féltekén normalizált százaléka foszfolipidek és megnövekedett zsírsav- tartalom (C16: 0, C17: 0, C17: 1, C18: 0, C18: 1 + C18: 2, C20 : 3 + C20: 4, C20: 5).

Ezek az adatok megerősítik stimulálása regenerációs folyamatok és műanyag átültetett embrionális idegszövet, és azt jelzik, reparatív-trofikus hatása az agy transzplantátumot befogadó egészére.

Különös figyelmet kell fordítani az idegsebészeti intézet munkatársainak klinikai tapasztalataira. AP Romodanov Orvostudományi Akadémia Ukrajna transzplantációja embrionális idegszövet bénulás - egy nagyon összetett betegség bruttó megsértése a motoros funkció. A csecsemőkori agyi bénulás klinikai formái az izomtónus szabályozásáért és a motoros sztereotípiák kialakulásáért felelős szerves struktúrák károsodásának mértékétől függenek. Jelenleg bőven van bizonyíték arra, hogy megsértik a motoros funkció és az izomtónus fontos kóros elváltozásokat a rendszer striopallido-talamokortikális motorvezérlés. Ennek a rendszernek a striospallidális kapcsolata ellenőrző funkciót gyakorol a dopamin nigrostriáris termelésén keresztül. Közvetlen útvonal kezdete végrehajtási szabályozása talamokortikális neuronok héj közvetített gammaaminomaslyanoy-vajsav (GABA) és a P anyag és a vetített közvetlenül a motor területe a belső szegmens a globus pallidus és a substantia nigra. Közvetett útvonal amelynek hatása valósul bevonásával GABA és enkefalin, származik a héj neuronok és befolyásolja a mag a bazális ganglionok keresztül kapcsolatot szekvencia, amely tartalmazza a külső szegmensét a globus pallidus és a nucleus subthalamicus. Ingerületvezetési zavarok okoznak hypokinesia egyenes utat, mivel a csökkenés vezetőképesség szerkezetek közvetett úton vezet hyperkinesis vonatkozó változások az izomtónust. A integritását GABAerg utak különböző szinteken a rendszerben a motoros kontroll és az integráció a dopaminerg csatlakozások a héj szinten elengedhetetlen a szabályozása thalamocorticalis kölcsönhatások. A leggyakoribb megnyilvánulása motor patológia különböző formái bénulás sérti az izomtónust és szorosan kapcsolódik változás reflex izom tevékenység.

Az embrionális neurális szövet átültetése a gyermekek agyi bénulásában alaposan elemzi az agyi struktúrák károsodásának természetét. Ezen döntés alapján a dopamin és a GABA a subarachnoidális agy-gerincvelői folyadék szerzők részletesen integráció szintjének funkcionális zavarok agyi struktúrák, amelyek lehetővé teszik az eredmények tárgyiasítani sebészeti beavatkozás és kijavítani ismételt Neurotransplantation. Magzati idegszövet (abortny anyagot 9 hetes embrió) ültettünk a parenchima a cortex precentral gyrus az agyféltekék, súlyosságától függően a sorvadásos változásait. A posztoperatív időszakban a betegek szövődményeit vagy romlását nem figyelték meg. Pozitív dinamika volt megfigyelhető 63% -ánál a spasztikus formák, 82% -a gyermekek atóniás-esztétikai forma, és csak a 24% -ánál ízületi betegség. Ez telepíti negatív hatása a működését a magas szintű neyrosensibilizatsii a autoantitestek jelenléte a neurospecific fehérjék. Hatástalan transzplantációja embrionális idegszövet megjelent korú betegeknél 8-10 éves és idősebb, valamint a súlyos hiperkinetikus szindróma és episindroma. Klinikai hatékonyság a transzplantáció embrionális idegszövet betegeknél spasztikus formái bénulás nyilvánul statomotornyh képződését új ismeretek és az akaratlagos mozgások a korrekció a patológiás mozgás minták és csökken a mértéke a görcsösség, rendellenes testtartást és attitűdök. A szerzők úgy vélik, hogy a pozitív hatás a transzplantáció embrionális idegszövet az eredménye normalizáló hatása a funkcionális aktivitását supraspinalis struktúrák szabályozásában vesz részt a hang a testtartások és akaratlagos mozgások. Ebben az esetben, a pozitív klinikai hatását transzplantációs embrionális idegszövet kíséri a tartalom csökkenését a neurotranszmitterek a subarachnoidális cerebrospinális folyadék, jelezve, hogy a helyreállítási szerves kölcsönhatások érintett agyi struktúrák.

Van még egy súlyosabb formái neurológiai betegségben - minimálisan tudatos állapotban, a probléma kezelésére, amely sajnos még messze nem megoldott. Képviseli a minimális tudati állapotból polyetiology szubakut vagy krónikus állapot eredő nehéz szerves CNS elváltozások (főleg cortex), és azzal jellemezve, hogy a fejlődés és a panapraksii panagnozii viszonylag tárolt függvény szegmensszakaszok szár képződmények és a limbikus agyi retikuláris komplexet. További tanulmányok (1: 3 év) azt mutatta, hogy a minimális tudati állapot nem a végső diagnózisa a tartós károsodása az idegrendszer a gyermekek, és átalakul egy szerves vagy a demencia, vagy krónikus vegetatív állapot. Az Idegsebészeti Intézet rehabilitációs neurológiai osztályán. AP Romodanov Sciences Ukrajna 21 betegek következményekkel apallic szindróma transzplantációja embrionális idegszövet végeztük. Általános altatás korona vágó fúrt lyukat hordtunk egy területet a legkifejezettebb atrophiás meghatározott változások a számítógép vagy a mágneses rezonancia, és jelenlétében diffúz sorvadása szürke vagy fehérállomány be a graftot és egy központi precentral gyrus az agy. Megnyitása után a dura mater darab 8-9 hetes embrió szövet Bookmarks szenzomotoros kéreg intrakortikális beültetett egy speciális eszközt. A minták száma a beültetett szövet 4-10, ami által meghatározott mennyisége és mérete fúrt lyukat a helyi változások medulla. Eltérően más típusú patológia a apallic szindróma, a szerzők igyekeztek implantátum annyi magzati szövetet a legolcsóbb területeket az agyban. A dura mater volt varratva, a koponya hibájának műanyaga készült. A műtét során minden betegnél jelentős változások mind a cortex (sorvadás, hiányzik a kanyarulatok, elszíneződés és a lüktetést velő) és agyhártya (megvastagodása a dura mater, jelentős megvastagodása a pókhálószerű membrán, amelynek ez a saját erek, fúziós héjak az alapul szolgáló agyi anyaggal). Ezek a változások kifejezettebb volt azoknál a betegeknél, akiknek a kórtörténetében voltak jelzések az átvitt gyulladásos agysérülések. Átesett betegeknél CNS hipoxia által uralt diffúz sorvadásos változásait az agy anyag, különösen agykérgi osztályok, ahol nőtt a subarachnoidális térben, anélkül, hogy jelentős változások a membránok az agyban. A betegek felében a lágyrészek, a csontok és az agyi anyagok vérzései fokozódtak. Műtétek utáni időszakban hat hónaptól három évig, az állam javult 16 beteg, öt beteg változatlan maradt. Pozitív dinamikát figyeltek meg mind a motor, mind a mentális szféra oldalán. Izomtónus csökken, tíz beteg és a beteg fizikai aktivitása (csökkent paresis, jobb összehangolására a mozgások), a manipulatív képessége felső végtagok jelentősen emelkedett öt gyermek. Négy betegnél csökkenti a gyakoriságát és súlyosságát epilepsziás rohamok és egy gyermek a teljes megfigyelési időszak rohamok műtét után nem létezik. Az agresszivitás csökkent két gyermek, két súlyos szemgolyó szenvedő javult nyelés, két gyerek képes volt rágni a saját 2 héten belül a műtét után. Megállapította, csökkent a súlyos mentális zavarok, kilenc gyerek a műtét után vált nyugodt alvás és a figyelmet javult hét betegnél. Három beteg következményekkel apallic szindróma kezdték felismerni a szülei, egy -, hogy kövesse az utasításokat, két - a szónál, három csökkent mértékű artikulációs. A szerzők megjegyzik, hogy jelentős javulást a betegek után kezdődik 2 hónappal a műtét után, eléri a maximális 5-6 hónap, akkor a javulás mértéke lassul és az év végére 50% -ánál a folyamat stabilizálása. Pozitív hatása neurotransplantation szolgált alapjául reoperációs hat beteg következményekkel apallic szindróma, de a másik agyfélteke. Technikák és a második transzplantáció módszertant azonosak voltak az első művelet, de a klinikai hatás a második lépésben alacsonyabb volt, bár ez nem fordul elő, miután az első és a második műtét súlyos szövődmények. A szerzők szerint a terápiás hatásmechanizmus kapcsolódó neurotransplantation neurotróf hatással átültetett embrionális idegszövet, amely nagy mennyiségű növekedési, hormonális és egyéb biológiailag aktív anyagok előmozdítása a sérült idegsejtek és műanyag reorganizációs címzett agyszövet. Nem kizárt, és aktiváló hatása az idegsejtek, amelyek megőrizték morfológiailag, de elvesztette miatt funkcionális aktivitásának a betegség. Ez gyors neurotróf hatás azzal magyarázható, a javulás a szemgolyó funkciók néhány gyerek a végén az első vagy a második héten a műtét után. Feltételezzük, hogy amellett, hogy azok a harmadik-negyedik hónap között graft és a befogadó agy létre morfológiai és funkcionális kommunikáció, amelyen keresztül neyrotransplantat helyettesíti a funkciója az agysejtek pusztulását, ami a hordozó javítására mind a motoros, és a betegek mentális funkcióra.

