Hemoblasztózisok immunfenotípusozása

Jelentős előrelépés a hematológiai vizsgálatokat társult az utóbbi években a modern immunológiai módszerekkel és automatizált eszközök elemzésére és válogatás sejtek a perifériás vérből és csontvelőből - áramlási citométerek. Hagyományos morfológiai és citokémiai tanulmány a szubsztrát sejt betegség (vér, csontvelő, a nyirokcsomók, a lép, stb), sok esetben, különösen a limfoproliferatív betegségek, nem mutatják az egész különböző lehetőségek közül morfológiailag hasonló formában, és azonosítani az eredete a patológiás klón . Ezeket a problémákat csak a sejtek immunológiai jellemzőinek tanulmányozásával lehet megoldani. Minden egyes szakaszában a vérképző sejtek saját sorozata antigének, amelyek a nemzetközi osztályozás néven differenciálás és differenciálódás bontjuk, amelyet CD-n.

Blokknál neopláziás változások előfordulhatnak bármely szakaszában a sejt normális fejlődését, így a kóros sejt-klón meghatározó szubsztrát-betegség és amelynek ugyanaz immunológiai (vagy fenotípusos) jellemző. Miután egy tanulmány ezen markerek sejtekben lehet meghatározni bármilyen formában vagy megvalósítási módja a betegség konzisztens, azaz alapján immunológiai sejt fenotípus differenciáldiagnózis, amely a legnehezebb limfoproliferatív rendellenességek, mert a fő sejtszubsztrátban patológiás betegségek majdnem azonos típusú sejtek morfológiailag.

Phenotyping lehetővé teszi monoklonális ellenanyagok alkalmazásával tipizált blasztos sejtek és az érett mieloid vér, mono-, limfocitás sorozat jelenlétében differenciálódási antigének (receptorok) a sejtfalban. A "A szervezet immunállapotának értékelése" részben a sejtjelzők jellemzőit és diagnosztikai jelentőségét részben leírják; Az alábbiakban röviden ismertetjük a hemoblastosis diagnózisára alkalmazott antigénsejt-markereket. A vérsejtek membránján és a vörös csontvelőn a következő antigéneket (markerek) lehet azonosítani.

