A cikk orvosi szakértője
Új kiadványok
PCR-t a genetikai betegségek diagnosztizálásának módszereként
Utolsó ellenőrzés: 23.04.2024
Minden iLive-tartalmat orvosi szempontból felülvizsgáltak vagy tényszerűen ellenőriznek, hogy a lehető legtöbb tényszerű pontosságot biztosítsák.
Szigorú beszerzési iránymutatásunk van, és csak a jó hírű média oldalakhoz, az akadémiai kutatóintézetekhez és, ha lehetséges, orvosilag felülvizsgált tanulmányokhoz kapcsolódik. Ne feledje, hogy a zárójelben ([1], [2] stb.) Szereplő számok ezekre a tanulmányokra kattintható linkek.
Ha úgy érzi, hogy a tartalom bármely pontatlan, elavult vagy más módon megkérdőjelezhető, jelölje ki, és nyomja meg a Ctrl + Enter billentyűt.
PCR - Újabb eredmények a molekuláris genetika, szaporítjuk fel a DNS-t és lehetővé teszi, hogy gyorsan szaporodnak in vitro specifikus DNS-régiót (azaz bármilyen kívánt gén) több, mint 200 000-szer. A reakció elvégzéséhez elegendő, ha egy sejt DNS-anyaga van; a PCR-vel amplifikált DNS mennyisége olyan nagy, hogy ez a DNS egyszerűen megfesthető (radioaktív próbák használatával elektroforézis után). A szükséges feltétele a PCR - ismerete a nukleotidszekvencia az amplifikált DNS-régió, hogy a megfelelő kiválasztása a mesterségesen szintetizált primerek.
Jelenleg, PCR olyan folyamat, amely akkor fordul elő, amelyek egyetlen csőben, és álló ismétlődő amplifikációs ciklus (szaporodás, másolás) specifikus DNS-szekvenciák előállítása céljából kellően nagy számú másolatok lehet azonosítani elektroforézissel. A reakció egyik legfontosabb összetevője a "láncindítók" - szintetikus oligonukleotidok, amelyek 20-30 bázisból állnak, kiegészítve a templát DNS azonosított helyén lévő hegesztés (kötődés) "helyek" (szakaszok) hozzáadásával.
A PCR automatikusan programozható termosztátban (thermocycler) dolgozik. Háromlépcsős ciklus, amelyben replikák kapunk azonosítható része a templát DNS, megismételtük 30-50 alkalommal megfelelően egy előre meghatározott program thermocycler. Az első ciklusban oligoprimer hibridizálnak az eredeti templát-DNS, majd (a következő ciklusokban) és az újonnan szintetizált DNS-molekulák, mint a felhalmozódása a reakcióelegyben. Az utóbbi esetben, a DNS-szintézis nem ér véget a hőmérséklet-változás, és elérve az amplifikált DNS-polimeráz határ menti terület, amely meghatározza a méret a újonnan szintetizált DNS-régió, hogy belül egy nukleotid.
A kapott DNS-molekulák detektálására szolgáló eljárásként elektroforézist alkalmaznak, amellyel az amplifikált anyagot amplikonok (amplifikációs termékek) méretének megfelelően osztjuk meg.
A PCR segítségével közvetlenül megvizsgálható a feltételezett mutációk vagy polimorf helyek lokalizációjának helyszínei, valamint a DNS bármely más sajátosságának vizsgálata.
[