Effect transzplantációs magzati idegszövet átszervezés interneuronalis kötések kísérletileg. Szerzők fehér patkányok segítségével egy lipofil fluoreszcens címkék DIL (1,1-dioktadecil-3,3,3 \ 3'-tetrametilindokarbotsianina perklorátot) és konfokális lézer pásztázó minták vizsgálták helyreállítási intermodule axonális kapcsolatok az övezetben a mechanikai sérülés az agykéreg embrionális transzplantáció háttér idegszövet és anélkül. Úgy találtuk, hogy a bevezetése magzati idegszövet egy sérült területet biztosít axonok növekedését, ami miután áthaladt a graft is csatlakozik a szomszédos agyszövet, mivel anélkül, hogy a transzplantáció magzati idegszövet-károsodás zóna növekvő axonok leküzdhetetlen akadályt. Ebben a munkában a transzplantáció embrionális (15-17 napjáig terhesség) agykéregben. Eredményeink - további bizonyítékokat mellett egy aktív befolyást embrionális neurális szövetpótló a post-traumás reorganizációs interneuronális kapcsolat szomszédos szerkezeti és funkcionális modulok az agykéreg. Transzplantációs embrionális idegszövet biztosít részleges felépülése közötti kapcsolatok osztott részletekben a kár az agykéreg létrehozása révén kedvező feltételek a növekedés az axonok az övezetben a graft neyrotrofichoskih tényezők. Az ilyen jellegű hatása bizonyított kísérleti és megvitatták az irodalomban bizonyítékok nagy műanyag lehetőségeit a sérült agy felnőtt állatok. Ebben a tekintetben a transzplantáció mára már az optimális terápiás stratégiát helyreállítják a károsodott emberi CNS.

Adataink a hatékonyságát a magzati agyban idegszövet, mint exogén transzplantációs tápközegben az axonális növekedéshez kilátások tanúsítják tervszerű létrehozását kommunikációs kapcsolatokat a szomszédos ép részei az agyban. A tényleges munka úgy tűnik, hogy tanulmányozzuk a transzplantáció idegszövet a dinamikáját a CNS funkcionális paraméterek, amelynek a feladata az volt, hogy vizsgálja meg a hatását a transzplantációs magzati Bookmarks locus coeruleusban (LC) a morphofunctional mutatók LC neuronok és a helyváltoztató mozgást címzettnek. A recipiensek nőstény Wistar patkányok, donorok - 18 napos, ugyanabban a vonalban lévő patkány embriók. Az embrionális LC transzplantációját az agy harmadik kamrájának üregébe végeztük. Hisztológiailag a beültetett beültetést a befogadó állatok 75% -ában detektáltuk. Azokban az esetekben, megtapadást fekszik a falnak a kamra, hogy kitöltse a 1 / 5-2 / 5 annak lumen, és életképes volt. Miután az 1. és 6 hónappal a műtét után, az átültetett idegszövet morfológiai jellemzője az a struktúra, ami bekövetkezhet, ha a normális egyedfejlődési fejlődés, azaz, az LC-szerkezet. Adataink azt mutatják, hogy az állatok, hogy a már átültetett magzati fülre LC változik a dinamikus aktivitás és fokozott aktivitását mátrix LC sejtmagok kromatin. Következésképpen intenzívebbé tevékenységét a neuronok saját LC, de megszoktuk graft is funkcionálisan aktív. Ismeretes, hogy az úgynevezett mozgásszervi középagyi területén szinte egybeesik a lokalizáció a LC. A szerzők úgy vélik, hogy a változások alapján a motoros aktivitás a recipiens patkányok aktiválása az LC-sejtek, mind a tulajdonosi, graft, a kiosztás eredményeként nagy mennyiségű norepinefrin, beleértve a gerincvelői szelvények. Így, azt feltételezzük, hogy a növekedés a lokomotoros aktivitás transzplantáció LC körülmények között egy intakt állat agyi jelenléte miatt a funkcionálisan aktív transzplantációs integrált agy a recipiens, és hozzájárul az aktiválás a helyváltoztató aktivitása a patkányok.

Továbbá azt is kimutatták, hogy a transzplantált embrionális neuroepiteliális sejtek könyvjelzők agykéregben és a gerincvelőt a túlélésre és differenciálódnak neuroblasztokra, fiatal és érett neuronok 1-2 hónappal a transzplantációt követően a sérült ülőideg felnőtt patkányok. Abban a vizsgálatban, dinamikájának NADRN pozitív neuronok könyvjelző embrionális gerincvelő és neokortex patkány heterotóp allograftok (15 patkány embrió naponta) átmenő hosszanti keresztmetszetek ülőideg patkányok-címzettek kimutatta megtapadást 70-80% neyrotransplantatov, hogy attól az időtől függött a megfigyelés. Neuroblasztokra egy- és bipoláris alakú, lekerekített fényes sejtmagok és egy vagy két nucleolusok kezdődő képződhetnek a beültetett bőrt, egy héttel a műtét után, ami együtt járt a kialakulását klaszterek. Közül neuroblasztokra szerzők nem sikerült kimutatni tartalmazó sejtek NADPH-diafopazy (NADPH-d). 7 nap után a NADPH-pozitív volt csak sejtes elemei a vérerek - endoteliális sejtek a kapillárisok belsejében a graft és az endoteliális és vaszkuláris simaizom sejtekben az ülőideg a címzett. Mivel a vaszkuláris simaizom sejtek, indukciós NO-szintáz (NOS) történik hatása alatt az IL-1, a szerzők attribútum megjelenése NADPH-pozitív simaizomsejtek erek a ülőideg, hogy az IL-1 szintetizált a sérült ideg fatörzsek. Ismeretes, hogy a körülmények neyronogenez transzplantáció a magzati agyban könyvjelzők szinkronizálva van a fejlesztési neuronok in situ. Eredmények A morfológiai vizsgálatok arra utalnak, hogy a differenciálódás a neurális elemek transzplantációs hét nappal a transzplantáció után megfelel a sejtdifferenciálódás hasonló az agy újszülött patkányok. Így egy heterotóp transzplantáció után egy perifériás ideg átültetett embrió idegsejtek mutatnak szintetizálására irányuló képességét NADPH-d. A gerincvelő átültetések többet mutat tartalmazó neuronok NADPH-d, átültetésnél, mint az agykéregben, de a nitrogén-oxid szintézisének a transzplantált neuronok később kezdődik, mint a fejlődés in situ. A gerinces központi idegrendszer NOS-pozitív sejtek jelennek meg, mint már a születés előtti időszakot. Úgy tartják, hogy a NO hozzájárul a kialakulásához a szinaptikus kapcsolatokat a fejlődő agyban, és a jelenléte a NOS-pozitív idegi afferensek nyújtó neuroblasztokra NO-szintézis a kisagyban, stimulálja a migráció és neuronok differenciálódását, ezáltal Cytoarchitectonics normális agyban. A fontos szerepet NO sinapsogeneze telepített tectum - NOS-pozitív neuronok csak azokat, akik a szinaptikus kapcsolatokat retinasejtekre.

Ismeretes, hogy a nitrogén-monoxid az agyi aktivitás egyik szabályozója, ahol arginin származik az NO-szintáz hatása alatt, amely diafóros aktivitással rendelkezik. A központi idegrendszerben a N0 szintetizálódik az erek endotheliális sejtjeiben, mikroglia, asztrocitákban és az agy különböző részeiben lévő neuronokban. A traumás agykárosodás, valamint a hipoxia és az ischaemia következtében megnövekszik az NO-t tartalmazó neuronok száma, amely az agyi véráramlás egyik szabályozója. Tekintettel arra, hogy a N0 képes a szinapszenogenezis indukálására, különösen fontos a NO-tartalmú sejtek neurotranszplantációs körülmények között történő kialakulásának vizsgálata a recipiens idegszövetének traumás sérüléseinek hátterében.

Ugyanilyen fontos, hogy tanulmányozza a hatása Neurotransplantation feltételes reflex sztereotip viselkedést. Azokban a kísérletekben tanulmányozása hatására távoli és intracerebrális (közötti CII és CIII) graftok embrionális kékes foltok (17-19 napján a vemhesség), és a memória tartalmát a katekolaminok folyamatok patkányokban pusztulással frontotemporalis neocortex kimutatták, hogy az elektrolitikus károsodás frontotemporalis cortex ad sztereotípia feltételes érzelmi reflex elkerülési választ (memória), csökkenti a fiziológiai aktivitás, csökkenti a noradrenalin a kortikális zónában a koagulált de növeli így annak szintje a hipotalamuszban, ahol csökken a koncentrációja az adrenalin, de a vérben, valamint a mellékveséket annak mennyiségét növeli.

Ennek eredményeként a intracerebrális transzplantációja embrionális szövet kékes foltok 81,4% Az állatok visszanyert sztereotípia feltételes érzelmi reflex elkerülési reakciót, károsodott elektrolitikus sérülését Front-temporális területek az agykéreg normalizált adrenalin a középagy retikuláris formáció, hipotalamusz és a neokortex, és a hippocampus még felveti annak szintjét, kombinálva csökken a vér koncentráció az adrenalin.