• A CD2 egy monomer transzmembrán glikoprotein. Jelen van a keringő T-limfociták és néhány NK-limfociták felületén. A CD2 részt vesz a T-limfociták alternatív aktiválásának folyamatában. A CD2 monoklonális antitestek klinikai gyakorlatban történő kimutatását akut T-sejtes leukémiák, lymphomák, krónikus gyulladásos és immunhiányos állapotok fenotipizálására alkalmazzák.
• A CD3 - egy antigénspecifikus T-sejt-receptorhoz társított proteinkomplex a T-limfociták fő funkcionális markere. Ez megkönnyíti az aktivációs jel átvitelét a membránról a sejt citoplazmájába. A CD3 kimutatás az akut T-sejtes leukémia, a limfóma (a CD3 nem expresszálatlan nem T-sejtes limfoid tumorokban) és az immunhiányos betegségek diagnózisára szolgál.
• CD4 - transzmembrán glikoprotein által kifejezett egy részhalmaza T-helper (induktorok) alkotó 45% perifériás vér limfociták. A kezdeti szakaszban a limfocita fejlődés a csecsemőmirigyben, CD4 antigének, valamint CD8 kifejezett összes kérgi limfociták. Medullaris timociták, amely hasonló a fenotípus az érett CD4 + perifériás vér T-sejtek (helper T-sejtek), vagy már a CD4 expresszálására, vagy CD8 receptorokat. Perifériás vérben a sejtek legfeljebb 5% -át egyidejűleg CD4 és CD8 jelölik. A CD4 enyhe expressziója lehetséges néhány monocita sejten. CD4 expresszálódik a legtöbb esetben, a T-sejtes limfóma, beleértve mycosis fungoides, valamint HTLV-asszociált T-sejtes leukémia (HTLV - humán T-limfotropikus vírus - humán T-limfotróp vírus).
• A CD5 - egy láncú glikoprotein, amely minden érett T-limfocitán és a legtöbb timocitán jelen van, gyengén expresszálódik a B-limfocitákban. A CD5 kimutatható a B-sejtes krónikus limfocitás leukémia és a centrális citrom lymphoma neoplasztikus sejtjein. Más típusú rosszindulatú nyirokcsomó-betegségek - follikuláris limfóma, szőrös sejt leukémia, nagysejtes limfóma - a CD5 nem expresszálódik.
• A CD7 egyszálú fehérje, amely a legelső T-sejt-differenciálódás. A pro-T-limfociták még akkor is kifejezték, mielőtt a tímuszba vándorolnak. A CD7-et a legtöbb NK-sejten detektálják, gyenge expressziót figyeltek meg a monocitákon. A B-limfociták és granulociták nem tartalmazzák ezt az antigént. A CD7 meghatározását a limfómák, a gyermekek T-sejtes limfoblasztikus leukémia diagnózisára használják.
• A CD8 egy olyan fehérje, amely diszulfid hidakkal kapcsolt két polipeptidláncból áll. A citotoxikus és szuppresszor T-limfociták szubpopulációjával fejeződik ki, amely a perifériás vér limfocitáinak 20-35% -át teszi ki. Ez az antigén NK-limfocitákkal, agykérgi timocitákkal, a medulláris timociták 30% -ával és vörös csontvelő sejtek szubpopulációjával rendelkezik. A CD8-at megvizsgáljuk a T-szuppresszor tartalom kvantitatív értékeléséhez (lásd a fenti "T-limfociták-szuppresszorok a vérben" című részt).

