Az örökletes betegségek diagnosztikájának immunológiai módszerei

Az utóbbi időben a fő hisztokompatibilitási komplexet, a HLA-t (humán leukocita antigének) a populációgenetika fontos immunológiai markerének tekintik. Ennek a rendszernek az antigénjeit immunológiailag határozzák meg a vér leukocitáiban. A HLA génkomplex kompakt módon a 6-os kromoszóma rövid karján (6p21.3) található. A rendszer lokalizációja és a kromoszómán lévő lokuszainak kiterjedése lehetővé tette számunkra, hogy kiszámítsuk, hogy a komplex a szervezet génkészletének körülbelül 1/1000-ed részét teszi ki. A hisztokompatibilitási antigének részt vesznek a szervezet immunválaszának szabályozásában, az immun homeosztázis fenntartásában. Polimorfizmusuk és a HLA antigének kompakt lokalizációja miatt nagy jelentőségre tettek szert genetikai markerként.

Jelenleg ennek a rendszernek több mint 200 allélját fedezték fel; ez az emberi test genetikai rendszerei közül a legpolimorfabb és biológiailag legjelentősebb. A fő hisztokompatibilitási komplex különböző funkcióinak zavarai számos betegség, elsősorban autoimmun, onkológiai és fertőző betegségek kialakulásához járulnak hozzá.

A HLA komplex 6. kromoszómán elfoglalt helye szerint a következő lókuszokat különböztetjük meg: D/DR, B, C, A. Az új G, E, H, F lókuszokat viszonylag nemrég fedezték fel; biológiai szerepüket jelenleg aktívan tanulmányozzák. A fő hisztokompatibilitási komplexben három antigénosztályt különböztetnek meg. Az I. osztályú antigéneket az A, B és C lókuszok kódolják. Új lókuszok is ebbe az osztályba tartoznak. A II. osztályú antigéneket a DR, DP, DQ, DN és DO lókuszok kódolják. Az I. és II. osztályú gének transzplantációs antigéneket kódolnak. A III. osztályú gének a komplement komponenseket (C2, C4a, C4b, Bf), valamint számos enzim (foszfoglükomutáz, glikoxiláz, pepszinogén-5, 21-hidroxiláz) izoformáinak szintézisét kódolják.

Az Ag jelenléte egy bizonyos betegséggel összefüggően egy személyben lehetővé teszi számunkra, hogy fokozott hajlamot feltételezzünk erre a patológiára, és bizonyos összefüggésekben éppen ellenkezőleg, ellenállást vele szemben.

A HLA rendszer antigénjeinek meghatározását perifériás vérből izolált limfocitákon végezzük hisztotípusos szérumokkal mikrolimfocitotoxikus reakcióban vagy molekuláris genetikai módszerekkel.

A betegségek és a fő hisztokompatibilitási komplex antigénje közötti asszociatív kapcsolatok létrehozása lehetővé teszi:

• azonosítsa a betegség kialakulásának fokozott kockázatának kitett csoportokat;
• meghatározza annak polimorfizmusát, azaz azonosítja a betegség lefolyásának vagy patogenezisének jellemzőivel rendelkező betegcsoportokat; e tekintetben elvégezhető a betegségek szintropiájának elemzése, azonosítva a különböző patológiai formák kombinációjának genetikai előfeltételeit; a betegségekkel szembeni rezisztenciát meghatározó antigénekkel való kapcsolat lehetővé teszi azon egyének azonosítását, akiknél csökkent a patológia kialakulásának kockázata;
• betegségek differenciáldiagnosztikájának elvégzése;
• meghatározza a prognózist;
• optimális kezelési taktikát dolgozzon ki.

Mivel a legtöbb betegségnek nincs közvetlen kapcsolata a fő hisztokompatibilitási komplex antigénjeivel, a betegségek és a HLA antigének közötti összefüggés magyarázatára a „kétgénes” elméletet javasolták. Ezen elmélet szerint létezik egy immunválasz gén(ek) (Ir gén), amely(ek) szorosan összefügg a HLA antigénekkel és az immunválaszt szabályozó génekkel. A védő gének a betegségekkel szembeni rezisztenciát, a provokatív gének pedig bizonyos betegségekkel szembeni érzékenységet határozzák meg.

A betegség relatív kockázatát a megfelelő genotípusú egyének esetében a következő képlettel számítjuk ki: x = [h _p × (1 - h _c )] / [h _c × (1 - h _p )], ahol h _p a tulajdonság gyakorisága a betegeknél, h _c pedig a kontrollcsoport egyéneknél.

A relatív kockázat megmutatja a betegség és a HLA-rendszer egy bizonyos antigénje/antigénje közötti összefüggés mértékét (képet ad arról, hogy hányszor nagyobb a betegség kialakulásának kockázata antigén jelenlétében annak hiányához képest). Minél magasabb ez a mutató egy betegnél, annál nagyobb az asszociatív kapcsolat a betegséggel.