Távoli transzplantáció embrionális szövet kékes foltok nem csak elősegíti a helyreállítás károsodott sztereotípia feltételes érzelmi reflex elhárító válasz károsodásában szenvedő patkányok az elektrolit frontotemporalis kéreg, hanem növeli a tartalmát noradrenalin és az adrenalin, főként a hipotalamuszban, a vér, a szív és a mellékvese. Feltételezzük, hogy ez annak köszönhető, hogy a graft vascularizatio penetráció neurotranszmitterek a véráramba, az átjutást a vér-agy gáton, és aktivációs mechanizmusok adrenalin-újrafelvétel és noradrenalin felvételét 1., 2., 3. A szerzők úgy vélik, hogy a stabilizációs hosszú noradrenalin szint a megtapadást és funkciója graft lehet tekinteni, mint egy olyan jelenség, annak fokozatos felszabadulását az idegsejtek minimális dózisban kékes foltok.

Pozitív klinikai hatásai transzplantáció embrionális idegszövet lehet köszönhető, hogy az utóbbi hatással van a folyamatokra az új erek képzése szabályozásában való közvetlen részvétel a növekedési faktorok és citokinek. Az aktivált vaszkulogenezis angiogén növekedési faktorok - a vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF), FGF, PDGF, és a TGF, amelyek során szintetizálódnak iszkémia szolgáló eredeti pont az angiogenezis. Bizonyított, hogy a kimerülése vaszkuláris növekedési potenciál jelentkezik az öregedési folyamat a test, amely jelentős szerepet játszik a patogenezisében betegségek, mint például a szívkoszorúér-betegség és az atherosclerosis az alsó végtagok. A szövetek iszkémia fejlődik és számos más betegséggel. Bevezetés angiogén faktorok ischaemiás zóna (terápiás angiogenezis) serkenti a vérerek isémiás szövetekben, és javítja a mikrokeringést fejlődésének köszönhetően a kollaterális, ami viszont növeli a funkcionális aktivitása az érintett szerv.

A klinikai felhasználásra legígéretesebb a VEGF és az FGF. Az első randomizált vizsgálati eredmények biztatónak bizonyultak, különösen az angiogén faktorok optimális adagolásának és módjának megfelelő kiválasztásával. Ebben a vonatkozásban egy humán embrió agyszövetből izolált kivonat angiogén aktivitásának kísérleti értékelését végeztük. A munka a terhesség huszadik hetében elnyert abortusz anyagot használták fel, és az I. Maciog és társai (1979) módszere szerint feldolgozták az ANRF IC módosításában. Ez a gyógyszer egy analóg „belhám sejt növekedési adalékanyag” ( „Sigma”), és képviseli a természetes elegye humán angiogén faktor, amely összetétele a következő volt a VEGF és FGF. A kísérleteket a hátulsó végtag és a szívizom szövetének iszkémiai modelljeivel végeztük. A kutatás alapján az alkalikus foszfatáz aktivitást a kísérleti állatokban kezelt kivonatot embrionális idegszövet, növekedést mutatott a kapillárisok számától egységnyi területen a szívizom - mind a hosszirányú és keresztirányú, hogy a szeleteket a szív. Angiogén aktivitását a gyógyszer nyilvánul meg közvetlen bejuttatását ischaemiás zóna, és abban az esetben a szisztémás (intramuszkuláris) beadás, amely ahhoz vezetett, hogy csökkent az átlagos területe infarktus utáni heg.

Bármilyen kiviteli alak esetében a transzplantáció embrionális idegszövet rendkívül fontos, hogy válassza ki a megfelelő terhességi időszak átültetett embrionális anyag. Összehasonlító elemzése celluláris készítmények embrionális ventrális mesencephalon 8-, 14- és 16-17 napos embrionális patkányokat három hónapon belül intrastriarnoy neurotransplantation ivarérett patkányok parkinsonizmus egy automatizált vizsgálati apomorfinindutsirovannoy motoros aszimmetria feltárta szignifikánsan nagyobb hatékonyságot sejt preparátumokban CNS 8 napos embriók és a legkisebb - 16-17 napos embrionális neurális szövet. A kapott adatokat a korrelált az eredmények hisztomorfológiai elemzés, különösen a méretei graftok, glia reakció súlyossága és száma a dopaminerg neuronok őket.

Különbségek terápiás hatását magzati idegszövet sejtek kapcsolatba hozható a fokú elkötelezettség és éretlensége a sejtek saját, és a választ, hogy különböző növekedési faktorok, amelyek részére a területen az indukált dopaminerg neuron károsodás. Különösen, a hatás az EGF és FGF-2 a fejlesztés a neurális őssejtek in vivo telencephalonra előfordul különböző szakaszaiban az embriogenezis. Neuroepiteliális sejtek 8,5-napos egérembriók in vitro tenyésztett szaporodnak szérummentes közegben FGF2, de nem EGF, amelyek reagálnak csak őssejt populáció agyából izolált embriók későbbi szakaszaiban a fejlődés. Ugyanakkor, neurális őssejtek adott válaszban megnyilvánuló proliferációs mindegyik mitogének és növekedési additív növelése esetén FGF2 hozzáadása és EGF tenyészetekben alacsony sejtsűrűség ültetés. Úgy tartják, hogy az EGF-reaktív neurális őssejtek a germinális zóna 14,5 napos egér embriók lineáris leszármazottai FGF-reaktív idegrendszeri őssejtek, amelyek az első után jelenik meg 8,5 nap vemhességi. Potenciális fenotípus neurális őssejtek és progenitor sejtek függ a komplex befolyása a mikrokörnyezetben. Amikor immuntipizálását idegsejtek és a hippokampusz periventricularis területekre 8-12- és 17-20 hetes humán embriók áramlási citofluorometria során jelentős változékonysága mind a gesztációs kor és az egyéni alkotmányjogi jellemzői donor bioanyag. Amikor tenyésztjük neurális prekurzor sejtek szérummentes közegben egy szelektív EGF, FGF-2 és NGF neuorsphere kialakulási sebessége lényegében független a vemhesség. A sejteket a különböző agyi területeken 5-13-hetes humán embrió rövid művelés FGF2-vel be egyrétegű sejttenyészetekben a laminin szubsztrátum jelenlétében nyomokban növekedési faktorok szaporodását támogató 6 hétig, amelyek nagy arányban nestinpozitivnyh sejtek ellen, a háttérben a spontán képződését sejtek markereinek mindhárom vonal idegi differenciálódás. A sejteket izoláltunk humán mesencephalonban során embrió vemhesség haladja meg a 13 hetes szaporodni hatása alatt EGF és is képeznek neuorsphere. Segítségével az EGF és FGF-2-t elért szinergetikus hatást. A legintenzívebb proliferációját neurális őssejtek figyelhető meg a megjelenése neuorsphere ha tenyésztett szöveti agykérgében 6-8 hetes humán embriók jelenlétében EGF2, IGF1 és 5% lószérummal egy szubsztráton fibronektinnel.

Meg kell jegyezni, hogy kapcsolatos kérdések terhességi kor és a Department of embrionális szövet CNS előnyösebb használni céljára Neurotransplantation nyitva marad. A válaszok megtalálhatók a fejlődő agyban neurogenezis, amely továbbra is az egész prenatális időszakban - időkereten belül, amikor a hám a neurális cső képez többrétegű szerkezet. Úgy tartják, hogy a forrás az őssejtek és az új neuronok radiális gliasejt áll hosszúkás sejtek hosszú folyamatok, sugárirányban képest a falon agyhólyagok, és érintkezik a belső felületével a kamrák és a külső falak agyi pia felületre. Korábban a radiális glia felruházva csak egy funkciója idegpálya, amellyel a migráció neuroblasztokra ventrális felülete szakaszok, és ad neki egy keretet szerepet kialakulását a megfelelő réteges szervezet az agykéreg. Ma megállapítást nyert, hogy mivel a radiális glia fejlődése az asztrocitákra átdifferenciálódik. Méghozzá csökken az emlősök születés után, de az ilyen jellegű állatok, amelyek a radiális glia fennáll a felnőttkor neyronogenez aktív folyamatok és a születés utáni időszakban.

A kultúra sejtek radiális glia embrionális neokortikális kialakítva rágcsáló neuronok és gliasejtek, és a vemhesség embriófejlődés 14-16 nap (az időszak maximális intenzitású neyronogeneza az agykéregben, egereken és patkányokon) alakult elsősorban neuronok. A 18. Napon az embrionális differenciálódás felé tolódott képződését asztrociták jelentős számának csökkenése az újonnan képződött neuronok. Címkézés in situ radiális glia sejtek segítségével a GFP hagyjuk kimutatására buborékok az üregben agyban 15-16 napos patkány embriók aszimmetrikus részlege jelölt sejtek megjelenésével leánysejtek rendelkező immunológiai és elektrofiziológiai jellemzőit neuroblasztokra. Érdemes megjegyezni, hogy, eredményei szerint a dinamikus megfigyelések eredő neuroblasztokra használja az anyasejt radiális glia sejtek vándorlását a felszínre a pia.

