A-vitamin a vérben

Referencia értékek (normál) szintje vitamin (retinol) a vérszérumban: gyermekek 1-6 év - 0,7-1,5 mol / l, 7-12 - 0,91-1,71 mmol / l, 13 -19 év - 0,91-2,51 μmol / l; felnőttekben 1,05-2,09 μmol / l.

A-vitamin tárgya zsíroldható és két formában - a tényleges vitamin vagy retinol (csak állati termékek) és a pro-vitamin, más néven karotin (előállított állati vagy növényi eredetű), amely átalakítható retinol a falak az emésztőrendszer. 50-90 tömeg% retinol bejövő élelmiszer szívódik fel a vékonybélben, és szállították kilomikronok kapcsolódó komplex a májba, ahol a tárolás formájában retinol-palmitát. Szükség esetén a véráramba jut, retinol formájában, amely az A-kötő fehérjével kombinálva van. A szérumban az A-kötő protein + retinol komplex kötődik a transztiretinhez. A szérumtól a retinol célsejtek, például retinális fotoreceptorok és epithelium által elfogott.

Amikor az A-vitamin belép a szervezetbe az igények felett (180-430 μg napi retinol az életkor, a szex és az élettani állapot függvényében), a feleslege a májban helyezkedik el, amely e vitamin depotját képezi. A retinol étkezésből történő csökkentett bevitelével a májat a véráramba bocsátják, a szérum retinol koncentrációját normál szinten tartva (0,7 μmol / l fölött). Az A-vitamin egyéb biológiailag aktív formái (retina és retinsav) nagyon alacsony koncentrációban (0,35 μmol / l alatt) vannak jelen a vérben; a retinol észterei az összes A-vitamin kb. 5% -át teszik ki (0,1-0,1 μmol / l).

Az A-vitamin fontos szerepet játszik az oxidációs redukciós folyamatokban. A retinol elősegíti a glikogén szintézisét a májban és az izmokban, javítja a vér koleszterin részt vesz a szintézis szteroid és nemi hormonok. Erre szükség van a növekedés és a csontképződést csontváz újraszintézisét rodopszin, és hozzájárul a normális működését a nyálkahártyák és a hámsejtek a bőr fedél, megakadályozva annak metaplázia, hyperkeratosis és a túlzott hámlással. Az A-vitamin segít erősíteni a hajat, a fogakat és az ínyt. Az utóbbi években, ez azt mutatja, változatos szerepét vitamin a rákos megbetegedések megelőzésére és a szabályozása az immunitás (esszenciális a befejezése fagocitózis, növeli a szintézis a Ig, serkenti a killer T-sejtek, stimulálja a T-helper II típusú és mtsai.). A-vitamin - aktív antioxidáns, főleg E-vitamin jelenlétében; védi a C-vitamint az oxidációtól. Az A-vitamin hiányát a rosszindulatú daganatok kockázati tényezőjeként tartják számon. Kísérleti vizsgálatokban kimutatták, hogy az étrendben lévő A-vitamin-tartalom növekedése 17,5% -kal növeli az életminőség középértékét. A cink az A-vitamin-anyagcsere lényeges kofaktora (szükséges az A-kötő fehérje szintéziséhez).

Az átlagos napi követelmény retinol felnőttek (20-50 év) volt 1,2 mg (4.000 NE, 1 NE egyenértékű 0,3 mikrogramm retinol) a terhes nők - 1,5 mg (5000 NE) a szoptatás - 1, 8 mg (6000 NE), 60 év felettieknél - 2,5 mg (10 000 NE). A retinol napi szükségletének legalább egyharmadát kész formában kell a szervezet rendelkezésére bocsátani; a többi karotinoidok felszívódhatnak, melyből a retinol alakul ki. Emlékeztetni kell arra, hogy az élelmiszerekben lévő retinol körülbelül 30% -a hőkezeléssel pusztul el. A retinol aktivitása kétszerese a karotinnak, emellett az utóbbi csak 30-40% -a abszorbeálódik a bélbe. Ezért a táplálékbevitel megítélésekor úgy tekinthető, hogy 1 mg retinol megközelítőleg 6 mg karotinoidnak felel meg.