Emberi betegségek összefüggése a HLA-Ag-vel (géngyakoriság,%)

Betegségek	HLA	Kontrollcsoport,%	Beteg,%	Relatív kockázat
Reumatológia
Bechterew-kór	B27	5-7	90-93	90-150
Reiter-szindróma	B27	6-9	69-76	32-49,6
Fertőzés okozta ízületi gyulladás:
- Yersinia	B27		58-76	17.59
- Szalmonella	B27		60-69	17.57
Pikkelysömörös ízületi gyulladás	B13		9-37	4.79
Rheumatoid arthritis	Dw4	12-19	48-72	3,9–12,0
	DR4	20-32	70	4,9–9,33
Behcet-szindróma	B5	13	48-86	7,4–16,4
SKV	B5		11-34	1.83
	B8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26.4	57.1	3.80
	DR3	22.2	46,4	2,90
Gougerot-Sjögren-szindróma	B8		38-58	3.15
	Dw3	26	69-87	19.0
Kardiológia
IHD	B7	27.8	45,8	2.19
	B14	7.5	14.8	2.14
	B15	11.1	20.4	2.05
	Cw4	18.7	32,8	2.12
Magas vérnyomás	B18	10.4	22.6	2.52
	2019. ápr.	12.6	28.3	2.74
Endokrinológia
1-es típusú cukorbetegség	B8	32	52-55	2,1–2,5
	B18		5-59	1,65
	B15	12	18-36	1,89-3,9
	Dw3	26	48-50	2,9-3,8
	Dw4	19	42-49	3,5-3,9
	DR3 DR3/DR4	20	60	6.10 33
Pajzsmirigy-túlműködés	B8	21	35-49	2,34-3,5
	D3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
Szubakut pajzsmirigy-gyulladás (de Quervain-kór)	Bw35	13	63-73	16.81
	Dw1		33	2.1
Addison-kór	B8		20-80	3,88-6,4
	Dw3	26	70-76	8,8-10,5
Itsenko-Cushing-szindróma	A1		49	2.45
Gasztroenterológia
Káros vérszegénység	B7	19	26-52	1,7–3,1
	DR5	6	25	5.20
Atrófiás gyomorhurut	B7		37	2,55
A nyombél peptikus fekélye	A2	48.1	61.3	1.7
	A10	20.6	63.3	6.65
	B14	4.0	10.3	2.76
	B15	6.6	24.4	4.56
	B40	9.72	23.3	2.82
Autoimmun hepatitisz	B8	16	37-68	2,8–4,1
	DR4	24	71	7,75
HBsAg hordozók	Bw41		12	11.16
	B15		10-19	0,29

Betegségek	HLA	Kontrollcsoport,%	Beteg,%	Relatív kockázat
Bőrgyógyászat
Pikkelysömör	Bw17	6-8	22-36	3,8–6,4
	B13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Bw16	5	15	2.9
Herpetiformis dermatitis	B8	27-29	62-63	4.00-4.6
	DR3	19	80	16.60
Szkleroderma	B7	24	35	1.7
Bőrhólyagosodás	A10			3.1
Atópiás dermatitis	B13	6.86	21.28	3.67
	B27	9,94	25,53	3.11
	A10/B13	0,88	8.51	10.48
Ekcéma	A10	19.64	36,67	2.37
	B27	9,94	26,67	3.29
Urticaria és Quincke ödéma	B13	6.86	21,21	3,65
	B5.8	1.42	12,12	9.57
	B5.35	0,71	6.06	9.02
Ideggyógyászat
Szklerózis multiplex	A3	25	36-37	2,7-2,8
	B7	25-33	36-42	1,4-2,0
	Dw2	16-26	60-70	4.3-12.2
	DR2	35	51.2	1,95
	DR3	20	32,5	1,93
Miaszténia	B8	21-24	52-57	3,4–5,0
	A1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2.5
Pulmonológia
Bronchiális asztma (19-30 éves betegeknél)	B21	4.62	12,5	2,95
	B22	9,94	19.64	2.22
	B27	12.31	37,5	4.27
	B35	0,11	5.36	51,4
	B27/35	0,47	7.14	16.2
Egyéb betegségek
Vazomotoros rhinitis	A3	26,98	52,38	2,98
	B17	7.57	28,57	4.88
	A3/10	2.72	23,83	11.18
	B7/17	0,47	9.52	22.28

A táblázatban bemutatott adatok azt mutatják, hogy a legerősebb asszociatív kapcsolatok a poligénes vagy multifaktoriális öröklődésű betegségek esetében találhatók.

Így a fő hisztokompatibilitási komplex antigénjeinek meghatározása vérsejteken (leukocitákon) lehetővé teszi számunkra, hogy azonosítsuk az egyén egy adott betegségre való hajlamának mértékét, és bizonyos esetekben a kutatási eredményeket felhasználjuk differenciáldiagnosztikára, prognózisértékelésre és kezelési taktika kiválasztására. Például a HLA-B27 antigének kimutatását az autoimmun betegségek differenciáldiagnosztikájában alkalmazzák. A kaukázusi rasszú betegek 90-93%-ánál kimutatható Bechterew-kórban és Reiter-szindrómában. E rassz egészséges képviselőinél a HLA-B27 antigéneket csak az esetek 5-7%-ában mutatják ki. A HLA-B27 antigéneket gyakran kimutatják pikkelysömörös ízületi gyulladásban, krónikus gyulladásos bélbetegségekben, amelyek sacroiliitissel és spondylitissel járnak, uveitisben és reaktív ízületi gyulladásban.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]