A radiális glia endogén markerje a közbenső neustin szálak fehérje. Fluoreszcens sejtosztályozás áramlási jelölt retrovírus társított GFP és szabályozása alatt fejeződik ki a nestin, azt bizonyította, hogy az őssejtek a gyrus dentatus régió a hippocampus és nyiroknedv személy (anyagot kaptunk át műtét epilepsziára) kifejezni nesztin. Ezért tartozik a radiális glia, amely emberekben, mint más emlősöknél, tartósított csak a gyrus dentatus.

Ugyanakkor a hatékonyság-transzplantáció függ nem csak a magas életképességét a donor sejtek és azok lehetséges és differenciáló funkciót cserélje ki a hibás sejteket, de elsődlegesen a migráció. Attól függ, hogy a migrációs képességét teljes funkcionális integráció a transzplantált sejtek - anélkül, hogy elszakadna cytoarchitectonics címzett agyban. Mivel radiális gliasejtek a születés utáni időszakban szinte teljesen ki vannak téve a csökkentés, meg kell találni arra, hogy a felnőtt címzettjeinek donor sejtek mozoghatnak a terület transzplantációs központjában a agykárosodás. Két változata van a sejtek vándorlását a központi idegrendszer, független a radiális glia: a jelenség a tangenciális migráció vagy mozgását neuroblasztokra a fejlesztés az agykéreg merőleges a sugárirányú gliális hálózat, valamint a migráció a „string” vagy „lánc”. Különösen, a migráció neurális progenitor sejtek a rostralis szubventrikuláris zónában történik a szaglógumó sorozataként szorosan határosak sejtek körül gliasejtek. Úgy véljük, hogy ezek a sejtek a partner sejtek, mint a migráció szubsztrát, mint például a fő szabályozója a sejt-sejt kölcsönhatások PSA-NCAM (neurális adhéziós molekula polisialirovannaya sejtek). Következésképpen az idegsejtek migrációja nem feltétlenül igényli radiális glia vagy meglévő axonkötések részvételét. Vneradialnaya formájában sejtek mozgását „string” a rostralis migrációs folyam megmarad az egész élet, amely jelzi a valós lehetősége célzott bejuttatása a transzplantált neurális progenitor sejtek kifejlett idegrendszerben.

Van egy hipotézis jelenlétében őssejt vonalak a egyedfejlődés az agy, amely szerint a korai szakaszában az agy fejlődésének őssejtek sejtek a neuroepithelium, amely folyamatban a lejáró transzdifferenciáitathatók radiális glia. Felnőttkorban az őssejtek szerepét olyan sejtek végzik, amelyek az asztrociták jeleit mutatják. Annak ellenére, hogy számos ellentmondásos kérdések (vita tekintetében őssejtek a hippokampusz, valamint a mély részei az agy, amelyek nem rendelkeznek a réteges szerkezet a kéreg és a fejlődő thalamus halmok, ahol a radiális glia hiányzik), egy világos és egyszerű koncepció az egymást követő fenotípus őssejtek egyedfejlődés során néz nagyon vonzó.

Hatása tényezők a mikrokörnyezet a meghatározására és az azt követő differenciálódását neurális sejtek differon egyértelműen bizonyította transzplantáció érett gerincvelő őssejtek különböző részein a patkány érett idegrendszerben. Az őssejtek beültetése a gyrus dentatus, vagy a migráció a szaglógumó neuronok megfigyelt aktív mozgása a transzplantált sejtek alkotnak számos neuronok. Az őssejtek beültetése a gerincvelőben és a terület a hippokampusz kialakulását eredményezte asztrociták és oligodendrociták, míg transzplantáció a fogazott gyrus alakultak nemcsak gliasejtek, hanem neuronok.

Egy szexuálisan érett patkányban a fogazott gyrusban lévő elválasztó sejtek száma napi több ezer lehet - kevesebb, mint a teljes magszám 1% -a. Az idegsejtek a sejtek, asztrociták és egyéb gliáiis elemek 50-90% -át teszik ki - mintegy 15% -ot. A fennmaradó sejtek nem rendelkeznek az idegsejtek és a glia antigén jeleivel, de tartalmaznak endotélsejtek antigénjeit, ami a neuronogenezis és az angiogenezis közötti szoros összefüggést jelzi a dentin gyrusban. Az endotéliás sejtek neuronális progenitorsejtekbe való differenciálódásának lehetőségére utalnak, amelyek az endoteliokémák in vitro képességét mutatják a BDNF szintézisére.

Hatásos sebesség self-assembly neurális hálózatok: a differenciálódási folyamat progenitor sejtek vándorolnak szemcsés sejteket a gyrus dentatus és formája hajtások egyre növekvő felé zóna SAZ hippocampus szinapszisok és alkotó a glutamáterg piramissejtek és gátló intercalary. Az újonnan létrehozott gabona-sejtek integrálható a meglévő idegpályák 2 hétig, és az első szinapszisok már megjelennek 4-6 napon belül az új sejtek. A gyakori adagolás érett állati BrdU vagy 3H-timidin (egyirányú azonosítani felnőtt őssejtek) detektált nagyszámú jelölt neuronokban és asztrocitákban a hippokampuszban, ami arra utal, képződésének lehetőségét új neuronok nem csak a gyrus dentatus, hanem más részein a hippocampus. Érdeklődjön a folyamatok részlege, a differenciálás és a sejtek pusztulása a fogazott gyrus a hippokampusz az agy érett annak a ténynek köszönhető, hogy a kialakuló itt neuronok lokalizálódik az egyik legfontosabb hely a hippocampus, felelős tanulás és a memória folyamatokat.

Így ma találtuk, hogy a sejtek subependimnoy zónát az oldalsó agykamra érett rágcsálók előfordulhat neurális-elődje a migráló sejtek mentén a rostralis migrációs folyam, hosszirányban kialakított orientált asztroglia sejtek a szaglógumó, ahol be vannak ágyazva a réteg szemcsék sejtek és differenciálódnak neuronok szerkezetét. A migrációs progenitor neurális sejtek találhatók a rostralis migrációs folyam felnőtt majmok, ami arra utal, képződésének lehetőségét új neuronok a szaglógumó főemlősök. Idegi őssejtek izolált felnőtt szaglógumó és lefordított egy sorban, klónozott sejtek differenciálódnak neuronok, asztrociták és oligodendrociták. Őssejtek találhatók az érett agyban hippocampus patkányok, egerek, majmok és emberek. Idegi őssejtek szubgranuláris zónában a dentate fascia forrásai prekurzor vándorló sejtek a mediális és laterális végtagok a hippocampus, ahol differenciálódnak érett gabona-sejtek és glia-elemeket is. Az axonok kialakítva de novo fogazott gyrus neuronok vezethető vissza a területen SAZ, jelezve, hogy az újonnan alakult neuronok végrehajtásában részt vevő hippokampusz funkciókat. A asszociatív területeken a neocortex kifejlett majomagy talált prekurzor sejtek az idegsejtek vándorlását a szubventrikuláris zónában. Az új réteget VI az agykéreg piramidális neuronok új egerek kiderült keresztül 2-28 hét után kiváltott károsodás és az idegsejtek halálához natív ez a réteg a migráció miatt dormantnyh korábbi progenitor sejtek a szubventrikuláris zónában. Végül, a valóságban a szülés utáni neyronogeneza az emberi agy mutatja kétszeres számának növekedése az agykérgi idegsejtek folytatódott az első 6 év a születés után.

A gyakorlati sejt-transzplantáció szempontjából nem kis jelentőségű az idegi szálak és a progenitor sejtek reprodukciós és differenciálódási folyamatainak szabályozását. A legmagasabb érték a tényezők között, amelyek lenyomja az elterjedése neurális progenitor sejtek glükokortikoid, ami drasztikusan csökkenti a megosztottság, míg megszűnik a mellékvese, éppen ellenkezőleg, jelentősen megnöveli a mitózis (Gould, 1996). Érdemes megjegyezni, hogy a morfogenezis a gyrus dentatus rágcsálókban legintenzívebb az első két hétben a születés utáni fejlődés hiányában stressz reakció a háttérben meredek csökkenése termelését és szekrécióját szteroid hormonok a mellékvese kéreg. Kortikoszteroidok gátolják migrációját szemcsés sejteket - új neuronok nem beágyazva a szemcsés réteg a gyrus dentatus, és a hilus maradnak. Feltételezzük, hogy a szinaptikus kötés kialakulásának folyamatait egyidejűleg megsértik. Védelem a sejtek ilyen „szteroid agresszió” által elvégzett minimális kifejezése ásványi és glükokortikoid receptorok szaporodó sejtek bab nemcsak a fejlesztés során a fogazott gyrus, hanem a kifejlett állatokat. Mindazonáltal az összes idegsejtek az agyban a hippocampus neuronjainak jellemzi a nagy mennyiségű glükokortikoid receptor, ami stresszt okoz a hippocampus. Az érzelmi stressz és a stresszes helyzetek elnyomják neyronogenez és krónikus stressz drámaian csökkenti az állatok képesek tanulni az új készségek és a képzés. Egy még kifejezettebb negatív hatása a krónikus stressz neyronogenez érthető, mivel a többnyire alvó állapotban a neurális őssejtek. Amikor immobilizálása a terhes patkányok (rágcsáló - szupramaximális feszültség faktor) van beállítva, mint a prenatális stressz, szintén csökkenti a sejtek száma a gyrus dentatus és lényegesen gátolja neyronogenez. Ismeretes, hogy a glükokortikoidok patogenezisében részt vevő depresszív állapotok, amely a morfológiai egyenértékű fékezési neyronogeneza, patológiás idegsejt átrendeződési és interneuronális csatlakozások, valamint a halálát idegsejtek. Másrészt, antidepresszáns kemoterápiás szerek aktiválja a kialakulását a neuronok de novo, ami megerősíti a kapcsolatot a folyamatok kialakulását az új neuronok a hippocampus és a depresszió. A jelentős hatással neyronogenez ösztrogén, amelynek hatásai vannak szemben a fellépés a glükokortikoidok, és hogy támogassa a proliferációját és túlélését neurális progenitor sejtek. Megjegyzendő, hogy az ösztrogének jelentősen növelik az állatok tanulási képességét. Egyes szerzők az ösztrogének hatására ciklikus változásokat társítanak a sejtek számának növekedésében és a nők számának túllépésekor.