• A CD10 a sejtmembránhoz kapcsolódó endopeptidáz. A CD10 expresszálja a fiatal B-limfociták formáját és a kortikális limfociták szubpopulációját. A CD10 minden sejtet expresszál.
• CD11c expressz makrofágokat, monocitákat, granulocitákat, NK sejteket és szőrös sejt leukémiás sejteket a sejtmembránon.
• A CD13 egy mielomonocita sejtek (progenitor sejtek, neutrofilek, basophilok, eozinofilok, monociták és mieloid leukémia sejtek) által expresszált glikoprotein. T és B limfocitákban, eritrocitákban és vérlemezkékben nincs jelen.
• A CD14 felületi membrán glikoprotein. Főleg monociták és makrofágok fejezik ki. A CD14-et a perifériás vér és a csontvelő több mint 95% -os monocitáiban detektálják. A CD14 erős expresszióját akut myeloblasticus leukémiában figyeljük meg. Akut és krónikus limfoblasztikus leukémiában ez az antigén nem expresszálódik.
• A CD15 egy oligoszacharid. Részt vesz a fagocitózis és a kemotaxis folyamatában. Ez az antigén jelen van az érett granulociták és Berezovsky-Sternberg sejtek felületén. A CD15 antigén expresszióját Hodgkin-kórban detektálják. A nem-Hodgkin-limfómákban a CD15-t a legtöbb esetben nem észlelték.
• A CD16 a granulociták, monociták, makrofágok és NK sejtek felületén expresszálódik. Az antigént expresszáló összes limfocitának képesnek kell lennie antitestfüggő sejtes citotoxicitásra. A CD16-t a krónikus myelocytás leukémiák tipizálása során határozzák meg az NK-sejtek jellemzésére.
• A CD19 egy glikoprotein, amely minden perifériás B limfocitákon, valamint minden B-sejt-prekurzoron jelen van. Hiányzik a plazmasejteken. Ez a B-sejtek legkorábbi markerje, fontos szerepet játszik a B-limfociták aktiválásában és proliferációjában. A CD19 expresszálódik a B-sejt eredetű akut leukémia összes neoplasztikus sejtjén, és akut monoblaszt leukémia bizonyos formáiban is jelen van.
• A CD20 nem glikozilált fehérje. A B-limfociták ontogenezisében a CD20 antigén CD19 jelenlétében jelenik meg a limfociták pre-B-sejt-differenciálódásának szakaszában. Nem jelenik meg a plazmasejtek plazmamembránján. Expresszálódnak az összes, a B-sejtes krónikus limfocitikus leukémia, hajas sejtes leukémia, Burkitt-limfóma, és nagyon ritkán - az akut leukémia monoblastny.
• A CD21 egy glikoprotein, amely jelentős mennyiségben jelen van a limfoid szervek B-limfocitáin és kis mennyiségben a perifériás vér B-sejtjein. A CD21 egy receptor az Epstein-Barr vírus számára.
• A CD22 két polipeptidláncból álló fehérje. A legtöbb B-limfociták membránján expresszálódik, beleértve a progenitor sejteket (prolymphocyták). Az antigén nem expresszálódik a B-limfocitákon (plazmasejtek) aktiválásuk után. A CD22 legelterjedtebb expresszióját szőrössejtes leukémiás sejteken mutatják ki, gyenge - myeloid leukémia és nem T-sejt ALL.
• A CD23 a perifériás vér aktív B-limfocitáival kifejezett glikoprotein sokkal nagyobb mértékben. A CD23 közvetíti az IgE-függő citotoxicitást és a fagocitózist makrofágok és eozinofilok segítségével.
• A CD25 egyláncú glikoprotein, amelyet az IL-2 alacsony affinitású receptoraként azonosítottunk. Ez a receptor aktivált T-limfocitákon expresszálódik, és kisebb sűrűségben aktivált B-sejteken. Egészséges emberek perifériás vérében az antigén a limfoid sejtek több mint 5% -ánál jelen van.
• A CD29 egy fibronektinreceptor. Széles körben elterjedt a szövetekben, leukocitákban fejezik ki. A perifériás vérsejteken CD29 detektálást alkalmaznak a CD4 + CD29 + fenotípusú T-sejtek szubpopulációjának jellemzésére, amelyeket a 2. Típusú segítőnek (Th2) neveznek. Ezek a sejtek a limfocinek előállításán keresztül részt vesznek a humorális immunválasz megvalósításában.
• A CD33 egy transzmembrán glikoprotein. A myeloid és a monocytás sejtek sejtjein található. A monociták felületén, és kisebb mértékben a perifériás vér granulocitáin találhatók. A vörös csontvelő sejtek körülbelül 30% -a expresszálja a CD33-at, beleértve a myeloblastokat, promyelocitákat és myelocytákat. Az antigén hiányzik a pluripotens őssejtek membránján. A CD33 a mieloid leukémiák sejtjeinek jellemzésére szolgál. A limfóma és erythemás eredetű leukémiás sejtek nem expresszálják a CD33-at.
• A CD34 egy foszfoglikoprotein, amelyet hematopoetikus progenitor sejtek expresszálnak, beleértve a monopotens őssejteket. Az Ar legelterjedtebb expresszióját a korai progenitorokban figyelték meg; amikor a sejtek érkeznek, a marker kifejeződése csökken. A CD34 az endoteliális sejteken is megtalálható. A CD34-et a sejtek jellemzésére használják akut myelogenous és lymphoblastic leukaemiában. A krónikus limfocitikus leukémiában és limfómákban a CD34 antigén expresszióját nem detektálják.