A retinol (A-vitamin) és karotinoidok szérumban történő meghatározása Bessey szerint LA Anisimova

A módszer elve

Az A-vitamin és a karotinoidok meghatározása lúgos alkohol oldatban való hidrolízisén alapul, majd szerves oldószerek keverékével extraháljuk.

Reagensek

• 11 M kálium-hidroxid-oldat (KOH).
• 96% etil-alkohol.
• 1 mólos kálium-hidroxid (KOH) 96% -os etil-alkohollal készült oldatát 1 térfogat 11 M KOH oldatot összekeverjük 10 térfogat 96% -os etil-alkohollal. A reagens a vizsgálat napján készül. Ha a keverés során festés történik, az alkoholt használat előtt lepárlással kell tisztítani.
• Xylol, hp.
• Oktan, h.ch.
• Xilol-oktán keverék: előállítva egyenlő térfogatú xilol és oktán keverékével.

A vizsgálatokat spektrofotométeren végezzük.

Az A-vitamin meghatározásának folyamata

Az ujjából vett vért (kb. 1 ml) a centrifuga címkéjébe vittük, és 20-30 percig üveges pohárba helyeztük meleg vízzel (40-45 ° C hőmérsékleten). A szérum elválasztásához a vérrögt óvatosan vékony üvegrúddal csévéljük fel a cső szélén, és 10 percen át 3000 fordulat / perc sebességgel centrifugáljuk.

Válasszon 0,12 ml szérumot, és vigye át egy agglutinációs csőbe, majd adjunk hozzá 0,12 ml 1 M alkoholos kálium-hidroxid-oldatot. A tartalmat alaposan megrázzák.

A próbákkal ellátott kémcsöveket 20 percig vízfürdőbe helyezzük 60 ° C hőmérsékleten a hidrolízishez.

A mintákat lehűtjük és 0,12 ml xilol-oktán keveréket adunk hozzá, 10-15 másodpercig erőteljesen rázzuk. Hűtsük újra és centrifugáljuk.

Óvatosan távolítsuk el az A vitamint és a karotinoidokat tartalmazó felső réteget egy Pasteur pipettával egy gumibakkal, és vigyenek át mikrokvótákra.

A minták 328 nm hullámhosszon spektrofotometriásak - A-vitamin meghatározására és 460 nm-es hullámhosszra - a karotinoidok meghatározására.

Miután spektrofotometriával a vizsgált mintát ultraibolya sugárzásnak alávetve megsemmisítésére vitamin E célból, a parttól 15-20 cm-re a kvarc microcuvettes beállított (baktericid) lámpa úgy, hogy a besugárzás kitett része a küvetta, folyadékkal töltött; Az expozíciós idő 45-60 perc.

A minták ismételten spektrofotometriásak 328 nm hullámhosszon. Az A-vitamin tartalmát a kihalási értékek különbségéből (optikai sűrűség) határozzák meg, figyelembe véve a Bessey által az A-vitaminra kiszámított 637 együtthatót (faktor).

A számítás a következő képlet szerint történik:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Ahol X az A-vitamin-tartalom, μg / dL; 637 a Bessey által az A-vitamin meghatározására kiszámított együttható; Е328 (1) - az oldat optikai sűrűsége a besugárzás előtt; Az E328 (2) az oldat optikai sűrűsége a besugárzás után.

Az A-vitamin koncentráció μg / dL-ben történő átvitelének együtthatója μmol / l-ben 0,035.

A karotinoidok tartalmát a következő képlet adja meg:

X = 480-E480,

Ahol X a karotinoidok tartalma, μg / dL; 480 a Bessey által a karotinoidok meghatározására kiszámított együttható; Az E480 a vizsgálati oldat optikai sűrűsége.

Megjegyzés

Bessey szerint nagyobb vagy kisebb szérummennyiségeket lehet venni a vizsgálatok során, de aránya az alkoholos oldat térfogatának állandónak kell lennie a xilol-oktán térfogatának (mennyiségének) bármilyen változásával.

Az A-vitamin tartalma a vérszérumban: újszülötteknél és csecsemőknél: 160-270 μg / l; felnőtteknél 1,05-2,45 μmol / l (300-700 μg / l). A karotinoidok tartalma a felnőtt szérumban 800-2300 μg / l.