Ismeretes, hogy a szabályozott neyronogenez EGF, FGF és a BDNF, azonban a mechanizmusok a külső jeleket a őssejtek mitogének és növekedési faktorok nem vizsgálták behatóan. Azt találtuk, hogy támogatja a PDGF in vitro neuronális lineage progenitor sejtek, és a ciliáris neurotróf faktor (CNTF), például a trijód-tironin serkenti képződését túlnyomórészt a gliasejtek - asztrociták és oligodendrociták. Hipofízis adenilil-cikláz-aktiváló protein (PACAP) és vazoaktív intesztinális peptid (VIP) aktiváló proliferációját neurális progenitor sejtek, de gátolják differenciálódási folyamatok utódsejtek. Az opioidok, különösen az elhúzódó expozíció esetén, jelentősen gátolják az neuronogenezist. Azonban, az őssejtek és a neurális progenitor sejtek-prekurzorok a gyrus dentatus nem tárt fel opioid receptorok (amelyek jelen vannak a különböző neuron az embrionális időszakban), amely nem teszi lehetővé, hogy értékelje a közvetlen hatásait opioidok.

A gyakorlati regeneratív és műanyag gyógyszerek igényei arra kényszerítették a kutatókat, hogy különös figyelmet fordítsanak az őssejtek több- és több potenciáljának tanulmányozására. Ezek megvalósítása tulajdonságok szintjén regionális őssejtek felnőtt szervezetben hosszú távon is biztosítja a szükséges működési ideje csontpótló anyag. Fent azt mutatták, hogy az epigenetikai stimulálása idegi őssejtek egy sejtproliferációkban már előre elkészített neurális fenotípust, ami korlátozza a számukat. Abban az esetben, totipotens embrionális őssejt tulajdonságok proliferációját, míg elegendő számú sejt történik korábban neurális differenciálódását, a sejteket szaporítjuk, és könnyen átalakítható a neurális fenotípus. A neurális őssejtek PGC izoláljuk a belső sejttömegéből blasztociszták tenyésztettük és kötelező jelenléte LIF, amely megőrzi a totipotenciát, és képesek osztódni. Ezután a retinsavat az ESC idegi differenciálódása indukálja. Transzplantáció így kapott neurális őssejtek a sérült kinolin és 6-hidroxi-dopamin striatum kíséri differenciálódásukhoz dopaminerg és a szerotonerg neuronok. Való bevitel után a kamrák az agy embrió patkány neurális progenitor sejtek származó PGC vándorolnak különböző területein a címzett agyban, beleértve az agykérget, a striátumban, a szeptum, talamusz, a hipotalamusz, és a kisagyban. A sejtek maradt a kamrai üregben, epiteliális formában struktúrák emlékeztető neurális cső, valamint az egyes szigetek neneyralnoy szövetet. Az agyban parenchima recipiens embrió transzplantált sejtek termelnek három fő típusa idegrendszeri sejtek. Néhány közülük hosszúkás apikális dendritek piramissejtek sejttestek és bazális axonok kiálló a corpus callosum. Asztrociták donor eredetű nyúlik a folyamatok közeli kapillárisok és oligodendrociták szorosan érintkezik mielin hüvely, részt vesz a kialakulását mielin. Így, neurális progenitor sejtek származnak PGC in vitro, amely képes irányítani a megfelelő migrációs és differenciációs jelek regionális mikrokörnyezetet biztosít számos területen a fejlődő agyban neuronok és a gliasejtek.

Egyes szerzők megvizsgálják a felnőtt szervezet regionális őssejtjeinek de- és transzdifferenciálódásának lehetőségét. A közvetett bizonyítéka a dedifferenciáció sejteket tenyészetben a bővítéséhez az energiák az adatok megtapadását neurális őssejtek egerekben csontvelőben a későbbi fejlődését ezen sejtvonalak, így egy funkcionálisan aktív sejtek a perifériás vérben. Továbbá, transzplantáció, a genetikailag jelzett (LacZ) neuroszféra származó sejtek érett vagy embrionális agyban, az agyba a besugárzott egerek mieloszuppresszió, kialakulásához vezetett az őssejtek nem csak neurális származékok, de az is okoz a generációs vérsejtek, jelezve, hogy a pluripotens neurális őssejtek, amelyek az agyon kívül valósulnak meg. Így, neurális őssejtek képesek differenciálódni vérsejtek hatása alatt a jeleket a csontvelő mikrokörnyezetében ideiglenes átalakulás a hematopoietikus őssejt. Másrészt, a transzplantáció a csontvelő vérképző őssejtek az agyban meghatározott differenciálódását hatása alatt a mikrokörnyezet az agyszövet a glia és az idegsejtek. Következésképpen, a potenciális eltérés rovochny neurális és hematopoietikus őssejtek nem korlátozott szöveti specifitást. Más szóval, a helyi mikrokörnyezet más tényezők, mint a jellemző, az agy és csontvelő szövetek megváltoztathatja a tájolást a differenciálódás ezen sejtek. Az eredmények azt mutatják, hogy a neurális őssejtek befecskendezése a vénás rendszer sugárkezelt egerek, létre a lépben és a csontvelőben a lakosság mieloid, limfoid és éretlen hematopoietikus sejtek. In vitro A hatás a csontvelő morfogén fehérjék (BMP-k) a túlélését és differenciálódását neurális őssejtek meghatározzuk, mint a korai szakaszában az embriogenezis a fejlesztés a neurális és gliális irányban. A tenyészeteket a neurális őssejtek 16 napos patkány embriók BMP-ket indukáló asztroglia és neuronok, mivel tenyészetekben őssejtek származó perinatális agyi asztrociták alakult csak. Továbbá, a BMP-ket elnyomja generációs oligodendrociták in vitro, hogy csak akkor jelennek meg hozzáadásával noggin antagonista BMP-ket.

Folyamatok inherens vidonespetsifichnost transzdifferenciálódás: haematopoeticus stem sejtek humán csontvelő transzplantált striátumába felnőtt patkányok, vándorolnak a fehérállományban a külső kapszula, ipsi- és ellenoldali neokortex amennyiben azok astrotsitopodobnye sejtes elemek (Azizi és munkatársai, 1998). A allotranszplantációja csontvelői őssejtek a laterális kamrába újszülött egerek migráció a hematopoetikus őssejtek vezethető vissza, hogy az előagy és a kisagyi struktúrák. A striatum és a molekuláris réteg a hippokampusz vándorolt sejtek transzformált az asztrocitákban, és a bulbus olfactorius, a belső réteg a kisagyi sejtekben és az agytörzs retikuláris kialakítása a neuron sejtek pozitív reakciót a neurofilament. Intravénás befecskendezés után a vérképző sejtek a felnőtt egerek GFP-jelölt mikro- és asztrocitákat kimutatható a neokortex, thalamus, agytörzs és a kisagy.

Ezen túlmenően, mezenchimális őssejtek a csontvelőben, hogy ad okot az összes típusú kötőszöveti sejtek, bizonyos körülmények között, is keresztül neurális transzdifferenciálódás (visszahívás, hogy a forrás az embrionális mesenchyma vannak idegtaréj sejtek). Kimutatták, hogy a stromális humán csontvelő és egér sejtek in vitro tenyésztünk jelenlétében EGF vagy BDNF, kifejezetten egy markere neurális progenitor sejtek nestin, és a hozzáadott különböző kombinációinak növekedési faktorok képződéséhez vezet a sejtek markerek glia (GFAP) és neuron (core protein NeuN). A jelölt szingén mezenchimális őssejtek ültettük át az oldalsó agykamrába újszülött egerek, vándorolnak és helyezkednek el az előagy és a kisagyban törés nélkül cito-architektúra a recipiens agyban. A csontvelő mezenchimális őssejtek differenciálódnak érett asztrociták a striatumban és a molekuláris réteg a hippocampus, valamint feltölti a szaglógumó, a kisagy és a granulátum réteg retikuláris formáció, amelyek átalakítják a neuronok. Mezenchymális őssejteket a humán csontvelő képesek differenciálódni in vitro be macroglia és a transzplantáció után integrálódni a szerkezet a patkányok agyában. Közvetlen csontvelő-transzplantációt mesenchymalis őssejtek a felnőtt patkány hippocampus is kíséri a migráció az agy parenchyma és neurogliális differenciálás.