• A CD41a-t vérlemezkék és megakaryociták fejezték ki. A CD41a detektáláshoz monoklonális antitesteket használnak a megakaryoblast leukémia diagnosztizálására. Glązmann thrombasthenia esetén ezen antigén expressziója hiányzik vagy jelentősen elnyomódik.
• A CD42b két polipeptidláncból álló membrán-glikoprotein. A marker megtalálható a vérlemezkék és a megakariocita sejtek felszínén. A klinikai gyakorlatban a CD42b kimutatását a thrombocytopathia - Bernard-Soulier-szindróma diagnosztizálására használják.
• A CD45RA a transzmembrán glikoproteinek osztályába tartozik. Ez egy közös leukocita antigén. A B-limfociták sejtmembránján, kisebb mértékben T-limfocitákon és érett medulláris timocitákon expresszálódik. A markert nem fejezi ki a granulociták.
• A CD45RO egy CD45RA kis molekulatömegű izoforma, amely egy közös leukocita Ag. T-sejteken találhatók (memória T-limfociták), B-limfociták, monociták és makrofágok szubpopulációi. A CD45RO monoklonális antitestek a legtöbb thymocytákkal érintkeznek, a nyugalmi CD4 + és CD8 + T-limfociták és az érett aktivált T-sejtek szubpopulációja. A myelomonocytás eredetű sejtek, a granulociták és a monociták szintén hordozzák ezt az antigént. Kimutatható a centroblasztikus és immunoblasztos limfómákban.
• CD46-O-glikozilezett dimer. Ez széleskörűen eloszlik a szövetekben és a kifejezett T- és B-limfociták, monociták, granulociták, NK-sejtek, vérlemezkék, endotél sejteket, fibroblasztokat, de hiányzik a felszínen eritrociták. A CD46 biztosítja a szövetek védelmét a komplement hatásoktól.
• A CD61 egy vérlemezke antigén. A perifériás vér és a vörös csontvelő, valamint a megakaryocyták és a megakaryoblast vérlemezkén expresszálódik. Meghatározása az akut megakaryoblast leukémia markere. Az antigén expressziója hiányzik vagy elnyomódik Glanzmann trombaszténia esetén.
• A CD95, más néven Fas vagy APO-1, transzmembrán glikoprotein, amely a tumor nekrózis faktor receptorainak családjába tartozik. Jelentős mennyiségben expresszálódik a perifériás vér T-limfocitákon (CD4 + és CD8 +) és kisebb mértékben a B-limfocitákra és NK-sejtekre. Ez az antigén a granulocitákon, monocitákon, szöveti sejteken és neoplasztikus sejteken is expresszálódik. A CD95 kötődése a Fas ligandumhoz (CD95L) apoptózist indukál a sejtekben.
• CD95L vagy Fas ligandum, a tumor nekrózis faktor receptorainak családjához tartozó membránfehérje. Ezt az antigént citotoxikus T-limfociták, NK-sejtek és nagyon gyakran tumorsejtek expresszálják; az apoptózis fő induktora a sejtekben.
• A HLA-DR a fő humán hisztokompatibilitási komplex (HLA) II. Osztályú molekuláinak monomorf meghatározója. Marker expresszálódik Langerhans-sejtek, dendritikus sejtek limfoid szervek, és bizonyos típusú makrofágok, B-limfociták, az aktivált T-sejtek és a csecsemőmirigy hámsejtek. Ennek a markernek a tesztjét használják az aktivált T-limfociták számszerűsítésére a CD3 + HLA-DR + fenotípussal.

A markerek monoklonális antitestjeinek eltérő választékát felhasználva leukémia ilyen formájára jellemző sejtek fenotípusos portréját készíthetjük.

Használata mellett immunfenotipizálás technikák diagnózis és differenciáldiagnózis hematológiai rosszindulatú betegségek, különösen fontos fordult azok használatát a kezelési eljárásban, hogy értékelje az állam a remisszió és maradék népesség a leukémiás sejtek. Ismerve a fenotípusos „portré” a leukémiás sejtek az időszakban a diagnózis, hogy ezek a markerek nem talál sejt leukémiás klón elengedés, valamint a megnövelt számuk - megjósolni a fejlődés a visszaesés hosszú (1-4 hónap), míg annak klinikai és morfológiai tulajdonságok.

[1], [2], [3], [4],