Feltételezzük, hogy a transzplantáció a csontvelői őssejtek növelheti a képességét, a sejtterápiát központi idegrendszeri betegség jellemzi a túlzott patológiás az idegsejtek halálához. Meg kell jegyezni azonban, hogy nem minden kutató elismeri a tényt kölcsönös átalakulását az ideg- és a vérképző őssejtek, főleg a körülmények in vivo, ami miatt többé nem állnak rendelkezésre megbízható markerek felmérni a transzdifferenciálódás és továbbfejlesztését.

Az őssejtek beültetése új távlatokat nyit a celluláris génterápiás örökletes neurológiai rendellenességek. A genetikai módosítás a neurális őssejtek magában behelyezését szabályozó genetikai konstrukciók, amelynek termékei kölcsönhatásban vannak sejtciklus-fehérjék az automatikus vezérlési mód. A transzdukciós ezen gének embrionális őssejtek szaporítására használt neurális őssejtek. A legtöbb, a genetikailag módosított sejt-klónok úgy viselkedik, mint a stabil sejtvonalak, semmi jelét sem mutatta az átalakulás in vivo vagy in vitro, de rendelkezik a kifejezett képessége kapcsolatba a proliferáció gátlása. Ha megszorozzuk transzplantáció transzfektált sejtek már beágyazódott a szövet a címzett, anélkül, hogy elszakadna cytoarchitectonics és anélkül, hogy előzőleg a malignus transzformáció. Donor idegi őssejtek nem deformálódnak az integrációs zóna és egyformán versenyeznek helyet a fogadó progenitor sejtek. Azonban 2-3 napon intenzitás osztódó transzfektánsok sejtek drámai mértékben csökkent, ami megfelel a kontakt gátlás azok proliferációját in vitro. Az embrió címzett neurális őssejtek transzfektánsoknak nincsenek anomáliák a központi idegrendszer, az összes agyi területeken érintkezik a graft, normálisan fejlődnek. A transzplantáció után, a klónok a neurális őssejtek gyorsan migrálnak a terület a beadás és gyakran túlnyúlnak a mindenkori germinális zónák rostralis traktus megfelelő integrálása más területek az agyban. Beágyazása genetikailag módosított klónok és transzfektált sejtvonalak neurális őssejtek az agy egy gazdaszervezet jellemző nem csak az embrionális időszakban: ezeket a sejteket ültetünk be több zónában CNS magzat, újszülött, felnőtt és még öregedés organizmus recipiens és mutatnak ugyanakkor a kapacitás megfelelő integrációt és differenciálás. Különösen, a transzplantáció után az üregbe a agykamrák transzfektált sejtek vándorolnak károsítása nélkül a vér-agy gáton, és a szerves komponenseket a celluláris funkcionális agyszövet. Donor neuronok képezik szinapszisok megfelelő és kifejezni specifikus ioncsatornák. Integritásának fenntartása mellett a vér-agy gáton asztroglia származékot neurális őssejt-transzfektánsok, kiterjeszti folyamatok az agyi véredényeket, és oligodendrociták donor eredetű kifejezett mielin bázikus fehérjét és myelinizációs neuronális folyamatok.

Ezenkívül a neurális őssejteket transzfektálják sejtvektorokként való alkalmazásra. Az ilyen vektor-genetikai konstrukciókat, hogy stabil in vivo idegen gének expresszióját részt vesz a fejlesztés az idegrendszer vagy a használt korrekció a genetikai hiba, mert a termékek ezen gének képesek kompenzálni a különböző biokémiai CNS rendellenességek. A transzfektált őssejtek magas migrációs aktivitása és a fejlődő agy különböző területeinek embrionális zónáiban történő megfelelő beültetés lehetővé teszi számunkra, hogy reménykedjünk a celluláris enzimek örökletes hiányának teljes helyreállításában. Amikor modellezése szindróma, ataxia-telangiectasia (mutáns egerekben pg és PCD) Purkinje a kisagy eltűnnek kísérleti állatok első heteiben a születés utáni fejlődés. Kimutatták, hogy az idegi őssejtek bejuttatását ezen állatok agyába a Purkinje sejtek és granuláris neuronok differenciálódása kísérte. A pcd mutánsokban a mozgások koordinációját részben korrigálják, és a tremor intenzitása csökken. Hasonló eredményeket értek el a klónozott humán idegi őssejtek transzplantációjában olyan főemlősökre, amelyekben a Purkinje sejt degenerációját onkanáz indukálta. Az átültetés után donor idegi őssejteket találtak a granuláris és a molekuláris rétegekben, valamint a cerebelláris parenchyma Purkinje sejtrétegében. Ezért az idegi progenitor sejtek genetikai módosítása képes a fenotípus stabil, elkötelezett módosítására, amely ellenáll a külső hatásoknak. Ez különösen fontos a kóros folyamatokban, amelyek a donorsejtek túlélésének és differenciálódását gátló tényezők (pl. Immun-agresszió) gátlásával járnak.

Mucopolysaccharidosis típusú VII emberekben jellemző fokozatos neurodegeneráció, és késleltetett szellemi fejlődés, hogy kísérletek egereken modellezett deléciós mutációt a gén béta-glükuronidáz. Transzplantációt követően az agykamrák újszülött egerek deficiens recipiens transzfektált neurális őssejtek szekretáló béta-glükuronidáz, donor sejteket találtunk az első terminál területén, majd elosztva az agyi parenchyma stabilan korrigiruya lizoszomális integritását az agyban a mutáns egerekben. A modellben a Tay-Sachs-betegség transzdukált retrovírus neurális őssejtek in utero adminisztráció egér magzatban és újszülött egerek transzplantáció nyújt hatékony expresszióját a béta-alegységét a béta-hexózaminidáz recipiensekben egy mutációt, amely elvezet a kóros felhalmozódása a béta 2-gangliozid.

Egy másik terület a regeneratív gyógyászat célja, hogy ösztönözze a proliferatív és differenciálódását potenciális beteg saját idegi őssejteket. Különösen, neurális őssejtek sejtek NT-3 egy hemiszekcióhoz képest a gerincvelő és agyi asphyxia a patkányok kifejezni NGF és BDNF a septum és a bazális ganglionok, a tirozin-hidroxiláz - a striatumban, és reelin - a kisagy és a mielin bázikus fehérje - az agyban .

Azonban nyilvánvalóan nemigen figyeljünk eléggé az neuronogenezis stimulálására. Az a néhány más munkák azt sugallják, hogy a funkcionális terhelést a neuralgikus felelős megkülönböztető szagokat, tükröződik a kialakulását az új idegsejtek. A transzgenikus egereket hiányos neuronális adhéziós molekulák neyronogeneza intenzitás csökkentése és számának csökkenése a migráló neuronok a szaglógumó társult károsodott diszkriminációs képességét szagok, bár a szag küszöbértéket, és a rövid távú szaglási memória nem sérülnek. A szabályozás jelentős szerepet játszik a neyronogeneza funkcionális állapot a sejtek a dentate gyrus: a gyengítő hatása a glutamát kezelés-szemcsék pusztulása után a sejtek a entorhinális kortex hozzájárul a proliferációját és differenciálódását neuronok és rostok perforáns útvonal stimuláció (primer afferens bemenetet hippocampus) gátlását okozza neyronogeneza. Antagonistái az NMDA-aktivált receptorok feldolgozza neoplazma neuronok, mivel agonisták, ellenkezőleg, csökkenti az intenzitását neyronogeneza értelemben hasonlít az intézkedés a glükokortikoidok. A szakirodalomban egymásnak ellentmondó kutatási eredmények: információk kísérletileg igazolt gátló hatását serkentő neurotranszmitter glutamát neyronogenez nincs összhangban az adatokat a stimuláció tenyésztési progenitor sejtek és a megjelenése új neuronok növelésével görcstevékenységet a hippocampus az állatok kísérleti és kain pilocarpic modell az epilepszia. Ugyanakkor, a hagyományos modell az epilepszia ismételt adagolásával indukált küszöb alatti stimulálása az egyes területeken, az agy (gyújtós), és az jellemzi, kevésbé súlyos neuronvesztés neyronogeneza intenzitása növekszik csak a késői fázisban a forgácsot, amikor megfigyelhető a hippokampuszban károsodás és az idegsejtek halálához. Az eredmények azt mutatják, hogy az epilepsziás roham aktivitást serkentő neyronogenez abnormális lokalizációja új szemcsés neuronok, amelyek közül sok megjelenik nemcsak a fogazott gyrus, hanem a nyiroknedv. Ezek a neuronok fontos a fejlődés a csírázása moharostok, az axonok mivel ezek nincsenek jelen a normális fedezetek inverz képező szinapszisok több szomszédos szemek-sejtek.

A regionális idegi őssejtek alkalmazása új távlatokat nyit meg a sejtek átültetésének a metabolikus és genetikai neurodegeneratív betegségek, demyelinizáló betegségek és a központi idegrendszeri funkciók utáni traumás rendellenességeinek kezelésében. A szubsztitúciós sejtek átültetése előtt az egyik módszer kiválasztja és kiterjeszti az ex vivo idegi progenitor sejtek szükséges típusát azzal a céllal, hogy később közvetlenül az agy sérült területére kerüljön. A terápiás hatás ebben az esetben a sérült sejtek vagy a növekedési faktorok és a citokinek helyi felszabadulása miatt válik helyessé. A regeneratív műanyag terápia eme módja elegendő számú sejtet képes átültetni előre meghatározott funkcionális jellemzőkkel.

Megfelelő kell ismerni, és további tanulmányokat a molekuláris sajátosságok és regeneratív és műanyag potenciálok őssejtek az érett agyban, egy valamint az a képesség, hogy transzdifferenciálódását regionális őssejtek különböző szöveti eredetű. Ma árnyékolt antigének hematopoietikus csontvelő őssejtek meghatározása a marker kombinációja képes sejtek transzdifferenciáitathatók neurális őssejtek progenitor sejtek (CD 133+, 5E12 +, CD34-, CD45-, CD24). Az újszülött immunhiányos egerek agyába való átültetés során olyan sejteket alakítanak ki, amelyek in vitro neurogömböket képeznek és idegsejteket alkotnak. A sejt-xenotranszplantológia iránti érdeklődés az evolúciósan távoli taxonok egyénekben történő kereszt-őssejt-transzplantáció lehetőségének vizsgálatára vezethető vissza. Továbbra nélkül megfelelő az eredmények értelmezése a beültetése neurális őssejtek területén az agydaganatok: az átültetett sejtek aktívan vándorolnak át a teljes a tumor térfogata, anélkül, hogy azon túl, és a bevezetése a sejtek intakt része az agy megfigyelt azok aktív migrációs felé tumor. Az ilyen migráció biológiai jelentőségének kérdése továbbra is nyitva áll.

Meg kell jegyezni, hogy a sikeres transzplantációját idegrendszeri őssejtek, valamint más neurális progenitor sejtek származó hESCs, csak akkor lehetséges körülményei között használata rendkívül neurális progenitor sejtek differenciálatlan embrionális őssejt transzplantáció felnőtt immunkompetens recipiens elkerülhetetlenül átalakul teratoma és teratokarcinóma. Még egy minimális mennyiségű gyengén differenciálódott sejtek a donor sejtszuszpenziót drámaian növekszik és tumorgenézisre graft elfogadhatatlanul növeli a tumorképződést, vagy neneyralnoy szövetben. Előállítása homogén populációi neurális progenitor sejtek akkor lehetséges, ha használják, mint egy alternatív donor szövet sejtjeit eredő bizonyos szakaszaiban általában áramló embriogenezis. Egy másik megközelítés, hogy alaposan elkerülhetők a nem kívánatos sejt populációkra családfa specifikus kiválasztása. Veszély továbbá biztosítja a célból neurotransplantation hESCs után alulexponálást in vitro növekedési faktorok. Ebben az esetben a hiba nem zárható ki idegi differenciálódási program szerkezeteket alkothatnak rejlő velőcső.

Ma már világos, hogy a neurális őssejtek mutatnak tropizmusával CNS kóros elváltozásokat, és egy hangsúlyos regeneráló plasztikus hatást. A mikrokörnyezet a forrás sejthalál idegszövet szimulálja tájolása differenciálódását graftolt sejtek, visszanyerve ezáltal a hiány specifikus neurális elemek a központi idegrendszer területére. Bizonyos neurodegeneratív folyamatok játszódnak neurogén jeleket a visszatérés neyronogeneza és érett idegi őssejtek az agyban képesek reagálni a utasító információt. Az idegi őssejtek terápiás potenciáljának világos bemutatása a kísérleti tanulmányokból származó számos adat. Intraciszternális beadása klónjai neurális őssejtek állatok ligálását a középső agyi artéria (ischaemiás stroke modellben) segít csökkenteni a terület és térfogat romboló változások az agyi területen, különösen abban az esetben a transzplantáció a neurális őssejtek FGF2-vel. Immunokitokémia szerint a donorsejtek migrációja az iszkémiás zónába, majd integrálódásuk a befogadatlan agysejtjeivel. Transzplantáció éretlen neuroepiteliális sejtvonal MHP36 egér patkány agy kísérleti szélütés javítja szenzomotoros funkció és a bevezetése ezek a sejtek az agyba kamrák javítja a kognitív funkciót. Ennek eredményeként a transzplantáció, patkányok előformázott hematopoietikus neurális-humán csontvelő sejteket eltávolítjuk diszfunkciója agykéreg által okozott ischaemiás sérülés. Így a heterológ neurális progenitor sejtek vándorolnak az injekció helyén be a zónába a pusztító változások az agyszövet. Koponyán belüli transzplantáció csontvelői sejtek homológ traumás sérülése agykéreg patkányok eredményezi részleges helyreállítását motoros funkció. Prizhivlyayutsya donor sejtek szaporodnak mennek neurális differenciálódását neuronokban és asztrocitákban, és felé vándorolnak a lézió. Beadva a striatum felnőtt patkányok kísérleti szélütés klónozott humán neurális őssejtek cserélje ki a sérült CNS-sejtek és részlegesen helyreállítani a megzavart agyműködés.

A humán neuronális őssejteket elsősorban az embrionális telencephalonból izolálják, amely jelentősen később alakul ki, mint a nagyobb kaudális idegtájak. Az a lehetőség, izolálása neurális őssejtek a gerincvelő 43-137-nap az emberi magzat, mint a jelenlétében EGF és FGF-2 ezek a sejtek képezik neuorsphere és a korai átmeneteket mutatnak multipotentiality differenciálódni neuronokban és asztrocitákban. Azonban a hosszú távú tenyésztésére neurális progenitor sejtek (több mint 1 év) megfosztja őket multi-potensek - ilyen sejtek csak differenciálódni asztrociták, azaz, azok unipotent. Regionális neurális őssejtek állíthatjuk elő részleges bulbektomii szaporítjuk és tenyészetben jelenlétében LIF átültetett ugyanannak a betegnek a neurodegeneratív változásokat más részein a központi idegrendszerben. A klinikán először az idegi őssejtek alkalmazásával helyettesítő sejtes terápiát hajtottak végre az agyalapi ganglionok károsodásával járó stroke-betegek kezelésére. A donorsejtek transzplantációja következtében a legtöbb beteg klinikai állapota javult.

Egyes szerzők úgy vélik, hogy a képesség, idegi őssejtek prizhivlyatsya sejtek vándorolnak, és integrálja a különböző területeken az idegszövet sérült központi idegrendszerre korlátlan lehetőségeket nyit meg a sejtek a kezelés nem csak a helyi, hanem a kiterjedt (stroke vagy fulladás), multiochagovyh (sclerosis multiplex), és még a globális ( a legtöbb örökletes anyagcsere-rendellenességek vagy neurodegeneratív dementia), kóros folyamatok. Valóban, amikor az átültetést a klónozott neurális őssejtek egér és humán sejt recipiens állatok (egerek és a főemlősök, sorrendben) a dopaminerg neuronok degenerálódása a mezostrialnoy rendszer által indukált bevezetése metil-fenil-tetrapiridina (modell a Parkinson-kór) 8 hónappal a transzplantációt megelőzően, a donor neurális őssejtek be vannak építve a címzett CNS-be. Egy hónappal később, az átültetett sejtek találhatók kétoldalúan mentén középagy. Része a kapott neuronális eredetű fejezi tirozingidrolazu donor hiányában immunválasz egy transzplantáció. A kezelt patkányok 6-hidroxi-dopamin (egy másik kísérleti modellje a Parkinson-kór), az alkalmazkodás a mikrokörnyezetében a transzplantált sejtek a gazda-agy úgy határoztuk meg, tenyésztési körülmények a neurális őssejtek transzplantáció előtt. Idegi őssejtek gyorsan szaporodó in vitro hatása alatt EGF, tette fel a dopaminerg neuronok mértük a sérült sejtek hatékonyabban, mint a 28 napos tenyészetekben. A szerzők úgy vélik, hogy ez a veszteség miatt képesek érzékelni a jeleket a megfelelő differenciálás sejtosztódás során in vitro idegi őssejtek.

Egyes tanulmányok próbálják javítani a hatását a sérült striatum újrabeidegződés folyamatok ültetik ezen a területen az embrionális sejtek striatum forrásként neurotróf faktorok egyidejű transzplantációja a dopaminerg neuronok a ventrális mesencephalonban. Mint kiderült, a neurotranszplantáció hatékonysága nagymértékben függ az embrionális idegszöveti beiktatás módjától. Ennek eredményeként a kutatás transzplantáció készítmények magzati idegszövet a ventrikuláris rendszer az agy (sérülések elkerülése érdekében striatalis parenchyma) kapott információt a pozitív hatása a parkinsonos motor hiba.

Azonban, más vizsgálatokban, kísérleti megfigyelések azt mutatták, hogy az átültetésre az agyba kamrába készítmények embrionális ventrális mesencephalonban idegszövet tartalmazó dopaminerg neuronok, mint a kiültetés GABAerg idegi elemek az embrionális patkány striátumban gemiparkinsonizmom nem járul hozzá a helyreállítása a károsodott funkciók a dopaminerg rendszer. Éppen ellenkezőleg, immuncitokémia megerősítette a bizonyítékok alacsony dopaminerg neuronok túlélését és a ventrális mesencephalon, átültetett a striatum patkányok. Terápiás hatás intraventrikuláris transzplantáció embrionális ventrális középagyi idegszövet megvalósítani csak, amikor az egyidejű beültetés idegmentesítjük striatum készítmény striatális embrionális sejtek. A szerzők arra utalnak, hogy a mechanizmus ezen hatás társul pozitív trofikus hatása a GABAerg sejtek az embrionális striatumban a specifikus dopaminerg aktivitás intraventrikuláris transzplantátumok ventrális mesencephalonban. Kifejezve glia reakciót transzplantátumok kísérte enyhe regressziós mutatók apomorfin-tesztben. Az utóbbi viszont, összefüggést mutatott a szérum tartalommal GFAP, amely rámutat, közvetlenül a megsértése a vér-agy-gát permeabilitás. Ezen adatok alapján a szerzők arra a következtetésre jutott, hogy a GFAP szérum használható, mint megfelelő intézkedésként a funkcionális állapot a transzplantációs, és fokozott permeabilitása vér-agy gáton neurospecific GFAP-típusú antigén egy kóroki kapcsolat a fejlesztés a graft-elégtelenség miatt autoimmun idegszövet sérülésére a recipiens .

A szempontból más kutatók, megtapadását és integrálása a neurális őssejtek transzplantáció után stabil és az élet, mint donor sejtek találhatók a kedvezményezett legalább két évvel a transzplantáció után, anélkül, hogy jelentősen csökkenti a számukat. Kísérletek megmagyarázni ezt az a tény, hogy a differenciálatlan állapotban idegi őssejtek nem fejeznek MHC I és II szinten kiváltásához elegendő immunválasz kilökődési reakció, lehet érvényesnek tekinteni, csak az a rosszul differenciált neurális progenitor. Azonban nem minden idegi őssejt a recipiens agyában továbbra is éretlen állapotban van. Többségük differenciálódni kezd, amely során az MHC-molekulák teljes mértékben kifejeződnek.

Különösen, a hatékonyság hiánya használat kezelésére kísérleti Parkinson gyógyszerek intrastriarnoy transzplantáció embrionális ventrális mesencephalon, amely tartalmazza a dopaminerg neuronok, a rossz túlélési transzplantált dofaminer- cal neuronok (csak 5-20%), amely által okozott reaktív gliózis kísérő lokális traumát agyi parenchyma at transzplantáció. Ismeretes, hogy a helyi sérülés agyi parenchyma és a kapcsolódó gliózis vezet zavar a vér-agy gát integritását a hozzáférést a perifériás vér antigén az idegszövet, különösen neuron és okara antigént. A jelenléte a vérben ezen antigének képesek kiváltani specifikus citotoxikus antitestek őket, és alakul ki az autoimmun agresszió.

Cymbalyuk V. és munkatársai (2001) jelentés, hogy még mindig érvényben marad hagyományos szempontból, amely szerint a CNS-egy immunológiailag privilegizált területen, izolált az immunrendszer a vér-agy gáton. Az irodalom áttekintése során a szerzők számos olyan tanulmányra utalnak, amelyek arra utalnak, hogy ez a nézet nem felel meg teljesen az emlősök agyában lévő immunfolyamatok lényegének. Azt találtuk, hogy a jelzett anyag bevezetett az agy parenchimájába elérheti mély nyaki nyirokcsomók, és miután a intracerebrális antigén injektálása a test formáját specifikus antitestek. A nyaki nyirokcsomók sejtjei megfelelnek az ilyen antigének proliferációjának, az injekciót követő 5. Naptól kezdődően. A specifikus antitestek képződését a bőrtranszplantációban az agy parenchyma alakjában is kimutatták. A felülvizsgálat szerzői számos lehetőséget kínálnak az antigén az agyból a nyirokrendszerbe történő szállításához. Az egyik az antigének átjutása a perivascularis terekről a szubarachnoid térbe. Feltételezzük, hogy a nagy agyi erek mentén elhelyezkedő perivaszkuláris terek egyenértékűek az agy nyirokrendszerével. A második út a fehér szálak mentén fekszik - a rácsos csonton keresztül az orrnyálkahártya nyirokcsomóiba. Emellett kiterjedt nyirokcsomó-hálózat van a dura materban. A limfociták vérsejt-gátja is nagyon rokon. Bizonyított, hogy az aktivált limfociták képesek olyan enzimeket előállítani, amelyek befolyásolják az agy "immunszűrő" szerkezetének átjárhatóságát. A poszt-kapilláris vénák aktivált T-segítői behatolnak, és az ép vér-agy gáton keresztül. Az antigén az agyban jelenlévő sejtek hiányáról szóló tézis nem áll ellentétben a kritikával. Meggyőzően bizonyították, hogy lehetőség van arra, hogy a központi idegrendszer antigénjeit legalább három típusú sejtekkel képviseljük. Először is a csontvelő eredetű dendritikus sejtek, amelyek az agyban helyezkednek el a nagy erekben és fehér anyagokban. Másodszor, az antigének képesek bemutató endoteliális sejtek vérerek az agy, és társítva MHC antigénekkel, amely támogatja a klonális növekedés specifikus ezekre az antigénekre T-sejtek. Harmadszor, a mikro- és astroglia-sejtek antigénprezentáló szerekként működnek. Azzal hogy részt vesz az immunválasz a CNS-ben, asztrociták birtokszerzési immunnoeffektornoy sejtek és kifejezni számos antigén, citokinek és immunmodulátorok. Amikor inkubáltuk y-interferon (y-INF) in vitro asztroglia sejtek az I. Osztályú MHC-antigének és II, és a stimulált asztrociták képesek antigén képviselet és tartása a klonális limfociták proliferációját.

Brain szöveti trauma, műtét utáni gyulladás, ödéma, és a fibrin lerakódások kísérő transzplantációja magzati idegszövet, feltételeinek megteremtése permeabilitásának növelésére a vér-agy gáton megzavart-tolerancia, érzékenyítés és aktiválása SDZ + CD4 + limfociták. Az automatikus és a bemutatása alloantigének hajtjuk asztrociták és mikroglia sejtek reagálnak a y-INF expresszáló MHC molekulát, az ICAM-1, LFA-I, LFA-3, kostimulációs molekulák B7-1 (CD80) és a B7-2 (CD86), valamint a IL-la, IL-ip és y-INF szekrécióját.

Következésképpen az a tény, hogy a hosszabb túlélési embrionális neurális szövet agyon belüli átültetésével, nem pedig annak a perifériás adagolást aligha hiányának tulajdonítható megindításától transzplantáció immunitást. Különösen azért, mert a monociták, aktivált limfociták (citotoxikus CD3 + CD8 + és a helper T-sejtek), és a citokinek az általuk gyártott, valamint antitestek antigének perifériás transzplantációs magzati idegszövet jelentős szerepet játszanak annak elutasítását. Néhány fontos feltételek megteremtése egy tartósabb ellenállás neyrotransplantatov T-sejt-immun folyamatok alacsony expressziós szintje MHC-molekulák embrionális neurális szövetben. Ezért a kísérletben immunológiai gyulladás transzplantáció utáni embrionális idegszövet az agyban fejlődik lassabban után bőrátültetés. Mindazonáltal 6 hónap elteltével megfigyelhető az idegszövet egyes graftjainak teljes megsemmisülése. A területen a transzplantáció lokalizált túlnyomóan T-limfocita-korlátozott antigének MHC-II (Nicholas és mtsai., 1988). Megállapítást nyert, kísérletileg, hogy neurotransplantation ksenologicheskoy kimerítése T-helper (L3T4 +), de nem citotoxikus T-limfociták (Lyt-2), meghosszabbítja a túlélés a patkány idegszövet az agyban a recipiens egerek. A neurotranszplantáció elutasítását a makrofágok és a befogadó T-limfociták általi infiltráció kísérte. Ezért, makrofágok és aktivált mikroglia sejteket in situ fogadó járnak, mint egy immunstimuláns antigénprezentáló sejtek, és a növekedés a donor antigének MHC I. Expresszió növeli citotoxikus killer aktivitást recipiens T-limfociták.

Nincs értelme, hogy elemezze számos kísérlet megmagyarázni a spekulatív neyrotransplantata kilökődési reakció a befogadó szervezet immunrendszerének az endoteliális sejtek vagy glia donor elemek tiszta vonalakat és neurális progenitor sejtek mennek immun támadást. Figyelemre méltó üzenetet, hogy a mechanizmusok egy hosszabb graft túlélési belül a központi idegrendszer fontos szerepet játszik expressziós csontvelői sejtek Fas-ligandum kötődés apoptózis-receptor (Fas-molekula) a T-limfocitákon beszűrődő agy és apoptózist indukál, amely jellemző az a gátló autoimmunogén szövetek védőmechanizmusa.

Amint találóan megjegyezte Cymbalyuk V. és munkatársai (2001) Transplantation embrionális idegszövet jellemzi fejlődését érintő gyulladás szenzibilizált agyi antigénekkel, és aktivált sejtek, antitestek, és is köszönhető, hogy a helyi termelés citokinek. Ebben fontos szerepet játszik a szervezetnek a központi idegrendszeri betegségek kialakulásában bekövetkező, és a transzplantációs antigénekre irányulva az agyi antigénekre vonatkozó, már meglévő érzékenység. Ezért a tényleges hosszabb túlélést hisztokompatibilitási neyrotransplantatov elérni csak elnyomása az immunrendszer beadása révén a ciklosporin A vagy monoklonális antitestek a CD4 + limfociták a címzett.

Így a neurotranszplantáció számos problémája megoldatlan marad, beleértve a szövetek immunológiai kompatibilitásával kapcsolatosakat is, amelyek csak a célzott alapvető és klinikai vizsgálatok után megoldhatók.